Способ отбора биохимически активных веществ Советский патент 1976 года по МПК G01H33/16 C12K1/00 

Изобретение относятся к способу отбора биохимически активных веществ. Известен способ отбора биохимически активньк веществ, включающий контактировани биохимически активных вещестя с хлорофиялсодержащими растениями к сравнение обра|ботанных растений с необрдботанными. Однако известньй способ очень длителен. С целью ускорения :проиесса отбора предлагается в качестве хлорофиллсодержащих растений использовать одкоклеточньБ зеленые водоросли в я ;идкой среде. Для сравнения обработанных растений с необработан {ьми используют электронный микроскоп, а также спектрально-колориметрические и нефелометрические методы, Пример 1. Свежие споры синхрон- нь1Х культур хлореллы (штамм 211-86) помешают в питательный раствор и получают суспензию, 1 мл которой содержит 2 милляона кле ГОК вод: росл11, 1 л пптатолыг го раствора состоит из 988 мл риствори NI 1, 1 мл ркютвпра Nb 2 и 1 мл раствора 3, Питательный раствор № 1 содержит (в г); 10,111 KNOg, 6,210 , 2,465 MgSO. 71, 0,100 и 10 л дистиллированной воды. Питательный раствор № 2 содержит (в мг): 61,0 Н,ВО, 169,0 , 287,0 2,5 CuSO 5H20,l2,4 молибдата аммония и 1 л шютиллированной воды. Для приготовлешы питательного раствора № ЗО,69 мг FeSO -7H2O и 0,95 мг комплекса Na-ЕДТА растворяют в 80 мл кипящей воды и доливают водой до 10О мл. По 1ОО млполученной суспензии вносят в пробирки,обрабатывают смесью Ошщенного воздуха и 1,5% двуокиси углерода и освещают при ЗО С сбогащемиыми красным бветом люминесцентными лампам ( интенсивностьvlOOOO лк). Испытуемые вещества вводят в начале освоиюиия или в более поздний момент. Че-рез 1в час освещения затеняют на 8-.1.2 ч;к: и ..:вэбож-

дают самые ёпижайшиё покопегога спор водорослей от оипьно выросших на свету матер гагких клеток. Во время затенения тщательно аэруфуют очищенньм воздухом. По

окончании затенения подсчнтьюают количейт- 5 нримере 1, вводя в контакт с хлореллой

во клеток и измеряют их размер. Прирост массы можно определить с помощью электуронного микроскопа, нефеломет ических или .спектрально колориметрических измерений.f ределяют прирост массь как в примере 1.

Фенурон в кетщентрадаи ОД, 0,05, 0,01,10 В табл. 1 приведены результаты,получен0,005, 0,601 и О,0005% заметно подавля- ные через 16 час освещения, при подсчете ет рост хлореллы При дальнейшем разбав-числа клеток в культуре водорослей с полетп {0,О001, 0,00005 и 0,00001%) гер- мощью электронного микроскопа.

бицидная актавность фенурона значительно снижается,

Пример 2, Проводят опыт, как в

различные испытуемые вещества. В конце опыта для каждого испытуемого вещества подсчитывают число клеток в 1 мл или оп

Испытуемое вещество Рост клеток,

Результаты, полученные через 8 час освощетиз, прк определенна прироста мйссы вО

Таблица

зеленых водорослей яефелометриче.:1ким м тодом, приведены в табл. 2. %, при концентрации, испытуемого вещества, % Испытуемое вещество Рост

При подсчете числа клеток зеленьк водорослей чеоез 8 час схзвешешш спектрально-колориметрический методом (измерение . световой абсорбции при 68О нм) получают результаты, приведенные в табл. 3.

Примером веществ, О,О5%-ные растворы которых обладают незнапгтельиой биологической активностью, могут служить моногидрофосфат натрия (94,5), хлорид калия (84,5), сульфат магаия MgSO (102,0), дигидрофосфат натрия (99,0), борная кислота (98,5), хлорид натрия (9О,5), нитрат , калия (ЮЗ,О), хлорид клльция (93,5), карбонат натрия (9О,О), калия (11О,О), хлорид марганца (81,0), хлорид железа () (98,0), хлорид мпшпя (103,0), .фосфат натрия (100,0), султ/ф п- натрия60

Таблица

Na ВО.ЮН О (107,О), нитрат кальция

4

Са( МО„) 4Н О(97,О), З-амино-4-этилбензол-4-хлор- этилфениловьй эфир (80,0), 5-хлор-2-окси-3-этилпрописфенон (7О,4), j3 -этокси- J3 -t (2-этил-4-ацетилф(гнокси)-этоксиЗ -диэтиловый эфир (71,8), этиловый эфир 2,5-метипен-1,2,5,6-тетрагидробензойной кислоты (104,0), н-бутанол (109,6), метилциклогексанон (92,О), олеилметилтаурат натрия (70,4), синтетичс-ская кремневая кислота (суттрасил) (85,8), 60%-ньй алкиларилсульфонат кальш1Я (гпкинил СА 6О) (77,3), минеральное; мясдч

(алифатический углер.од7.}.) (Г;8,.1)

R

12

и Д 1Спергатор ВС (эксиэт-илирлгпшьи .ч.гкилфенол) (106,7), клеток, %,nptr концентрации- испытуемого вещества,% Формула иаобретениЕ Споссхб отбора биохимически активных вешеств, включающий приведение их в контакт с хлорофиллсодержапй ми растения и после дующее сравнение обработанных и необрабо fVy

Таблица 3. тайных растений, отличающийся .тем, что, с цепью ускорения процесса отбора, в качестве хлррофилпсодержаищх растений берут одноклеточные заленьЕ водоросли в, жидкой среде,