Вещество, проявляющее антитромбогенную активность Советский патент 1980 года по МПК A61K33/04 

1

Изобретение относится к области .медицины, а .именно веществам, служащим для увеличеиия антитромбогенных свойств имплантируемых в организм искусственных органов.

Известно применение красителей тионинового ряда в гистохимии для окрашивания jL. .

Цель изобретения - расширение ассортимента веществ, проявляющих антитромбогенную активность.

Эта цель достигается применением катионных красителей тионинового ряда - толуидинового синего азура, диметилёнового синего, в качестве вещества, проявлякнцего антитромбогенную активность.

Катионные красители вводят внутривенно в концентрации 1%, 5% и 10% из расчета 0,25 мл на кг веса.Кровь для исследования гемокоагуляции берут из правой половины сердца до введения красителей, а также через 30 мин, 1,5 ч и 2,5 ч после их внутривенного введения, Из гемокоагуляционных показателей изучают: время тромбообразования крови, тромбоаластограмма, концентрацию факторов протромбинового комплекса, количество фибриногена, толерантность крови к гепарину с графической регистрацией на коагулографе, концентрацию свободного гепарина количество тромбоцитовJиндекс адгезии тромбоцитов и агрегацию тромбоцитов, Полученные данные статистически обработаны.

10 Исследования показали, что наиболее вьфаженные изменения со стороны коагуляции крови при действии катионных красителей наблюдаются при их 10%-ной концентрации. Из следуемых красителей толуидиновый синий и азур А оказывают более значительный эффект на гемокоагуляцию, чем 1:9 диметилметиленовый синий. .

20 В таблице приведены данные о влиянии толуидинового синего и азура А на коагуляционные свойства крови.

Время тромбообразования крови

25 после введения красителей замедляется. Причем, наиболее выраженное замедление времени тромбообразования крови было отмечено через 1,5 ч после введения толуидинового

.jQ синего и азура А, которое через

745522

2,5 ч бьшо еще более замедленным. Так, время тромбообразования крови через 2,5 ч после введения толуидинового синего и азура А было больше исходного .соответственно на 2101:18 с и 120±12 с (Р0,02). Количество факторов протромбинового комплекса после введения красителей также уменьшается. Концентрация фибриногена резко уменьшилась. ОсоДенно

э н Ч;Ительное снижение концентрации фибриногена было отмечено через

2,5 ч после введения азура А, которая была на 133±14 мг % меньше исзсодного (Р 0,001). Количество тромбоцитов после введения катионных красителей всегда уменьшается.Наибольшее снижение количества тромбоцитов наблюдается после введения толуидиновргр синего и 1:9 димётилJ eт илeнoвoгo синего, которое было меньше исходного соответственно на 12б±-17тыс, и 126tll тыс. (-Р 0,01). ка йонные красители вызывают вы|эаженное снижение индекса адгезии тромбоциiroB. Следует отметить,что индекс адгезии тромбоцитов снижается уже через 30 мин после инъекции красителей и остается ниже исходного в течение всего времени исследования. Максимальное снимсение индекса адгезии тромбоцитов отмечают через 2,5 ч .после введения красителей. В частнос.ти, толуидйновый синий вызывает уменьшение индекса адгезии тромбоцитов в четыре раза по сравнению с нормой, существенные изменения после введения красителей были также отмечены и со стороны агрегации тромбоцитов. Максимальная амплитуда агрегатограммы тромбоцитов уменьшается, а скорость еенаступления значительно увеличивается.

Исследуемые катионные красители вызывгиот выраженные изменения гепариновой активности крови. Количество свободного гепарина после введения

к засителей было сниженным в течение

всего времени исследования. Исключение составляет тол идиновый синий, который в первые 30 мин после его внутривенного введения не вызывает изменений количества свободного гепарина. Наиболее выраженное уменьшё1йие концентрации свободного гепарина отмечается.через 1,5 ч после введения красителей. В дальнейшем концентрация свободного гепарина несколько увеличивается, оставаясь все еще ниже нормы. Из исследуемых катионных красителей, толуидиновый

.синий и 1:9 диметилметиленовый синий вь1 ывает более выраженную гипогепаринемию, чем азур А. В отличие от концентрации свободного гепарина толерантность крови к гепарину после введения красителей бьша наиболее

замедленной через 2,5 ч. При этом характер изменений толерантности

Тсрдви к гепарину противоположен изменениям со стороны концентрации свбодного гепарина, которые наблюдаются при введении тех же количеств катионных красителей.

Катионные красители тионинового ряда вызывают четко вьграженные изменения коагуляционных свойств кров Причем гипокоагуляционным изменения бо стороны общей коагуляционной активности крови (время тромбообразования крови и тромбоэластограммы), концентрации факторов протромбинового комплекса и фибриногена соответствуют снижению толерантности крови к гепарину, тогда как количество свободного гепарина резко уменьшается. Гепарин не оказывает существенного влияния на тромбообразующие свойства крови.

Введение красителей сопровождается резким снижением адгезионной и агрегационной способности тромбоцитов .

Катионные красители вызывают выраженное уменьшение способности тромбоцитов ассоциировать в агрегаты и их широкое распластывание.

Пример 1. Краситель толуидиновый синий вводят внутривенно кролику в концентрации 10% из расчета 0,25 МП на 1 кг веса. Кровь Дляисследования гемокоагуляции берут из правой половины сердца до введения красителей, а также через 30 мин, 1,5 ч и 2,5 ч после введения. Время тромбообразования крови после введения красителя замедляется на 100 с. Количество фибриногена уменьшается на 130 мг %, количество тромбоцитов в циркулирующей крови меньше исходного на 126000.

Таким образом, внутривенное введение толуидинового синего вызывает замедление времени тромбообразовани крови.

Пример 2. Для изучения тробогенности в ячейках изготавливают пленки из раствора фторло в ацетоне с азуром (1% от веса полимера) . На дно камеры помещают пленку с азуром А, В качестве контроля используют пленку из раствора фторлона в ацетоне без включения азура А. Свертываемость крови замедляется на 150 с по сравнению с контролем. Таким образом, при контакте крови с азуром на пленке тромбообразование крови замедляется.

Пример 3. Применяющиеся в обычной практике лавсановые сосудистые протезы в качестве соединительных магистралей искусственного сердца не отличаются оптимальными тромборезистентными и механическими свойствами. Для уменьшения проницаемости используемых сосудистых протезов применяется пропитка силикойовым клеем или адсорбция на

их внутренней поверхности фибринотромбоцитарной структуры (гемостатическая пробка).

Используют лавсановые сосудистые протезы, обработанные коллангеном с включением в их химический состав катионных красителей тионинового ряда (азур, толуидиновый синий, 1:9 диметилметиленовый синий)

Дистальный конец сосудистого протеза диаметром 26 мм подшивают конец в конец обвивным швом к восходящему отделуаорты и легочной артерии. Проксимальный конец сосудистых протезов фиксируют на выходном отделе левого и правого искусственных желудочков сердца. Результаты экспериментов по имплантации иск сственного сердца показали, что использование сосудистых протезов, обработанных коллагеном с включением в их химический состав катионных красителей, отвечает требованиям, тромборезистентности, что выражается в отсутствии тромбов и течение длительных экспериментов и оптимальной проницаемости для крови.

Применение красителей тионинового ряда в качестве антитромбогенных веществ с целью включения в химический состав синтетических материалов для повышения биологической активности, антитромбогенности, дает возможность конструкции искусствен5ного сердца, вспомогательного кровообращения, протезов сосудов в организм.