СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ КОМПЛЕКСНОЙ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОЙ КОРМОВОЙ ДОБАВКИ ДЛЯ ЖИВОТНЫХ НА ОСНОВЕ ЭМБРИОНАЛЬНЫХ И РАСТИТЕЛЬНЫХ СУБСТРАТОВ Российский патент 2008 года по МПК A23K1/14 A23K1/16 

Область техники к которой относится изобретение

Изобретение относится к ветеринарии, в частности к способам приготовления комплексной биологически активной кормовой добавки для животных на основе эмбриональных и растительных субстратов.

Уровень техники

Известен способ приготовления биологически активной взвеси из костей, которые консервируют при температуре 2-4°С в течение четырех суток. Затем кости автоклавируют при 4 атм. в течение 3 часов, после чего высушивают в сушильном шкафу при температуре 70-100°С в течение двух суток, измельчают в шаровой мельнице и просеивают через густое сито. Полученную костную муку таким образом смешивают с 0,2%-ным раствором агар-агара в соотношении 1:2 и разливают во флаконы с притертыми пробками и автоклавируют в течение 1 часа при 120°С (см. Техника приготовления тканевых препаратов // Стимулирующая терапия. в ветеринарии. И.А.Калашник. 2-е изд., перераб. и доп. - К.: Урожай, 1990. - с.66-67).

Недостатком данного способа являются высокая стоимость материалов, сложность и многоступенчатость.

Известен способ получения адаптогена из тканей животного и растительного происхождения, включающий измельчение сырья, его гидролиз и выделение целевого продукта, при этом в качестве сырья для получения адаптогена используют листья с мелкими ветками, корневища с корнями, кору, плоды растений и органы и ткани животных, гидролиз которых проводят гидроокисью щелочных металлов, а выделение целевого продукта осуществляют органической или минеральной кислотой.

В способе гидролиз тканей растительного происхождения проводят 1,0-5,0%-ным раствором гидроокиси натрия, или гидроокиси калия, или гидроокиси лития, или их смеси, взятых в равных частях, а гидролиз тканей животного происхождения осуществляют 7,5-12,5%-ным раствором гидроокиси щелочных металлов или их смеси, взятых в равных количествах.

В способе для выделения целевого продукта используют аскорбиновую, янтарную, фумаровую, лимонную, винную, молочную кислоту или их смеси, взятые в равных количествах.

В способе в качестве растворителя для солей щелочных металлов используют водопроводную, минеральную (морскую) воду, аммиак, спирт-ректификат (см. пат. РФ №2089181, кл. А61K 31/00, А61K 35/12, А61K 35/78, опубл. 10.09.1997 г.).

Недостатком данного способа является низкий выход целевого продукта и биологическая активность.

Наиболее близким по технической сущности и достигаемому положительному эффекту и принятый авторами за прототип является способ приготовления биостимулятора эмбрионального, включающий гомогенизацию яйца, охлажденного при температуре 2-4°С, разбавление, фильтрацию, при этом перед гомогенизацией яйцо инкубируют в течение 9 суток, при этом на 5, 6, 7 сутки яйцо облучают в течение 30 секунд при частоте модуляции 9 Гц и мощности излучения 9 мВт и охлаждают в течение 6-7 суток при температуре 2-4°С, причем в качестве разбавителя используют физиологический раствор в соотношении 1:10 с добавлением 5%-ного раствора фенола до его концентрации 0,3% (см. пат. РФ №2197251, кл. А61K 35/12, опубл. 27.01.2003 г.).

Недостатком данного способа является невысокая эффективность биостимулятора.

Раскрытие изобретения

Задачей предлагаемого изобретения является разработка способа приготовления комплексной биологически активной кормовой добавки для животных на основе эмбриональных и растительных субстратов, обладающего высокой эффективностью биологически активного вещества, повышающего общую и специфическую резистентного организма, а также более простого, дешевого и доступного.

Технический результат, который может быть достигнут с помощью предлагаемого изобретения сводится к повышению эффективности биологически активного вещества, общей и специфической резистентности организма, упрощению и удешевлению способа.

Технический результат достигается с помощью способа приготовления комплексной биологически активной кормовой добавки для животных на основе эмбриональных и растительных субстратов, включающий инкубирование яиц в течение 9 суток, при этом на 5, 6, 7 сутки яйцо облучают в течение 30 секунд при частоте модуляции 9 Гц и мощности излучения 9 мВт и охлаждают в течение 6-7 суток при температуре 2-4°С с последующими гомогенизацией, разбавлением и фильтрацией, при этом перед гомогенизацией к эмбриональному субстрату дополнительно вводят растительный субстрат в соотношении 1:1, причем в качестве последнего используют побеги, которые отбирают при наличии более 9 суставчиков и листья каллизии душистой (Callisia Fragrans), производят обработку побегов и листьев путем инфильтрации раствора глюкозы в стебель с последующим созданием условий гипоксии и охлаждением, причем яйца с развившимися эмбрионами отбирают перед охлаждением и обрабатывают 70%-ным раствором этилового спирта, затем после охлаждения яйца в скорлупе, побеги и листья каллизии душистой обрабатывают 5%-ным спиртовым раствором йода и облучают ультрафиолетовыми лучами в течение 18-20 мин на расстоянии 50-70 см, затем после гомогенизации полученную массу разбавляют янтарной кислотой в соотношении 1:1, так чтобы содержание последней в массе составляло 1%, а после разбавления и фильтрации субстрат подвергают тиндализации при температуре 55-60°С в течение 4-5 суток с последующей лиофильной сушкой.

Сущность способа приготовления комплексной биологически активной кормовой добавки на основе эмбриональных и растительных субстратов заключается в следующем.

Проводят отбор свежих, не инфицированных куриных яиц, затем их инкубируют в течение 9 суток с целью получения яично-эмбрионального субстрата, используемого для дальнейшей обработки по методу Филатова. При этом количественное соотношение эмбриональных и внеэмбриональных тканей должно быть примерно одинаково, что обусловливает необходимое содержание ценных компонентов яйца. На 5, 6, 7 сутки яйцо облучают по 30 секунд при частоте модуляции 9 Гц и мощности излучения 9 мВт. Это обеспечивает выраженное стимулирующее действие на ткани тимуса, селезенки, печени и сосудистую сеть внезародышевых оболочек эмбриона. Затем яйца с развившимися эмбрионами отбирают из инкубатора с помощью овоскопа по наличию эмбрионов. Очищают от грязи и пыли скорлупу и обрабатывают 70% раствором этилового спирта. Яйца без эмбриона выбраковывают. Далее охлаждают в течение 6-7 суток в холодильной камере при температуре 2-4°С, что обеспечивает максимальное получение биологически активных соединений при помещении эмбриона в условия окружающей среды, неблагоприятные для выживания. Одновременно с этим производят сбор побегов и листьев комнатного растения каллизии душистой (лат. Callisia Fragrans) при наличии на горизонтальных побегах более 9 суставчиков и создают условия для выработки биогенных стимуляторов, с помощью инфильтрации раствора глюкозы в стебель, с последующим созданием условий гипоксии, и помещения обработанного таким образом сырья в холодильную камеру при температуре 2-4°С. Подобная технология направлена на увеличение содержания органических кислот (в частности, янтарной и фумаровой) в растении, поскольку процесс их образования у растений является следствием окислительной диссимиляции сахаров и повышение содержания в воздухе углекислого газа весьма способствует накоплению данных кислот в листьях.

Далее после извлечения из холодильной камеры яиц в скорлупе и побегов и листьев растения, производят их обработку 5%-ным спиртовым раствором йода и облучают ультрафиолетовыми лампами в течение 18-20 минут на расстоянии 50-70 см для дополнительной стерилизации.

Следующим этапом приготовления кормовой добавки является гомогенизация растительного и эмбрионального сырья в пропорции 1:1. После гомогенизация полученную массу разбавляют раствором янтарной кислоты 1:1 так, чтобы содержание последней в массе составляло 1%. С ее помощью проходит кислотная экстракция, предотвращается свертываемость яичного белка, а наличие ярко выраженных антибактериальных свойств, дает право использовать ее в качестве консерванта. Кроме того, янтарная кислота является одним из промежуточных соединений в цикле Кребса. Энергетическая мощность процесса синтеза АТФ при окислении янтарной кислоты существенно выше, чем при окислении любого другого субстрата. Она способствует поддержанию естественных компенсаторных реакций организма, повышает активность клеточного дыхания и является природным антиоксидантом.

Далее полученный субстрат фильтруют через ватно-марлевый фильтр, подвергают тиндализации при температуре 55-60°С в течение 4-5 суток, разливают в стерильные флаконы и хранят в холодильнике при температуре 2-4°С. Готовую кормовую добавку возможно подвергнуть лиофильному высушиванию. В этом случае продлевается его срок хранения.

Примеры конкретного выполнения способа приготовления комплексной биологически активной кормовой добавки для животных на основе эмбриональных и растительных субстратов.

Пример 1. Проводят отбор свежих, не инфицированных куриных яиц, затем их инкубируют в течение 9 суток, при этом на 5, 6, 7 сутки яйцо облучают по 30 секунд при частоте модуляции 9 Гц и мощности излучения 9 мВт. Затем яйца с развившимися эмбрионами обрабатывают 70%-ным раствором этилового спирта и охлаждают в течение 6-7 суток при температуре 2-4°С. Одновременно с этим производится сбор растительного сырья комнатного растения каллизии душистой (лат.Callisia Fragrans) при наличии на горизонтальных побегах не менее 9 суставчиков и помещения сырья в холодильную камеру на 7 суток при температуре 2-4°С.

Далее производится обработка всего сырья 5%-ным раствором йода и облучение ультрафиолетовыми лампами с последующей его гомогенизацией в пропорции 1 часть эмбрионального и 1 часть растительного субстратов. Фильтруют, полученный раствор разливают в стерильные флаконы и подвергают тиндализации при температуре 55°С в течение 4 суток.

Полученная кормовая добавка не выдерживает тиндализацию.

Пример 2. Проводят аналогично примеру 1, т.е. проводят отбор свежих, не инфицированных куриных яиц, затем их инкубируют в течение 9 суток, при этом на 5, 6, 7 сутки яйцо облучают но 30 секунд при частоте модуляции 9 Гц и мощности излучения 9 мВт. Затем яйца с развившимися эмбрионами обрабатывают 70%-ным раствором этилового спирта и охлаждают в течение 6-7 суток при температуре 2-4°С. Одновременно с этим производится сбор растительного сырья комнатного растения каллизии душистой (лат. Callisia Fragrans) при наличии на горизонтальных побегах не менее 9 суставчиков и помещения сырья в холодильную камеру на 7 суток при температуре 2-4°С. Далее производится обработка всего сырья 5%-ным спиртовым раствором йода и облучение ультрафиолетовыми лампами с последующей его гомогенизацией в пропорции 1 часть эмбрионального и 1 часть растительного субстратов. Полученную массу разбавляют раствором янтарной кислоты 1:1 так, чтобы содержание ее в массе составляло 10%. Фильтруют, полученную массу разливают в стерильные флаконы и подвергают тиндализации при температуре 60°С в течение 5 суток, хранят в холодильнике при температуре 2-4°С.

Полученная кормовая добавка при данных параметрах выдерживает тиндализацию, но при этом значительно ухудшаются ее вкусовые качества, и происходит удорожание препарата за счет увеличения в ней дорогостоящего компонента - янтарной кислоты, кроме того, растительный субстрат не обладает достаточной биологической активностью.

Пример 3. Проводят отбор свежих, не инфицированных куриных яиц, затем их инкубируют в течение 9 суток, при этом на 5, 6, 7 сутки яйцо облучают по 30 секунд при частоте модуляции 9 Гц и мощности излучения 9 мВт. Затем яйца с развившимися эмбрионами обрабатывают 70%-ным раствором этилового спирта и охлаждают в течение 6-7 суток при температуре 2-4°С. Одновременно с этим производится сбор растительного сырья комнатного растения каллизии душистой (лат. Callisia Fragrans) при наличии на горизонтальных побегах не менее 9 суставчиков, затем создают условия для выработки биогенных стимуляторов, с помощью инфильтрации раствора глюкозы в стебель, с последующим созданием условий гипоксии, и помещения обработанного таким образом сырья в холодильную камеру при температуре 2-4°С. Далее производится обработка всего сырья 5%-ным спиртовым раствором йода и облучение ультрафиолетовыми лампами с последующей его гомогенизацией в пропорции 1 часть эмбрионального и 1 часть растительного субстратов. После гомогенизации полученную массу разбавляют раствором янтарной кислоты 1:1 так, чтобы содержание ее в массе составляло 1%. Фильтруют, полученный раствор разливают в стерильные флаконы и подвергают тиндализации при температуре 60°С в течение 5 суток, хранят в холодильнике при температуре 2-4°С. Готовый препарат возможно подвергнуть лиофильному высушиванию.

Полученная кормовая добавка предлагаемым способом выдерживает тиндализацию, обладает в меру кислым вкусом и способствует активизации жизненных процессов в организме животных, профилактики целого ряда заболеваний, повышает продуктивность и, кроме того, обладает более низкой себестоимостью при изготовлении.

Пример 4. Проводят отбор свежих, не инфицированных куриных яиц, затем их инкубируют в течение 9 суток, при этом на 5, 6, 7 сутки яйцо облучают по 30 секунд при частоте модуляции 9 Гц и мощности излучения 9 мВт. Затем яйца с развившимися эмбрионами обрабатывают 70%-ным раствором этилового спирта и охлаждают в течение 6-7 суток при температуре 2-4°С. Одновременно с этим производится сбор растительного сырья комнатного растения каллизии душистой (лат. Callisia Fragrans) при наличии на горизонтальных побегах не менее 9 суставчиков, затем создают условия для выработки биогенных стимуляторов, с помощью инфильтрации раствора глюкозы в стебель, с последующим созданием условий гипоксии, и помещения обработанного таким образом сырья в холодильную камеру при температуре 2-4°С. Далее производится обработка всего сырья 5%-ным раствором йода и облучение ультрафиолетовыми лампами с последующей его гомогенизацией в пропорции 2 части эмбрионального субстрата и 1 части растительного субстратов. После гомогенизации полученную массу разбавляют раствором янтарной кислоты 1:1 так, чтобы содержание ее в массе составляло 1%. Фильтруют, полученный раствор разливают в стерильные флаконы и подвергают тиндализации при температуре 60°С в течение 5 суток, хранят в холодильнике при температуре 2-4°С. Готовый препарат возможно подвергнуть лиофильному высушиванию.

Полученная кормовая добавка не имеет значительного преимущества по эффективности в сравнении с кормовой добавкой по примеру 3, но происходит значительное удорожание, так как увеличился расход входящих в состав кормовой добавки эмбриональных тканей, следовательно, оптимальным и эффективным является пример 3.

Таблица 1.Содержание различных гормонов в эмбрионально-яичной массе по данным клинико-диагностической лаборатории Краевого эндокриналогического диспансера г.Ставрополя.№ п/пНаименование гормонаЕд. измеренияРезультат1фолликулостимулирующиймме/л102,42лютеонизирующиемме/л201,63эстрадиолпмоль/л1630,04пролактинмме/л684,35кортизолнмоль/л910,36прогестероннг/мл41,77тестостеронпмоль/л46,098ТТ3нмоль/л4,29СТ4пмоль/л37,910ТСГмкМе/мл0,004

Содержание основных гормональных веществ в эмбрионально-яичной массе обуславливает положительное влияние на обмен веществ, иммунную систему и воспроизводительную функцию организма.

Таблица 2.Содержание биологически активных веществ в соке каллизии душистой по данным ПНИЛ иммуноморфологии, иммунопатологии и иммунобиотехнологии СГУ, в %Экстрактивные веществаПолисахаридыАлкалоидыСапониныДубильные веществаОрганические кислотыАскорбиновая кислотаФлавоноиды342,71,217,150,890,640,0020,5

Таблица 3.Содержание макро- и микроэлементов к каллизии душистой по данным Соловьевой В.А.ЭлементСодержание, мкг/глистстебельКалий160006000Кальций7700092000Ванадий7-Марганец5717Железо270104Кобальт3,51,4Никель1,71,8Медь105,5Цинк34,354,3Калий0,30,2Бром37,57,5Рубидий11,17,1Стронций334,9372,4Цирконий4,21,2Свинец1,93,5Торий0,30,14Уран0,921,12

Таким образом, кормовая добавка представляет собой комбинированное биологически активное средство, изготовленное из экологически чистого растительного и животного сырья, в данном случае побегов и листьев комнатного растения каллизии душистой (лат. Callisia Fragrans) и эмбрионально-яичной массы. Комбинирование этих субстратов в сочетании с применением потенциально эффективных рациональных технологических приемов их обработки, позволяет использовать высокоактивные компоненты эмбриональной ткани инкубированного яйца и биологически активные составные части лекарственного растения: флавоноиды, сапонины, алкалоиды, гликозиды, фитостерины, витамины, макро- и микро элементы. Химические вещества в составе растения оптимально сбалансированы, и этот баланс в значительной мере сохраняется даже после разрушения самого растения и экстракции входящих в него компонентов, эмбрионально-яичная масса, в свою очередь, в достаточной степени богата основными гормонами, способными оказывать косвенное и непосредственное влияние на обмен веществ и иммунную систему (см. Противоаллергические компоненты биологически активной эмбрионально-яичной массы. Материалы Третьего съезда России им. Ю.Л.Овчинникова Москва, 25-27 октября 2005 г., М.: МАКС Пресс, 2005. - с.84-85, авт.: Тимченко Л.Д., Ржепаковский И.В., Каузова А.С.).

Данная кормовая добавка была испытана на крысах.

Опыт. При проведении опыта крысы были разбиты на две группы по пять животных: контроль и опыт, в каждой группе по три самки и два самца. В опытной группе крыс пропаивают кормовой добавкой по предлагаемому изобретению в течение 10 дней в дозе 0,01 мл на 100 г живой массы 1 раз в сутки, утром натощак, дополнительно к обычной пище.

В контрольной группе крысы получают только обычную пищу.

Результат: в контрольной группе среднесуточного прироста живой массы нет.

В опытной группе - среднесуточный прирост живой массы увеличился на 0,8%, с одновременным повышением общей и специфической резистентности организма крыс. Для этого исследовали кровь перед началом опыта и через 30 дней после последнего приема кормовой добавки. В контрольной группе изменений показаний крови до начала опыта и после нет. В опытной группе показатели крови, а именно содержание лейкоцитов увеличилось на 10% и моноцитов к абсолютному числу составило 3%.

Предлагаемое изобретение по сравнению с прототипом и другими известными техническими решениями имеет следующие преимущества:

- повышение эффективности биологически активного вещества;

- увеличение сохранности на 4,7% животных и продуктивности среднесуточного прироста живой массы на 0,8%;

- повышение общей и специфической резистентности организма животных;

- упрощение и удешевление способа;

- экологическая чистота кормовой добавки.

Изобретение относится к кормопроизводству. Способ приготовления комплексной биологически активной кормовой добавки для животных на основе эмбриональных и растительных субстратов, включающий инкубирование яиц в течение 9 суток, при этом на 5, 6, 7 сутки яйцо облучают в течение 30 секунд при частоте модуляции 9 Гц и мощности излучения 9 мВт и охлаждают в течение 6-7 суток при температуре 2-4°С с последующими гомогенизацией, разбавлением и фильтрацией, при этом перед гомогенизацией к эмбриональному субстрату дополнительно вводят растительный субстрат в соотношении 1:1, причем в качестве последнего используют побеги, которые отбирают при наличии более 9 суставчиков и листья каллизии душистой (Callisia Fragrans), производят обработку побегов и листьев путем инфильтрации раствора глюкозы в стебель с последующим созданием условий гипоксии и охлаждением, причем яйца с развившимися эмбрионами отбирают перед охлаждением и обрабатывают 70%-ным раствором этилового спирта, затем после охлаждения яйца в скорлупе, побеги и листья каллизии душистой обрабатывают 5%-ным спиртовым раствором йода и облучают ультрафиолетовыми лучами в течение 18-20 мин на расстоянии 50-70 см, затем после гомогенизации полученную массу разбавляют янтарной кислотой в соотношении 1:1, так чтобы содержание последней в массе составляло 1%, а после разбавления и фильтрации субстрат подвергают тиндализации при температуре 55-60°С в течение 4-5 суток с последующей лиофильной сушкой. Повышается эффективность биологически активного вещества, общая и специфическая резистентность организма, упрощается и удешевляется способ приготовления. 3 табл.

Способ приготовления комплексной биологически активной кормовой добавки для животных на основе эмбриональных и растительных субстратов, включающий инкубирование яиц в течение 9 сут, при этом на 5, 6, 7 сут яйцо облучают в течение 30 с при частоте модуляции 9 Гц и мощности излучения 9 мВт и охлаждают в течение 6-7 сут при температуре 2-4°С с последующими гомогенизацией, разбавлением и фильтрацией, отличающийся тем, что перед гомогенизацией к эмбриональному субстрату дополнительно вводят растительный субстрат в соотношении 1:1, причем в качестве последнего используют побеги, которые отбирают при наличии более 9 суставчиков и листья каллизии душистой (Callisia Fragrans), производят обработку побегов и листьей путем инфильтрации раствора глюкозы в стебель с последующим созданием условий гипоксии и охлаждением, причем яйца с развившимися эмбрионами отбирают перед охлаждением и обрабатывают 70%-ным раствором этилового спирта, затем после охлаждения яйца в скорлупе, побеги листья каллизии душистой обрабатывают 5%-ным спиртовым раствором йода и облучают ультрафиолетовыми лучами в течение 18-20 мин на расстоянии 50-70 см, затем после гомогенизации полученную массу разбавляют янтарной кислотой в соотношении 1:1, так чтобы содержание последней в массе составляло 1%, а после разбавления и фильтрации субстрат подвергают тиндализации при температуре 55-60°С в течение 4-5 сут с последующей лиофильной сушкой.