Способ определения биологической активности веществ Советский патент 1975 года по МПК C12K1/00 

1

Изобретение относится к области медицины, а именно к токсикологии.

Известен способ определения биологической активности различных соединений с использованием в качестве модели куриных эмбрионов.

Цель изобретения - повышение чувствительности.

Для этого определяют изменение веса эмбриона и его внутренних органов через 5- 6 дней после введения исследуемого вещества.

Способ определения биологической активности веществ осуществляют следующим образом.

Берут исследуемый препарат и готовят 10или 100-кратные (от цельного до 10- либо 10) разведения в стерильной дистиллированной воде либо стерильным физиологическом растворе (0,85%-ном растворе хлористого натрия) рН 7,0-7,2.

В опыт берут куриные яйца с эмбрионами в возрасте 8-9 суток, предварительно промытые теплой водой с мылом и протертые этиловым 96° спиртом в области воздушной камеры. Помещают их в обычные картонные щтативы для яиц в вертикальном положении, воз; душной камерой вверх. Буравчиком делают точечное отверстие, через которое иглой со шприцем вводят на глубину 0,2-0,5 см одно из разведений препарата в объеме 0,2 мл с последующей заливкой отверстия расплавленным парафином. Каждым разведением препарата инъецируют не менее 3-5 эмбрионов.

Контролем служат 2 группы эмбрионов по 5-10 штук в каждой.

После того как исследуемые растворы препарата введены в воздушную камеру куриного яйца и запарафинировано входное отверстие, помещают их со штативом на 5-6 суток в условия увлажненной, периодически вентилируемой камеры термостата при температуре 37°С.

По мере достижения 14-суточного возраста куриных эмбрионов подопытные и контрольные группы яиц вскрывают общепринятым методом и извлекают пинцетом эмбрион, который взвешивают, и вычисляют средний вес эмбриона (в граммах) по группам. Одновременно учитывают выживаемость эмбрионов, их подвижность и степень развития (в

процентах).

Затем у извлеченных эмбрионов разрезают вдоль брюшную стенку и грудную клетку, извлекают печень и сердце, также по группам, взвешивают и высчитывают средний их вес

(в мг). Затем полученные в подопытных группах данные сравнивают с данными контрольной группы (интактные эмбрионы).

Средний вес 14-суточного эмбриона, его печени и сердца в контроле принимают зг

100%. Для подопытных групп (по разведениям препарата) делают пересчет в процентах.

Учет и стандартизацию стимулирующей активности препарата ведут по 3 дозам: большие - цельный препарат и разведение 10 средние - разведения от 10- до 10- и малые - разведения от 10 До 10- и выше. К высокоактивным препаратам относят вещества, повышающие средний вес эмбриона более чем на 20%, к средней степени стимулирующей активности относят вещества, повышающие

вес эмбриона на 5-20%, и слабоактивным - менее 5%.

Предмет изобретения

Способ определения биологической активности веществ на модели развивающегося куриного эмбриона, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности, определяют изменение веса эмбриона и его внутренних органов через 5-б дней после введения исследуемого вещества.