СПОСОБ ИССЛЕДОВАНИЯ ВЛИЯНИЯ ЭФИРНОГО НАРКОЗА НА ПРОЦЕССЫ ТКАНЕВОГО ДЫХАНИЯ Советский патент 1966 года по МПК G01N33/48 

Известные способы исследования влияния наркоза на процессы тканевого дыхания заключаются в том, что получают гомогенаты или митохондрии из исследуемых органов наркотизированного животного и определяют активность тканевого дыхания. Указанные способы не позволяют получать точные результаты из-за снижения удельной концентрации наркотика в ткани во время исследования.

В предлагаемом изобретении для сохранения в ткани исходной концентрации наркотического вещества его добавляют в растворы, используемые при обработке ткани. Концентрацию наркотического вещества в растворах сохраняют равной или близкой к концентрации наркотика в исследуемой ткани.

Для проведения исследования у наркотизированного животного извлекают печень, быстро просущивают фильтровальной бумагой и Отсекают часть ткани для определения содержания в ней эфира. Остальную часть быстро погружают в заранее взвещенный охлажденный раствор эфирной сахарозы, содержание эфира в которой должно соответствовать концентрации его в печени ( + 15в/о)- Повторным Взвешиванием в эфирной сахарозе определяют навеску взятой печени, после чего приливают раствор эфирной сахарозы с таким расчетом, чтобы вес ее превосходил навеску ткани в 1,5 раза. Ткань измельчают механическим гомогенизатором (30 сек), добавляя во взвесь 4,5-5,0 мл раствора эфирной сахарозы (концентрация эфира 200-300 лг O/Q) . Затем ткань измельчают в стеклянном гомогенизаторе с тефлоновым пестиком (30 сек), добавляя во взвесь 5,0 мл эфирной сахарозы. Полученную взвесь фильтруют через два слоя

марли, добавляют еще 5,0 мл эфирной сахарозы с концентрацией эфира, равной исходной его концентрации в печени, и центрифугируют 10 мин при 3000 об/мин. В полученную надсадочную л идкость добавляют 5,0 мл эфирной

сахарозы равновесной концентрации. Все операции проводят при О-2°С. Полученный эфирный гомогенат центрифугируют 10 мин при 11000 об/мин, центрифугат сливают, а осадок промывают эфирной сахарозой и растирают стеклянным пестиком. Центрифугирование повторяют при тех же условиях и вновь суспендируют осадок в эфирной сахарозе. Полученные эфирные митохондрии сливают в пробирку, плотно закрывают и хранят на холоду. При изучении тканевого дыхания в аппарате Варбурга или полярографе используют известную методику, однако для предотвращения потери эфира из раствора с митохондриями во все добавляемые реактивы вводят 3 Предмет изобретения 1. Способ исследования влияния эфирного наркоза на нроцесс тканевого дыхания, заключающийся в том, что получают гомогена-5 ты или митохондрии из исследуемых органов наркотизированного животного и определяют активность тканевого дыхания, отличающийся 4 тем, что, с целью сохранения в ткани исходной концентрации наркотического вещества, в растворы, используемые в процессе обработки ткани, добавляют наркотическое вещество, 2. Способ по п. 1, отличающийся тем, .что концентрацию наркотического вещества в растворах сохраняют равной или близкой к концентрации наркотика в исследуемой ткани.