Установка для исследования клетокВ СуСпЕНзии пОд МиКРОСКОпОМ Советский патент 1981 года по МПК C12K1/10 

(54) УСТАНОВКА ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ КЛЕТОК В СУСПЕНЗИИ

ПОД МИКРОСКОПОМ

1

Изобретение относится к микробиологической промышленности, а имеино к технике исследований биологических объектов в суспензии под микроскопом в условиях их культивирования.

Известна установка для исследования клеток в суспензии под микроскопом, содержащая культиватор клеток, размещенную под микроскопом проточную кювету переменной толщины, сообщенную с культиватором трубопроводом, на котором установлен пе1 ежимной клапан, соединенный с кюветой трубопроводом, сборник культуральной жидкости, газовое пространство которого сообщено с Газовым пространством культиватора трубопроводом с, бактерицидным фильтром 1.

Известная установка является наиболее близкой к данному изобретению по технической сущности.

К недостаткам известной установки относится то, что по протоку культуральной жидкости и по газовой фазе установка разомкнута, поэтому нет возможности исследований клеток, например, при различных давлениях в культиваторе.

Установка неудобна в работе, так как сборник, проточная кювета, культиватор клеток должны быть строго размещены на разных уровнях, что не всегда возможно.

При этом в зависимости от этих уровней 5 будет меняться время заполнения проточной кюветы, время слива культуральной жйя кости, время приготовления клеток к просмотру под микроскопом.

в связи с наличием малых, не регулируемых давлений, в устройстве образуются застойные зоны налипания клеток. В частности, такие зоны могут образовываться в сборнике. Вследствие этого возникают условия, вызывающие неоднородность культуральной жидкости, подаваемой для исследования, что снижает точность и достоверность при прижизненном анализе клеток, не обеспечиваются условия, необходимыедля культивирования клеток в сборнике.

Целью изобретения является повыщение точности исследований.

Для достижения этой цели установка снабжена газовым насосом для создания в сборнике знакопеременного давления, установленным на трубопроводе, соединяющем газовое пространство культиватора и сборника, датчиком давления газа в сборник, размещенным на участке трубопровода за бактерицидным фильтром, каплеуловителем, размещенным перед фильтром, и датчиком уровня жидкости в сборнике, при этом культиватор соединен со сборником трубопроводом для перетока культуральной жидкости и на трубопроводах, соединяющих по жидкости сборник с кюветой и с культиватором, установлены дополнительные пережимные клапаны.

На фиг. 1 показана установка для исследования клеток в суспензии под микроскопом; на фиг. 2 - сборник, общий вид.

Установка содержит последовательно соединенные по протоку культуральной жидкости при помощи эластичного трубопровода 1 культиватор 2 клеток, пережимной электромагнитный клапан 3, проточную кювету 4 пременной толщины, расположенную над конденсатором 5 в поле зрения объектива микроскопа 6, пережимной электромагнитный клапан 7, сборник 8 культуральной жидкости, фотодатчик 9 уровня культуральной жидкости в сборнике 8 и пережимной электромагнитный клапан 10.

Газовое пространство сборника 8 сообщено с газовым пространством культиватора 2 эластичным трубопроводом 11, на котором размещен газовый насос-дозатор 12, установленный с возможностью создания в сборнике 8 знакопеременного давлений. К трубопроводу 11 последовательно подсоединены каплеуловитель 13, бактерицидный фильтр 14 и датчик 15 давления газа в сборнике 8.

Сборник 8 представляет собой стеклянный сосуд V-образной формы с входными щтуцерами 16, 17 и выходным щт;уцером 18.

Установка работает следующим образом.

Открывают пережимной электромагнитный клапан 3-й включают насос-дозатор 12 в режити создания отрицательного давления (разрежения) в сборнике 8. При этом клапаны 7 и 10 закрыты.

Как только разрежение в сборнике 8 достигнет заранее установленной величины, срабатывает датчик давления 15, и насосдозатор 12 останавливается. Под влиянием избыточногоДавления в культиваторе 2 культуральная жидкость через открытый клапан 3 заполняет проточную кювету 4 переменной толщины, объем которой увеличивается. Через некоторое время клапан 3 закрывают и открывают клапан 7.

Благодаря разрежению в сборнике 8 часть культуральной жидкости из кюветы 4 поступает в сборник 8. При этом разрежение в сборнике 8 уменьшается, что фиксируется датчиком 15, который дает сигнал на включение насоса-дозатора 12 на разрежение. Происходит постепенное откачивание культуральной жидкости из кюветы 4 в сборник 8. Под действием внешнего атмосферного давления в кювете 4 достигается заданный зазор, что фиксирует датчик зазора (на чертежах не показан). После этого включают насос-дозатор 12 и закрывают клапан 7. Через определенное время, достаточное для затухания механических колебаний, в системе осуществляют прижизненный анализ клеток в поле зрения микроскопа.

Таким образом, в проточной кювете 4 образуется монослой клеток, пригодный для прижизненного анализа под микроскопом. При исследовании клапаны 3 и 7 закрыты. Это обеспечивает изолирование кюветы 4 от всех внешних коммуникаций. Любые изменения, происходящие в культиваторе 2 и в сборнике 8, не повлияют на точность и надежность прижизненного анализа клеток.

В качестве анализатора клеток может быть применен телевизионный анализатор изображения.

По окончании анализа насос-дозатор 12 включают в режим нагнетания (положительного давления в сборнике 8). При достижении определенного, заранее установленного давления в сборнике 8, превышающем давление в культиваторе 2, открывают пережимной электромагнитный клапан 10. Культуральная жидкость из сборника 8 вытесняется избыточным давлением в культиватор 2 до достижения определенного уровня в сборнике 8, фиксируемом фотодатчиком 9. По достижении этого уровня фотодатчик 9 выдает команду на выключение насоса-дозатора 12 и закрытие клапана 10, и цикл для анализа транспорта культуральной жидкости заканчивается..

При транспорте культуральной жидкости в сборнике 8 могут образовываться пары культуральной жидкости, которые могут повредить бактерицидный фильтр 14, например, «замочить его. Это может вызвать проникновение микроорганизмов от датчика 15 (так как, он не стерилизуем) в исследуемую культуральную жидкость. Для предотвращения нарущения стерильности перед бактерицидным фильтром 14 установлен каплеуловитель 13. Образовавшийся в каплеуловителе конденсат выдавливается в сборник 8 избыточным давлением, создаваемым насосом-дозатором 12.

Данная установка создает возможность автоматической рециркуляции культуральной жидкости из сборника 8 в культиватор 2, обеспечивает полную стерильность культуральной жидкости, подаваемой для анализа, обеспечивает удобство в работе, поскольку элементы устройства могут быть расположены на любом уровне в любом месте, исключает возможность Образования застойных зон и налипания клеток, обеспечивает условия, необходимые для культивирования клеток в сборнике 8, позво яет

исследовать клетки независимо от давления в культиваторе - все это повышает надежность установки и точность прижизненного исследования клэток в суспензии под микроскопом.

Формула изобретения

Установка для исследования клеток в суспензии под микроскопом, содержащая культиватор клеток, размещенную под микроскопом проточную кювету переменной толщины, сообщенную с культиватором трубопроводом, на котором установлен пережимной клапан, соединенный с кюветой трубопроводом, сборник культуральной жидкости, газовое пространство которого сообщено с газовым пространством культиватора трубопроводом с бактерицидным фильтром, огличающаяся тем, что, с целью повышения точности исследований, установка снабжена газовым насосом для создания в сборнике знакопеременного давления, установленном на трубопроводе, соединяющем газовое пространство культиватора и сборника, датчиком давления газа в сборнике, размещенном на участке трубопровода :;и бактерицидным фильтром, каплеуловитеяем, размещенным перед фильтпом. и датчиком уровня жидкости в сборнике, при этом культиватор соединен со сборником трубопроводом для перетока культуральной жидкости и на Трубопроводах, сиединнюих по жидкости сборник с кюветой и с культиватором, установлены дополнительные пережимные клапаны.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1. Кошевой Ю. В., Лежнев Э. М., Макарова О. П. Прижизненная морфометрия клеток, с. 53, М., «Наука, 1977.

18