Способ получения антигена Советский патент 1975 года по МПК C12K5/00 

Изобретение относится к области медиUHHbf.

Известен способ приготовления антигена путем обработки бактериальной массы 1 н уксусной кислотой.

Однако препарат, полученный известным способам, обладает слабым защитным действием.

С целью получения препарата для профилактики бруцеллеза суспензию 400-5ОО млрд клеток вакцинного штамма брупелл 6г abortus 19-ВА в 3-форме обрабатывают ацетоном в течение семи суток при соотношении объемов 1 : 5-7, с ежедневной сменой последнего, промывают ацетоном, а затем эфиром, при соотношении :объемов 1 ; 3, высушивают и гидролизуют 0,1 н раствором уксусной кислоты, при соотношении 1 : 20 в течение 90-105 ми при с последуюшей лиофилизацией препарата и повторной его обработкой этиловым спиртом при соотношении объемов 1:8.

Способ осуществляют следуюшим образом.

Для получения препарата микробную массу, например , вакцинного штамма Вг. abortus19- А убивают ацетоном.

Высушивают, к полученному сухому аце- тоновому порошку добавляют 2 О-кратный объем О,1 н раствора уксусной киспоты и проводят гидролиз при10О°С в течение 1,5 час. Экстракт отделяют центрифугированием от,осадка, который повторно

подвергают гидpoJшзy с 15-кратным

объемом 0,1 н раствора уксусной кислоты с целью извлечения экстракта. Обе порции полученной после центрифугирования надосадочной жидкости высушивают лиофильно. i

Высушенное пушистое вешество растворяют В дистиллированной воде в объеме, не превышаюшем 1/10 часть обшего объема экстракта до высушивания. Охлажденную до 4°С жидкость вливают при постоянном

перемешивании в 8-кратный объем охлажденного 96 градусного спирта и оставляю) в холодильнике на ночь даш отсяаивания образовавшегося осадка антигена. Осау.ок отделяют центрифугированием и сушат 2

раза, ацетоном и один раз э4|иром (мри

центрифугировании) и затем в вакуум - эксикаторе.

i Выход антигена около 15% от исходной Wacjcbr микробов.

3 обретения

Предмет

и

Способ получения антигена путем обработки микроорганизшж-бруцелл органическим раствсчзителем с последующим гидролизом уксусной кислотой и лиофилизацией, о т л и ч .а ю щ и и с я тем, что, с целью nojiyHaHHH .препарата для профилактики бруцеллеза, суспензию 40О-5ОО клётокПвакц1Щно7ч 111т 1 ма бруцёлл В-Г. Г abort SJ 8 19-ВА в S -форме (обрабатывают : ацетоном в течение семи суток, при соотношении объемов 1 : 5-7, с ежедневной 1 сменой последнего, промьгоают ацетоном, ; а затем эфиром при соотношении объемов 1 : 3, высушивают и гидролизуют 0,1 н раствором уксусной кислоты, при соотноше-, НИИ объемов 1 ; 20 в течение 90-1 Об мин | при температуре 1ОО-. 5 С, пскухе лиофили зации препарата повторно его обрабатьша- ют этиловым спиртом при соотношении объемов 1:8.