Способ определения содержания меди в водной среде Советский патент 1993 года по МПК A01K61/00 G01N33/18 

Изобретение относится к способам диагностирования наличия тяжелых металлов с применением биологических объектов и может быть применено в водной токсикологии, при очистке и контроле промышленных стоков,в аквакультуре.

Целью изобретения является ускорение, повышение чувствительности и специфичности способа определения меди в водной среде.

На фиг. 1 показано строение нормальной личинки двустворчатого моллюска; на фиг. 2 - личинка, развивавшаяся в присутствии ионов меди. У нормальной личинки хорошо видна D-образная раковина, у личинки, развивавшейся в присутствии ионов меди, раковин нет, а видны две темных глобулы углекислого кальция.

Из таблицы видно, что предлагаемый способ обеспечивает определение присутствия меди в 3 раза быстрее, чем в прототипе, и является более чувствительным.

П р и м е р 1, Берут оплодотворенные яйцеклетки двустворчатого моллюска Calllsta brevlsiphonata и помещают в раствор, содержащий 0,04 мг/л ионов меди. Одновременно контрольная порция яиц помещается в чистую воду. И опытная и контрольная порции яиц инкубируются при температуре 24°С и через 16 часов просматривают опытную и контрольную пробы пгод микроскопом. В пробе, содержащей ионы меди, нет нормальных личинок. Уродливые личинки лишены раковины и имеют 2 хорошо заметные темные глобулы углекислого кальция внутри (фиг. 1). В контрольной пробе 90.6 ± 0,1% нормальных зародышей с D-обраэной раковиной (фиг. 1). Личинки с двумя темными глобулами внутри в контрольной пробе отсутствуют.

00 00

ел ю

СА 4

П р и м е р 2. Берут оплодотворенные яйцеклетки вида CalHsta brevlslphonata двустворчатых моллюсков и помещают в раствор, содержащий 0,004 мг/л ионов меди, контрольную порцию яиц помещают в чистую воду. Все дальнейшие операции проводят также, как в предыдущем примере. В пробе, содержащей ионы меди, обнаруживается 45,2 ±0,2% уродливых личинок со специфическими аномалиями в строении: двумя темными глобулами внутри. В контрольной пробе нормальные личинки составляют 90,6±0.1%, специфических уродств в контрольной пробе не обнаружено.

ПримерЗ. Берут оплодотворенные яйцеклетки вида Calllsta brevlslphonata двустворчатых моллюсков и помещают в раствор, содержащий 0.0004 мг/л ионов меди, контрольную порцию яиц помещают в чистую воду. Дальнейшие операции проделывают так же, как в примере 1. В пробе, содержащей ионы меди, обнаруживаются 75.8±0,2 нормальных личинок, специфиче; ских аномалий строения нет. В контрольной пробе обнаруживается 90.6±0.1 % нормальных личинок, специфических аномалий строения не обнаружено.

П р и м е р 4. Берут оплодотворенные яйцеклетки двустворчатого моллюска вида Crassostrea glgas и помещают их в раствор, содержащий 0,04 мг/л меди. Контрольную порцию яиц помещают в чистую воду. Обе порции инкубируют при 24°С и просматривают через 14 ч, В пробе, содержащей ионы меди, нет нормальных личинок, личинки имеют специфические уродства: две крупные темные глобулы внутри. В контрольной пробе 88,8% личинок имеют нормальное строение, специфических аномалий развития нет.

П р и м е р 5. Берут оплодотворенные яйцеклетки вида Crassostrea glgas и помещают в раствор, содержащий 0,004 мг/л ионов меди. Дальнейшие операции, как в примере 4. В пробе, содержащей ионы меди, обнаруживается 49,2±0.06% уродливых личинок со специфическими аномалиями Строения - двумя темными глобулами внутри тела. В контрольной пробе 88,8% ±0,04%

нормальных личинок, специфических аномалий строения нет.

Примерб. Берут оплодотворенные яйцеклетки вида Crassostrea glgas и помещают в раствор, содержащий 0,0004 мг/л. Дальнейшие операции, как в примере № 4. В пробе, содержащей ионы меди, обнаруживается 26,5 ±0,04% уродливых зародышей, но специфических аномалий среди них нет.

В контрольной пробе 88,8±0,04% нормальных личинок, специфических аномалий нет. Пример. Берут оплодотворенные яйцеклетки вида CalHsta brevlslphonata и помещают в раствор, содержащий 0,04 мг/л

ионов меди. Контрольную порцию помещают в чистую воду. Последующие операции, как в примере 1, но просмотр проводится через 6 ч. 8 опытной и контрольной порции обнаруживаются бластулообразные зародыши без специфических аномалий развития.

Пример 8. Берут оплодотворенные яйцеклетки вида Calllsta brevisiphonata и все операции проводят, как в примере 1, но

просмотр проводят через 12 ч. В опытной и контрольной порции обнаруживаются активно плавающие ресничные зародыши без специфических аномалий развития. Формул а изобретен и я

Способ определения содержания меди в водной среде, предусматривающий помещение оплодотворенных яйцеклеток двухстворчатых моллюсков в пробы с чистой (контроль) и исследуемой (опыт) водой, инкубацию, получение личинок и суждение о присутствии меди при отличиях физиологического показателя в опыте по сравнению с контролем,отличающийся тем,что,с целью ускорения определения меди, инкубацию проводят при температуре воды 23- 25°С в течение 14-16 ч, при этом в качестве физиологического показателя используют наличие или отсутствие раковины у личинок и наличие непрозрачных глобул углекислого

кальция внутри тела личинок, а о присутствии меди в концентрации боле 0,004 мг/л судят по отсутствию раковины у личинок и наличию внутри ее тела двух непрозрачных глобул углекислого.кальция.

Изобретение относится к способам диагностирования наличия тяжелых металлов, а именно меди, с применением биологических объектов и может быть применено в водной токсикологии, при очистке и контроле промышленных стоков, в аквзкультуре. Цель изобретения - ускоряет, повышает специфичность и чувствительность способа определения меди в водной среде. Способ определения содержания меди в водной среде состоит в помещении оплодотворенных яйцеклеток двустворчатых моллюсков в пробу воды, содержащей ионы меди, и их инкубации в течение 14-16 ч пои температуре , после чего регистрируют уличи- нок отсутствие раковины и наличие двух непрозрачных глобул углекислого кальция внутри тела, по наличию которых судят о присутствии ионов меди в концентрации выше 0,004 мг/л. 2 ил., 1 табл. « Ј

Фиг. I. Нормальная личинка двустворчатого моллюска: р - раковина

Рие. . Личинка двустворчатого моллюска развившаяся в присутствии ионов ме, меди: г - глобулы темного материала - углекислого кальция внутри личинки.