Способ определения предлейкозных и лейкозных состояний организма Советский патент 1980 года по МПК G01N33/16 

(5) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРЕДЛЕЙКОЗНЫХ И ЛЕЙКОЗНЫХ СОСТОЯНИЙ ОРГАНИЗМА

1

Изобретение относится к медицине, а именно гематологии и может быть использовано для паталогоанатомической диагностики гемобластозов.

Известен способ определения пред- 5 лейкозных и лейкозных состояний организма путем аисшиза кровеносных сосудов и клеточного состава кроветворных органов 1 .

Однако такой способ недостаточно 10 точен.

Целью изобретения является повышение точности способа.

Поставленная цель достигается тем, что путем постадийного выявления 15 предлейкозных и лейкозных состояний при исследовании кровеносных сосудов определяют их плотность, количество почек роста и терминальных капилляров и при локазателях плотности от 20 7,3 до 7,9 ед. почек роста и терминальных капилляров от 0,2 до 0,5 ед. определяют I стадию предлейкозного состояния, при показателях плотности от 16 до 18 ед. и почек роста 25 и терминальных капилляров от 1,О до 1,5 ед. определяпот стадию предлейкозного состояния, а при показателях плотности от 18 до 20 ед. и почек роста и терминальных капйлляровЗО

Of 1,6 до 5,0 ед. определяют Ш стадию предлейкозного состояния, а лейкоз нов состояние определяют при показателях плотности кровеносных сосудов от 24 до 30 ед.. и почек роста и терминальных капилляров от б до 7 ед.

Способ определения предлейкозных и лейкозных состояний организма осуществляют следующим образом.

Экспериментальный лейкоз у животных индуцируют подкожным введением раствора индола или одномоментной перевивкой вируса Мазуренко-1, 1,5%-ный раствор индола вводят подкожно по 0,2 мл 2 раза в неделю на протяжении 2,5 мес. (максимальная суммарная доза индола составляет 66 мг).

Воспроизведение вирусного лейкоза осуществляют с помощью однократного подкожного введения безклеточной фракции гемогената органов больных лейкозом животных. Животных забивают методом дислокации шейного отдела позвоночника яа 1, 2, 3, 4, 6 .день и далее с интервалами в две недели от начала опыта. Максимальные сроки наблюдения составляют 13 мес. Инъекцию сосудистого русла производят

на целой тушке через аорту 20%-ным раствором туши на 2%-ном растворе желатина.

,r---- ---, -... - -. . :- ----v . -.j -л-.- -.

. Гистологические препараты готовят по общепринятым методикам. Для изучения интраорганного кровеносного сосудистого русла на замораживающем Mt KpoTOMe делают срезы лимфатических узлов толщиной 100 мкм, докрашивают гематоксилин-зозином просветляют и заключают в канадский бальзам.

Для изучения волокнистого каркаса производят импрегнацию срезов лимфатических узлов толщиной 4 мкм азотнокислым серебром. Плотность сосудистого русла определяют по количеству сосудов, находящихся в поле счетного квадрата - условная единица пло Щади,по результатам подсчетов в 7-ми уча1стках лимфатического узла. Количество почек роста и терминальных капилляров также определяют путем их подсчета в поле счетного квадрата в 7-ми участках узла-. Кроме того, учитывают выраженность перифолликулярных сосудистых сплетений, с епень фрагментации сосудистого русла корковотовещества узла, а также учитывают наличие интрафолликулярных сосудистых сплетений.

При изучении импрегнированных срезов лимфатических узлов учитывают визуально степень импрегнации волокнистого каркаса коркового и мозгового веществ, Характер рисунка ретикулярной сети (густая, мелкопетлистая, крупнопетлистая), характер различия или сходства этих рисунков, наличие или отсутствие интрафолликулярных .сплетений ретикулярных волокон, а также оценивают ретикулярные волокна (тонкие, толстые, огрубейшие, короткие, длинные). I

Таким образом,предложенный способ обеспечивает возможность осуществлять более точный диапазон при патологоанатомическйх и экспериментальных исследованиях.

Кроме того, предложенный способ позволяет только по анализу морфологических данных и по состоянию йнтраорианной кровеносной сосудистой сети лимфатических узлов (даже одного) предполагать качественные и количественные изменения в других кро ветворных органах, так как между цифровыми параметрами содержание кле.точных элементов в органах кроветворения ; существуют: прямые и обратные достоверные корреляции. , . .

П р им е р. Мышь линии CCg , самка, возраст 9 мес., забита 9/Х-76г.

Предварительно мыши 6/V1-76 г ВВОДЯТ вирус Мазуренко-1 (О,2 мл .подкожно бесклеточной фракции гомогената).

Установлено следующее. Мышь вялан. аховые лимфатические узлы и селеенка не пальпируются. Анализ крови.

Лейкоцитоз15100

Ретикулярные

клетки, %22,0

Миелоциты, %4,0

Юные, % 1,0

Сегментоядерные - ;

нейтрофилы, %4О,О

Зозинофилы, %11,0

Лимфоциты, %3,0

Костный мозг.

Гемоцитобласты, % 2,0

Ретикулярные

клетки, % 19,0

Промиелоциты, %1,0

Миелоциты зозинофильные, %2,0

Миелоциты нейтрофильные, %10

Юные нейтрофилы, % 15,0

Палочкоядерные

нейтрофилы, %4,0

Сегментоядерные

нейтрофилы, %15,0

Зозинофилы, %2,0

Проэритробласты, % 1,0

Нормобласты, % 27 . ,Плазматические. клетки, %1,0

В таблице приведен клеточный сосав паховых (ПЛУ), брыжеечных (БЛУ) параортальных (ПАЛУ) лимфатических злов и селезенки.

БЛУI ПАЛУ 1СелеПЛУ

f ПАЛУ С

. зенка

-0,1

сты -

е

,31,6 41,4 45,443,8

19,76 12,7 23,98,4

47,43 45,6 24,439,7

- 0,20,1

0,2 0,22

0,08

0,70,11,84,5

0,230,13,32,8

-- -0,1

0,150,,3

В лимфатических узлах хорошо выражена интраорганная кровеносная сеть (ПЛУ-15,0 БЛУ 16,If ПАЛУ-16,0 сосудов на условную единицу площади). Перифолликулярные сосудистые сплетения выражены. Уплотнение сосудистой сети хорошо выражено в мозговом веществе.

Сеть ретикулярных волокон имеет обычный рисунок: тонкие ретикулярные волокна в мозговом веществе образуют густую мелкопетлистую сеть, а в корковом веществе - крупнопетлйстую. В фолликулах ретикулярные волокна редки и сетей не образуют.

. Определенные морфологические характеристики у этой мыши укладываются в Картину Ц стадии (реактивной) развития экспериментального лейкоза.

Предложенный способ позволяет получить более точную и достоверную информацию о патокинезе патологического процесса и его стадиях в связи с тем, что сосудистая интраорганная сеть, ретикулярная ткань и связанный с ней ретикулярный остов всегда реагируют позднее на изменения гемоноэза и эти структуры не обладают большой мобиль.ностью.

Формула изобретения

Способ определения предлейкозных и лейкозных состояний организма

746286

путем микроскопического исследования кровеносных сосудов и клеточного состава кроветворных органов, oтличaющlfйcя тем, что, с целью повышения точности способа, путем постсщийного выявления предлейкозньк и лейкозньлх состояний при исследовании кровеноснь1х сосудов определяют их плотность,количество почек роста и терминальных капилляров и при показателях плотности от 7,3 до 7,9 ед. почек роста и терминальных капилляров от 0,2 до 0,5 ед. определяют Т стадиюпредлейкозного состояния, при показателях плотности от 16 до 18 ед. и почек роста и тер5минальных капилляров от 1,0 до

1.5ед. определяют Fi стадию предлейкозного состояния, показателях плотности от 18 до 20 ед. и почек роста и терминальных капилляров от

0

1.6до 5,0 ед. определяют Ш стадию предлейкозного состояния, а лёйкозное состояние определяют при показателях плотности кровеносных сосудов от 24 до 30 ед. и почек роста и терми5нальных капилляров от 6 до 7 ед.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1. Чакветадзе Л.В. Предлейкозные изменения в системе кроветворения в

0 процессе развития спонтанного лейкоза у мышей. - Современные проблемы лейкозоологии и трансфузий. Трилиси, 1971, с.303-305.