Сосчитыва.чие кровяных телец производится главным образом при помощи счетных камер разных авторов: ТомаЦейса, Бюркера, Предтеченского и др., с разными сетками.
Счетная камера, при всех своих положительных качествах, не лишена целого ряда очень существенных недостатков. Пропускйая способность ее очень ограничена. Камера не может полностью удовлетворить важнейшим запросам при массовом гематологичезком исследовании, например, при обследовании большого количества отдельных групп населения, рабочих различных промышленных предприятий, шахт, физкультурников и Т-. д.
Материал, исследуемый однократно в камере, в дальнейшем уничтожается, и в сомнительных случаях не может быть проверен или повторно исследован. Подсчет форменных элементов в камере неразрывно связан с наличием микроскопа, а также другой аппаратуры и реактивов на месте в момент исследования, что иногда, не может быть выполнимым.
Имея и ряд других недостатков, камеры, при различного рода, оплошностях, часто ломаются и пока относительно дороги.
Все это неуклонно приводит к необходимости изыскания способов расширения рамок, установленных счетной камерой, при гематологических исследованиях;
В основу предлагаемого способа взяты следующие четыре положения:
1.Точное объемное измерение количества крови для производства мазка.
2.Распределение взятой крози на площади определенного размера.
3.Возможность сосчитывания клеток крови на сухих мазках при помощи унифицированного измерения площади, на которой производится подсчет.
4.Достаточная точность результатов подсчета для научно-исследовательских и практических целей и техническая доступность метода.
Самым основным в предлагаемом способе является особый металлический прибор, состоящий из двух частей.
Фиг. 1-4 представляют -общий вид прибора; фиг. 5-10 представляют детали нижней, большей по размерам, части, имеющей некоторое сходство с кассетой, куда вкладывается предметное стекло сначала для нанесения на нем мазка, а затем, после соответствующей обработки,-для подсчета клеток крови на сухом и крашеном, мазке. В этой части имеется два круглых отверстия -одно, диаметр которого равен 15,96 мм на нижней, другое, значительно большее отверстие,- на верхней стороне. Верхняя, меньшая по размерам, часть, представленная на фиг. 11-16, состоит из двух вложенндлх одно в другое колец. В нижнем кольце, для измерения площади, на которой производится сосчитывание форменных элементов крови, вделана нанесенная на прозрачной целлюлоидной пленке сетка (фиг. 16). Верхняя часть вкладывается в верхнее круглое отверстие нижней части.
На фиг. 2 изображена сетка, состоящая из 16 лш, распределенных на площади, равной 1 см, следующим образом: 4 мм помещены в средине, следующие 4 MJA по углам и остальные 8 2 мм на каждой стороне. Все внешние стороны отдельных квадратных миллиметров ограничены тройными линиями, а все внутренние-одной линией. Кроме того, каждый миллиметр в свою очередь делится четырьмя двойными линиями, проходящими по две пары перпендикулярно друг к другу. Благодаря тройным и двойным линиям в каждом квадратном , миллиметре получается IS малых квадратиков размером в и 9 средних квадратов размером в 0,04 мм,
Таким образом во всех 16 мм- имеется 256 малых квадратиков и 144 средних квадрата. Линии сетки для большей контрастности и отчетливой видимости покрашены и обрезаны в нижнюю сторону, т. е. к мазку. Целлюлоидная пленка, на которой нанесена сетка, так прикреплена к металлическому ободку, что когда последний вкладывается в верхнее отверстие нижней части счетной пластинки, то сетка ложится плотно на мазок, нанесенный на предметное стекло.
Способ употребления прибора следующий. Когда предметное стекло вкладывается внутрь нижней описанного выше металлического прибора и вынимается из него, верхняя последнего, чтобы не повредить сетки и мазка, должна быть обязательно отделена, а нижнее круглое отверстие пластинки обращено вверх. Затем, как
обычно делается, уколом дезинфицированных мочки уха или пальца снимается первая капля и из свободно выступившей второй капли при помощи градуированной и проверенной пипетки набирается 10 MAf крови. Взятая кровь выпускается из микропипетки на предметное стекло приблизительно в центре круглого отверстия металлического прибора.
Полученная таким образом кровь легко распределяется стеклянной (глазной) палочкой на предметном стекле, а благодаря наличию круглого отверстия, как по трафарету, образуется мазок крови, несколько похожий на толстую каплю, площадью около 200 мм , в виде до-вольно правильного круга. После этого предметное стекло вынимается из металлического прибора и в горизонтальном положении помещается на стол или полису (лучше под стеклянный колпак) для постепенного высушивания на воздухе.
Для подсчета лейкоцитов подсохшие на воздзхе мазки гемолизируются дестиллированной водой, промываются в водопроводной воде, налитой в стакан, фиксируются 4-5 минут в метиловом алкоголе, подсушиваются и затем красятся.
Красить мазки можно по Гимза или другими кр.асками, которые хорошо окрашивают белце кровяные тельца. Очень хорошие резулэтаты получаются при довольно быстрой окраске квасцовым гематоксилином.
В данном способе результаты иодсчета будут сводиться к выражению количества лейкоцитов в одном кубическом миллиметре.
Количество лейкоцитов, содержащееся в 1 жж при контрольном подсчете во влажной камере, распределяется на сухом мазке с значительной точностью по площади, равной 20 .мм.
Измерение площади во время подсчета производится при помощи сетки. Структура сетки такова, что подсчет форменных элементов крови приходится производить на алощади, равной 100 лш в различных и далеко расположенных друг от друга местах. Подсчет производится при помощи сухой системы различных микроскопов.
Удобней пользоваться объективами слабого увеличения и окулярами сильного увеличения.
По отношению к сетке следует держаться тех же правил, которые применяются при подсчете во влажной камере. Подсчет производится в местах, ограниченных отдельно расположенными по углам сетки 4 лгж, ватем на местах, ограниченных 4 мм, расположенными вместе в средине сетки, и дальше-на местах, ограниченных 2 жл на каждой из сторон сетки.
Для получения результатов подсчета с достаточной точностью требуется сосчитывать такое количество лейкоцитов, которое распределилось на плош.ади, равной 2 мм, при условии, что эта площадь является суммой различных участков мазка.
Чтобы теперь найти количество клеток, которое должно распределиться на 20 мм, полученное число следует умножить на 10. Найденное таким образом количество лейкоцитов и будет соответствовать количеству в 1 мм при подсчете во влажной камере.
Понятно, конечно, если меняется величина площади, на которой производится подсчет, то в зависимости от этого изменяется и множитель для получения площади, равной 20 мм .
Для пояснения сказанного можно привести следуюпдие примеры.
На 2 ММ, составленные из различных участков мазка, сосчитано 650 лейкоцитов. Тогда 650 .
Или в другом случае: на 4 мм при тех же условиях сосчитано 1300 лейкоцитов. Тогда 1300-5 -6500.
Отсюда можно вывести следующее правило:
Искомое количество лейкоцитов, обозначенное через X, будет равно сосчитанному количеству Q, разделенному на F, на которой производился подсчет, и умноженному на 20, например:
у д-20 А----
Записывать результаты подсчета можно после того, когда пройден один ряд малых или средних квадратов или после подсчета во всех каких-либо квадратах, расположенных в пределах 1 мм .
Зная размеры площадей на стекле, как подсчет, так и запись можно варьировать в различных направлениях, не нарушая при этом указанных выше основных принципов метода.
Предмет изобретения.
1.Способ подсчета форменных элементов крови, отличающийся тем, что определенное количество крови распределяют на точно размеренной площади и подсчет производят в сухом мазке.
2.Приспособление для осуществления способа по п. 1, отличающееся тем, что оно состоитиз металлической или иного материала кассеты для предметного стекла, имеющей в обеих стенках совпадающие отверстия определенной площади, и вставляемой в эти отверстия пластинки, закрытой на нижнем конце прозрачной пластинкой, на которой нанесена счетная сетка.
. 1
г; : j
СГЗиг. 2
сЬиг 3
о /. 
