Способ изготовления инактивированной вакцины против бешенства животных Советский патент 1983 года по МПК C12N7/00 A61K39/205 

;О л

Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии, в частности к способам изготовления инактивированных вакцин против бешенства животных, используемых в целях лечебно-профилактической вакцинсщиипроти данного заболевания.

Известен способ изготовления инактивированной вакцины против бешенства животных с исполь;зованием инактиватора гидроксиламина С ЗДанный способ уже не используется в практике изготовления данной вакцины, ввиду того, что готовая вакцина содержит токсичный для животных инактиватор или его химическое соединение.

Известен также способ изготовления инактнвированной вакцины против бешенства животных, включающий измельчение мозговой ткани овец, зараженных фиксированным вирусом бешенства, штамм овечьий ГНКИ, инактивирование вирусной суспензии, .ее соединение со средой высушивания с последующей расфасовкой полуфабриката и его лиофилизацией С2.

Недостатком данного способа является то, что получаемая вакцина является менее иммуногенной, имеет остаточный вирус до ЛД /0,03м и вызывает поствакцинальные осложнения у крупного рогатого скота и декоративных пород собак. Фенол как инактиватор является токсичным веществом. Допускается выпуск нестерильного препарата.

Целью изобретения является повышение иммуногенности вакцины и ее безвредности.

Это достигается тем, что инактивирование вирусной суспензии проводят 20-21%-ным раствором этанола при 30-31 0 в течение 12-14 сут.,

Пример. Для изготовления серии инактивированной сухой антира бической этанол-вакцины заражают овец в мозг вирусом фикс, бешенства в дозе р,5 мл рабочим разведением 1:500 согласно инструкции.

Предварительно готовят 20%-ный раствор этаиола из расчета: 1ч. 9§ спирта на 4 ч. стерильного физиологического раствора. В однолитровую стеклянную банку вносят 300350 мл 20%-ного раствора этанола и взвешивают ее4

Овец, у которых проявились типичные клинические признаки лабораторного бешенства и период с. 4 по 5 день с момента заражения, обескровливают, после чего отделяют голову , и извлекают мозг, который помещают . в подготовленную банку с 20%-ным раствором этанола на физиологичес-. ком раствореJ рН 7,2-7,4. ПредвариTejjbHo делают высевы на бактериологические питательные среды (пробирки ) и наблюдают за ними при выдерживании в термостате ( в течение 10 сут.

Мозговую ткань извлекают из банок и помещают в коллоидную мельницу и измельчают при ЗООЦ об/мин в течени 5 мин при зазоре 0,05 см, 20%-ный раствор этанола добавляют из расчета на 30 г мозговой ткани 70 мл 20%-ного раствора этанола, т.е. получают суспензию 30% ткани мозга. Бутыль с полуфабрикатом ставят в термостат при 30°С на 12 сут, перемешивая суспензию 3-4 раза в сут.

По истечении срока инактивации к суспензии добавляют среду высушивания из расчета на 2 ч, суспензии 1 ч,среды высушивания (состав: 100 мл бидистиллированной воды, 22,5 г сахарозы и 3 г желатины). Конечная концентрация мозговой ткани в жидком полуфабрикате вакцины составляет 20%. Вакцину расфасдвывают в пенициллиновые флаконы по 12 мл и подвергают сублимационному вусушиваиию обычным способом. Готовую вакцину контролируют на стерильность, безвредность, отсутствие остаточного вируса, икв чуногенность, растворимость обычными способами.

Вакцина, полученная предлагаемым способом состоит из следующих компонентов,: вируссодержащая ткань мозга овец с титром вируса не ниже ЛДу0/0,03 мл в 15-17%-ном растворе этанола 20-25, стабилизатор 75-80.

Полученные данные по проверке полученных производственных серий вакцины против -бешенства предлагаемым способом дают возможность судит о том, что эти изготовленные серии, инактивированные этанолом были стерильны, авирулентными, безвредными для разных видов лабораторных и сельскохозяйственных животных, а также обладали выраженными ит уногенньши свойствами, сообщающие , привитым животным иапряженный иммунитет к 14-ому дню, который сохраняется до 98-ого дня (срок наблюдения) .

Вакцина пригодна для массовой иммунизации животных всех видов как с профилактической, так к с лечебно целями.

Вакцину применяют методом подкожного и внутримышечного введения и с KOftMOM для диких животных. Дозы для внутримьшечного введения, мл: собакам 2-3, крупному рогатому скоту 5лошгщям 9-10, кошкам 1-1,5, овцам 3-3,5 свиньям 9-10, пушным животны 1,5-2,,ослам 4,5-5..

Экономический эффект при вакци.нации животных складывается из пред

37701964

отвращения распространения болезни, животных и снижения случаев возможного оздоровления неблагополучных пунктов, контракта человека с животными°-носитесоздания иммунного поголовья среди лями возбудителями уличного бешенства.

СПОСОБ ИЗГОТОВЛЕНИЯ ИНЛКТИВИРОВЛННОЙ ВАКЦИНЫ ПРОТИВ БЕИЕНСТВА ЖИВОТНЫХ, включающий измельчение мозговой ткани овец, зараженных фиксированным вирусом бешенства, штамм овечьий ГИКИ, инактивировакие вирусной суспензии, ее соединение со средой высушивания, с последующей расфасовкой полуфабриката и его лиофилизацией, отлича-ю щ и и с я тем, что, с целью повышения иммуногенности вакцины и ее .безвредности, инактивирование вирусной суспензии проводят 20-21% ным раствором этанола при 30-3lc в течение 12-14 сут. с S (Л