- , - -Токоферилкарбонил-5-фТОРуРАцил, пРОяВляющий пРОТиВО-ОпуХОлЕВую АКТиВНОСТь Советский патент 1981 года по МПК C07D239/545 A61K31/506 A61K31/513 A61P35/00 C07D311/04 C07D405/12 

оо ю

М

4

00

;о Изобретение относится к новому производному 5-фторурацила Ы -d, 1-о -токофенилкарбонил-5-фторурацилу,про являющему противоопухолевую активность, который может найти применение в медицине. Из ближайших аналогов предлагаемо го соединения известен 5-фторурацил 1, который находит применение в ка честве противоопухолевого препарата Недостатком 5-фторурацила является высокая токсичность. Целью изобретения является расши«рение арсенала средств воздействия на живой организм, а также снижение токсичности противоопухолевых препаратов . . Предлагается N -в,1-о(-токоферш1карбонил-5-фторурацил формулы Указанное соединение получают взаимодействием З-фторурацила с d,l- ol-токоферилхлорфоринатом. П р и м е р . 1. Получение N -d,l-с.-токоферилкарбонил-5-фторурацил. 10,3 г (0,13 моль) 55%-ного маслянного раствора гидрида натрия прибавляют к 100 мл диметилформамида. Полученную суспензию охлаждают до температуры ниже и затем к ней медленно, в течение 30 мин, при перемешивании -прикапывают 150 мл растВора диметилформамида, содержащего 16,9 г (0,13 моль) 5-фторурацила. Полученный раствор выдерживают в течение 1 ч при этих же условиях, посл чего к нему медленно, по каплям, при перемешивании, в течение 30 мин добавляют раствор 100 мл диметилформамида, включакидий 64,1 г (0,13 моль) d,l-oC-тoкoфepилxлopфopмиaтa. Этот раствор нагревают до 40°С и перемешивают еще 1 ч. После перемешивания реакционному раствору дают охладиться до комнатной температуры и затем фильтруют. Фильтрат концентрируют в вакууме. Остаток (76 г) дважды экстрагируют порциями бензола по 300 мл каждая. Бензольный экстракт концентрируют в вакууме. Остаток 9 . 2 (71 г) перекристаллизовьгвают из эта-i нола с получением целевого вещества в виде белого кристаллического порошка, т.пл. 119-120°С. Выход 64,7 г (85%). Найдено, %: С 69,44; Н 8,70; N 4,79. .FN.OS Вычислено,%: С 69,59, Н 8,76; N 4,77. ИК-спектр (КВч): три адсорбционные полосы поглощения, соответствующие карбонильной группе, наблюдались в интервале 1700-1770 ЯМР-спектр (CDClj): 8,22 (d 1, J, 8,0 Hj, Е,-), 2,60 (t 2, J 7 H.,), 2,09-2,04 (S 9, фенилметильная группа), 1,80 (t 2, J 7 H), 1,60-1,18 (m 18), 0,9-0,8 (d 15). Масс-спектр: . Ниже приведены данные по острым токсичностям и противоопухолевым ак-,, тивностям N -d,l- зt-тoкoфepшIкapбoнил-5-фторурацила согласно изобретению (назьшаемого далее соединением А). В качестве стандартных медикаментов выбраны N -(2-тетрагидроФУРФУРИЛ 5-фторурацил (FT-207) и 5-фторурацил 5-FU). 1. Острая токсичность Значения ЬВ.„ (мг/кг) после трехнедельного наблюдения мышей разновидности CDF (самка, возраст 8-10 недель) приведены в табл.1. Таблица 1 4000 4000 4000 FT-207; 750 Из табл.1 видно, что соединение А меет более низкое значение острой оксичности, чем соединения FT-207 5-FU. Кроме того, аналогичные результаы, получены для острой токсичности (LDjo) У мышей разновидности JCR/JCL.

Продолжение табл.3 А 4000 8 . 39,0 182,6 2000 8 36,0 160,9

1000 8 43,5 215,2 500 8 33,0 139,1 , 10 Данные представленные в табл.3, подтверждают то, что соединение А оказывает значительное действие пр единичном применении 1 /8 , 3) Влияние на рост твердой опухоли в-результате орального применения . Имплантация 1,8«10 клеток S-180 имплантирую подкожно мышам разновидности JCR/J (самки, возраст 6-8 недель). Применение На испытуемой группе каждое лекарство применяют орально в виде раствора в сафлоровом масле через 3 ч после имплантации. На контрольной группе для каждого лекарства в качестве контроля применяют сафлоровое масло. Наблюдение Через двадцать дней измеряют ве опухоли и рассчитывают отношение веса зтой опухоли к весу опухоли к контрольной группы (Т/С,%).Получен лные результаты представлены в табл Таблица 4

Продолжение табл.4

5 Как следует из данных табл.4, минимальная эффективная доза соединения А порядка 250 мг/кг, тогда как зто значение для препарата ЕТ-207 составляет 100 мг/кг, а для соединения 5-FU около 20 мг/кг. Что касается отношения минимальной эффективной дозы к токсичной дозе (LD) для каждого из лекарств, то для соединения А это значение составляет величину менее 1/16, для FT-207 - 1/10, а для соединения 5-FU - 1/6. Поэтому соединение А более пригодно,чем два других лекарства. 3. Противоопухолевая активность на L-1210 лейкомию 1) Эффект выживания Шплантация 10 клеток L-1210-лейкемии внутрибрюшинно имплантируют мьш1ам разновидности CDF (самки, возраст 8-10 недель). Применение На испытуемых группах соединение А применяют внутрибрюшинно в виде, раствора в триглицериде со средней длиной цепи (МСТ) через 24 ч после имплантации. Каждое из лекарств 5-FU и применяют также внутрибрюшинно в виде солевого раствора через 24 ч после имплантации. На контрольной группе в качестве контроля для соединения А применяют МСТ. Солевой раствор исполь2. Противоопухолевая активность против Sarcoma-180 (S-180) Г

1. .Ингибирующее действие на рост S-180 в ascite-форме (внутрибрюшиннре применение).

Шплантация Ю, клеток S-180 внутрибрюшинно имплантируют мышам разновидности JCR/JCL (самки, возраст 8-10 недель).

Применение

На испытуемых труппах соединение А применяют в виде раствора в соевом масле, а 5-FU - в виде солевого раствора через 24 ч после имплантации.

На контрольных группах используют в качестве контроля для соединения А. Солевой раствор применяют для соединения А. Солевой раствор применяют в качестве лсонтроля для препарата 5-FU. . Наблюдение

Через десять дней после имплантации опухолевых клеток измеряют общий уплотненный объект .клеток (ТРСУ) сог-25 ласно методике, описанной в .рабо Хоши ссорт. 2. Полученные ре таты представлены в табл.2, в ко Т/С, % означает отношение ТРСУ в пы.туемых группах к этому значени контрольных группах. Т а. б л и ц а

Продолжение табл. 2

I 3 1 i

Г

Солевой раствор (контроль)

16

100

5-FU

500

(гибель)

250

То же 125

3

68 34

8

26,4

,1

Из данных, приведенных в табл.1 и 2, видно, что EDjg соединения А составляет 170 мг/кг, а его индекс безопасности (LD /ЕО) составляет

величину более 24, тогда как ED,

ьо

препарата 5-FU равно 25 кг/кг, а е индекс надежности составляет величну около 5. Эти результаты показывают, что соединение А менее токсичНО в качестве противоопухолевого агента. . 2) Эффект выживания Шплантация 10 клеток S-180 внутрибрюшинно имплантируют мьшам разновидности JCR/JCL (самки, возраст 6-8 недель). Применение На испытуемой группе соединение А применяют в виде раствора в соевом масле через 24 ч после имплантации. На контрольной группе в качестве контроля для соединения А используют соевое масло. Наблюдение Подсчитывают количество дней выживания после имплантации. Рассчитьшают увеличение продолжительности жизни (JLS) по сравнению с контрольной группой (JLS .Т/С,% 100). Полученные результаты представлены в табл.3. Таблица 3

N -d, Е-р1-токоферилкарбонил-5- -фторурацил формулыпроявляющий противоопухолевую активность-I(Л

55

1

Соевое

13,8 масло

зуют как контрольное вещество для препаратов 5-FU FT-207.

Наблюдение

Определяют среднее число дней выживания после имплантации и рассчитывают увеличение продолжительности жизни (JLS) по сравнению с контрольной группой. Полученные результаты .представлены в таб.5.

л

.Таблица 5

Из данных, приведенных в табл.5, следует, что препарат FT-207 не является эффективным соединением в количестве 1/4 от LDjy . С другой стоРОНЫ, подтверждается то, что соединение А эффективно даже при дозе около 1/7 от LDj

27489 8

Кроме того, при сравнении дозы соединения А с дозой соединения 5-FU, при которой наблюдается соответствующее увеличение проДолжитель5 ности жизни, видно, что отношение указанной дозы к LD для соедине- ния А меньше, чем для соединения 5-FU. Позз-ому пригодность соединения А вьппе пригодности соединения 5-FU..

2) Длительность противоопухолевого действия.

Применение

На испытуемых: группах соединение А применяют внутрибрюшинно на мышах разновидности CDF (самки, возраст 8-10 недель) в виде раствора в МСТ перед имплантацией, как это показано в табл.6.

Каждое из соединений FT-207 и 5-FU применяют внутрибрющинно в виде солевого раствора перед имплантацией как это показано в табл..6.

На контрольных группах МСТ применяют в качестве контрольного вещества для препарата А. Для контроля соединений FT-207 и 5-FU .берут солевой раствор. Имплантация

10 клеток Ь-Г210-лейкемии имплантируют мышам внутрибрюшинно. Наблюдение

Подсчитывают количество дней выживания после имплантации.

Полученные результаты приведены в табл.6.

Таблица 6

ют

9,1

9,0

1 2

8

10,3

7 10,1

Продолжение табл.6

Доэа соединения А; FT-2071;5-FU соответственно 100 200; 50 мг/кг.

Из данных приведенных в табл.6, видно что соединение А демонстрирует эффект выживания как при использовании в день имплантации кдеток опухоли, так и за 1-6 дней перед имплантацией, а также, что это соединение А оказывает противоопухолевое действие в течение 6 дней.

Как отмечено выше, N -d,l-dl-Toкоферилкарбонил-5-фторурацил обладает значительно более низкой токсичностью и значительно более широким интервалом значений между токсичной и эффективной дозами, чем соединения .5-FU и FT-207. Продолжительность действия предлагаемого соединения более длительная, чем у соединений 5-FU и FT-207. С этих точек зрения N -d,l-o -тoкoфepил карбонш1-5-фторурацил является отличным противоопухолевым агентом. Доза этого соединения при использовании в качестве такого агента 1200 мг/кг в день, предпочтительно 5-100 мг/кг для взрослых осо бей. ..

Соединение может применяться как орально, так и парентерально. Его можно использовать в виде порошков, гранул , таблеток , капсул жидкости для инъекций , свечей и мазей.