(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВОЗРАСТА УМЕРШЕГО
1
Изобретение относится к судебной медицине и может найти применение для установления возраста неопознанных трупов с сохранившимися мягкими тканями грудной полости.
Известен способ определения возраста умершего по величине зон роста и окостенения трубчатых костей, костей стопы и кисти и состоянию швов черепа l;j.
Целью изобретения является повышение точности исспедования.
Это достигается тем, что в интиме аорты определяют концентрацию общего холестерина, плотность клеточной заселенности и толщину, после чего по таблицам определяют возраст умершего.
Участок грудной аорты с видимонеизменной интимой размером 4x2 см вырезают в области передне-боковой стенки на уровне отхождения первой пары межреберных артерий и режут на два смежных участка. От первого участка отделяют при помоши пинцета и ножниц видимонеизмененную интиму от медии. Кусочек интимы взвешивают и навеску интимы помещают в чистую пробирку, заливают 50-кратным объемом раствора Блюра (3ч, этилового спирта и 1 ч., диэтилового эфира). Экстракция липидов идет при комнатной температуре ( в темноте) в течение 6-7 суток. Общий холестерин определяют по общепринятой методике.
Второй участок аорты фиксируют в 10%-ном нейтральном формалине, проводят через спирты, после чего заливают кусочек в парафин и приготовляют срезы на микротоме (толщиной 4-5 мкм).
Для гистологического исследования срезы окрашивают гематоксилином - эозином.
Плотность клеточной заселенности интимы грудной аорты определяют как среднее количество ядер клегок интимы, приходящ1 хся на одно поле зрения (объектив 9О имм.), в пересчете на площадь в 1 мм .
Для измерения толщины интимы срезы окрашивают резорцин-фуксином Вейгерта или любой другой краской по метрдике, выявляющей эластичные мембраны. При помощи оклярмикрометра измеряют толщину интимы.
.Для уменьшения ощибки при онреде.пении возраста пробы дублируют. По полученным измерениям и соотзетстауюшпм формулам цля трех показателей нах:,лят возраст v-нткмы ПС кажпому из иссле Я1/в-;: - пых показателей; i ) Опреаелоиие возраста по содержанию o5.ij;;vc холег;терина н интиме: ,. i - -:5.15 ( - ) - (1 к 1-11;горьало I.uapacrn or io до 2 У лет; 0. Э9,В,5 (х g- 240)- (2) ii K iнарвале возраста о-.; лег и старше. 2) Определегпк; возраста по толщине инTHMj i;а, t - 51,48 ( 35) (3 интервале между 10-29 годами; для лиц в 102,9 ( g-|, - ) (4 п. О лет. для ,лиц старше ;) От р&деление возраста по плотности клеточной за.еленпости плтимы; а,t. Т.ТП ( Сд- 4700 -Eg-Q,)(5 ii интераале возраста от 10 до 2:J .лет; б,ty 81,33(0-4900 ) (G для лиц старше 30 лет. .й возраст равен среднему ариф..1ч.Тичс-скому -;кспериментальпо полученных лозр -1стО1з иитимы по холестерину ) и плотности кле T0ii:o;i засе.ле11ности интимы ( t - Q 5(7) Рекомендуется следующая послецователь 1:осттз - гспольаования формул, если препварительно нельзя установить примерный воз- г)астг полученные по трем показателям данные подставляют в формулы (2), (4), (6) 3 том с.пучае , если экспериментальный воз раст по формуле (7) оказался ниже 30 лет опреде.11яют возраст по формулам для трех показателей (1), (3), (5) и находят искомый воэ):.аст по формуле (7). П р и м е р 1. Определение возраста умершего по содержанию общего холестерии;; -.: видимоноизмененной интиме грудной От умершего берут участок аорты размсром .3x2 см с видимонеизмененной интимой .9, области отхождения первой пары меж пе&ерных артерий. Интиму отслаивают от поалежащей медии и кусочек интимы взве.лнвак/г на торзионных весах (навеска должка 6ъ1тг: весом не менее 150 мг). Записы15аю7 величину веса кусочка, которая необходима при расчете концентрации общего холестерина ь исследуемой пробе. Навеску niiTHKu, помотают в чистую обесэжиренную пробирку и .а.ливагст 50-кратным объемом ; -сч.и Ьлюра ( 3 ч. этилового спирта и 1 ;. aviSTH.ioBoro эфира). Экстракцию липи:ir,ii производят при комнатной температуре, течение CVTOK. ЗгЭтем фильтруют раствор через обезжиренный фильтр и пробирку с фильтром помешаю в водяную баню при температуре 60-7О с, выпаривают растворитель и в каждую пробу с экстрагированными липидами для определения общего холестерина добавляют слецуюш е реактивы: 2 мл хлороформа, 0,5мл уксусного ангидрида, 3 капли концентрированной серной кислоты. Пробирку встряхивают 6-8 раз и оставлякуг в темноте на 25 мин. Затем колориметрируют на фотоколориметре с красным светофильтром в кювете с рабочей длиной 0,5 см. Контроль: 2 мл хлороформа + 0,5 мл уксусного ангидрида + 3 капли серной кислоты. После колориметрии вычисляют абсолютное содержание холестерина в данной пробе по предварительно построенной калибровочной кривой на основании стандартных проб с чистым холестерином. После этого абсолютное содержание холестерина в данной навеске пересчитывают в мг %. По описанной выше методике в данном примере было получено, что концентрация общего холестерина в аорте № 29 была равна X 2100 мг %. Логарифм этой величины равен 3,3222. Подставляют лотарифм величины концентрации холестерина в формулу (2) и находят экспериметальный возраст по холестерину: tx 99,05 ( Sgr 2100- ) 99,65 (3,3222 - 2,3802) 99,в5 0,942 93,87 года. Искомый возраст по концентрации холестерина равен -Ь 93,87 года и превышает паспортный возраст равный t 87 годам на + 7,89%. П р и м е р 2 . Опреаеление возраста умершего по толщине видимонеизмененной интимы грудной аорты. От умершего берут участок грудной аорты размером 2 х О,5 см с вицимонеизме- ненной интимой в области отхождения первой пары межреберных артерий. Вырезают кусочек аорты для приготовления блоков и гистологических препаратов-(1,5 0,5 см). Фиксируют кусочек в 1О%-ном нейтральном ормалине в течение 5-6 дней, затем промывают в проточной воае в течение 1 суток и для обезжиривания проводят кусочек через батарею спиртов, начиная от 70° спирта, и заливаюгг в парафин. При этом необходимо тканевый блок ориентировать строго перпендикулярно плоскости среза. Наклеивают на деревянные блоки и делают на микротоме резы толщиной 4-5 мкм. Срезы окращи- ают резорцин-фуксином Вейгерта. Окращенные срезы помещают на столик икроскопа и окуляр-микрометром измеряют толщину интимы от внутренней эластической мембраны до края эндотелия сосуда. Измеряют последовательно щагом в одно поле зр ния микроскопа толщину интимы, полученные величины складывают и усредняют. По описанной выще методике в данном примере было получено, что средняя толщин интимы аорты № 29 равна Ъ - 350 мкм h 2,544i. Подставив логарифм величины толщины интимы в формулу (4) , находили экспериментальный возраст по толщи не интимы Ъ 102,9 ( Kg 35О -Bg-SO ) 102 9 (25441 -1 6990) 102,9-0,845 8б,96. / Искомый возраст по толщине интимы равен 7 86,96 и отличается от паспортног возраста t, 87 на 0,04 %. П р и м е р 3 . Определение возраста умершего по плотности клеточной заселенности видимонеизмененной интимы грудной аорты. От умершего берут участок грудной аорты размером 2 и 0,5 см с вндимонеизмен енной интимой в области отхождения первой пары межреберных артерий. Вырезают кусочек аорты размером, соответствующим цля приготовления блоков и гистологических препаратов (1,5x0,5 см). Фокусируют в 10%-ном нейтральном формалине 5-6 дней затем промывают в проточной воде в течение 1 суток и для обезжиривания проводят кусочек через батарею спиртов, начиная с 70 спирта, и заливают в парафин. Наклеивают на блоки и режут на микротоме срезы толщиной в 4-5 мкм. Окращивают срезы гематоксилиномэозином. Окрашенные срезы помещают на предметный столик микроскопа и под иммерсией считают количество яцер интимы, приходящееся на одно попе зрения микроскопа. Просмотр клеток ведут последовательно от эндотелия интимы вниз до внутренней эла-гстической мембраны, затем переходят на смежный участок, соблюдая принятую последовательность. Считают 5О-1ОО полей зрения и вычисляют среднее количество яцер, приходящихся на одно поле зрения. Зная плошадь поля при данном увеличении и среднее количество ядер клеток на одном поле зрения, легко вычисляют количество клеток, приходящихся на 1 мм В примере подсчитано, что плотность клеточной заселенности интимы аорты № 29 равна Q 420 клеток / мм, 2,6232. Подставив логарифм величины плотности клеточной заселенности интимы в формулу (6) для нахождения возраста по плотности клеточной заселенности, получают: tg 81,38 { - 49ОО - tg-420)---- 81,38 (3 6902-2,6232)81,38 1,067 86,83 года. Искомый возраст по плотности клеточной заселенности интимы равен tg 86,83 года, что отличается от паспортного возраста 0,19 %. П р и м е р 4. Определение возраста умершего по трем показателям: содержанию общего холестерина, толщине и плотности клеточной заселенности интимы грудной аорты. Определение возраста проведено у 30 лиц, умерших в возрасте от 10 до 87 лет. Ход определения возраста по каждому показателю описан в примерах 1-3. В табл. 1 определены результаты определения концентрации общего холестерина, толщина и плотность клеточной заселенности интимы и паспортный возраст. В табл. 2 приведены сравнительные данные паспортных возрастов с экспериментально полученными возрастами по трем показателям старения интимы грудной аорты. Из данных габл. 2 следует , что определение возраста по трем показателям старения интимы дает наименьшую ошибку отклонения от паспортного возраста At.Vo 9,7%, чем определение возраста по холестерину (по одному из трех показателей). Определение возраста по холестерину дает ошибку отклонения от паспортного возраста Д .92 %.
Таблица 1.
ф
§ л « ф
см 1314
Формула изобретенияклеточной заселенности и толшину, после
Способ определения возраста умершего,чего по таблицам определяют возраст умер-
заключающийся в определении показателейшего.
старения тканей, отличающийсяИсточники информации, принятые во внитем, что, с целью повышения точности ис- -мани-е при экспертизе:
следования, в интиме аорты определяют кон-1. Вопросы антропологии. 19GO, № 3,
центрацию общег о холестерина, плотностьс. 118-129.
551024
