Способ оценки состояния печени Советский патент 1977 года по МПК A61B5/275 A61B10/00 

(54) СПОСОБ ОЦЕНКИ СОСТОЯНИЯ ПЕЧЕНИ

спектрофотометрически количество красителя, сорбированного печеночными клетками, и определяют их сорбционную снособность. Микроскопируют окрашенный нейтральным красным гистологический препарат и выявляет морфологические нарушения структуры клеток, связанные с перенесенной ишемией. Определяют смещение положения максимума в спектре поглошения красителя на препарате и устанавливают сдвиг рН в клетках.

Пример. Применение предлагаемого способа для установления времени тепловой ишемии печени. У белой беспородной крысы путем перевязки воротной вены и печеночной артерии воспроизводят тепловую ишемию печени. Через неопределенное время (в пределах 40 мин. ) лигатуру снимают, в воротную вену вводят 0, раствор нейтрального красного (2 мл на 10 г веса) печени. Время введения 2 мин.Из печени вырезают кусочек весом 0,8 - 1,0 г. Последний делят на две части. Один помешают в 5 мл раствора 70° спирта, подкисленного (2 мл на ЮО мл) серной кислоты, экстрагирующего нейтральный красьшш. Экстракт колориметрируют на колориметре ФЭК-56 М, фильтр б (длина волны 540 10), контроль - дистиллированная вода.

Оптическая гшотНЬсть измеряемого раствора 0,93. Затем кусочек печени, из которого бьша экстрагирована краска, высушивают в термостате при 70 С в течении 2 час и после этого определяют количество экстрагированного красителя на 1 г сухого веса ткани. Сухой вес ткани 0,128 г

0,1280,93-1-0,95

Т26

-1,0X 0,i28

Количество поглощенного красителя на изучаемом сроке ишемии печени 7,26, что составляет 141% по сравнению с сорбцией красителя печенью в контроле и соответствует 15-минутной ишемии.

Из второго кусочка после его замораживания в жидком азоте готовят срезы толщиной 5ju При стандартных условиях увеличения фотографируют препараты, а затем планиметрируют, определяя площадь окрашенных зон печени. В данном случае они составляют 11,3%, что соответствует 16-ой минуте ишемии органа.

На этом же препарате цитоспектрофотометрически определяют положение максимума в спектре поглощения красите.пя клетками. Последний равен 514n/t, что соответствует 15 - 16-ой минуте ишемии.

Осуществление предлагаемого способа занимает меньше времени, что позволяет его применять для получения экспресс - информации о жизнеспособности печени в условиях ее консервации с целью трансплантации. Предлагаемый способ менее трудоемок, он более экономичен, поскольку не требует применения дорогостоящих реактивов. Предлагаемый способ позволяет количественно опредехшть объем некровоснабжаемых зон микроциркуляции, получить данные о продолжительности перенесенной ишемии печени, оценить такие показатели состояния печени, как гистологические сдвиги, сорбиционную и десорбционную способность клеток печени, сдвиг рН.

Формула изобретения

Способ оценки состояния печени путем введения в кровоток витального красителя, взятия кусочка ткани, экстракции красителя и измерения количества красителя в единице веса ткани, отличающийся тем, что, с целью повышения точности оценки перед трансплантацией в воротную вену вводят 0,3% - 1,0%-ньш раствор нейтрального красного в количестве 2 мл на 10 г веса печени, через 2 - 2,5 мин забирают кусочек печени, из одной части экстрагируют краситель, а другую подвергают криомикроскопическому и гистологическому исследованию, измеряют на гистологическом-препарате соотношение заполненных и незаполненных красителем зон микроциркуляции, определяют содержание сорбированного красителя в отдельных клетках, а сдвиг рН клеток определяют по смещению максимума в спектре поглощения красителя.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:

1. Журнал Патологическая физиология и экспериментальная терапия, 1960, № 3 (прототип).