(54) ВЛАЖНАЯ КАМЕРА ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ ЭНТОМОФТОРОВЫХ ГРИБОВ
1
Изобретение относится к сельскому и лесному хозяйству, а именно к устройствам для получения микробиологических инсектицидов, и может быть использовано для выделения чистой культуры энтомофторовых грибов из погибших насекомых и клещей.
Известна камера для выделения энтомоф- торовых грибов из зараженных насекомых, включающая чащку Петри с питательной
средой. Зараженноье насекомое помещают в такую камеру на сторону чашки Петри, противоположную той, на которой находит- |Q ся питательная среда 1.
Известна влажная камера для выделения энтомофторовых грибов из зараженных насекомых, включающая чашку Петри с пита. тельНой средой и увлажняющий лсатериал. Зараженных насе1 омых помещают на .пред- 15 метное стекло, лежащее на увлажняющем материале, находящемся на стороне, противоположной той, на которой находится питательная среда 2.. Однэко известные камеры не обеспечивают быстрого выделения чистых культур эн- 20 омофторовых. грибов, так как в них затруднено длительное поддержание высокой влаж яости, необходимой для прорастания конидий выделяемого гриба, и поддержание усЛовий стерильности. Питательная среда в таких камерах быстро подсыхает, заражается сапрофитной микрофлорой, и поэтому npoiцесс выделения чистых культур энтомофто-ровых грибов в них длительный.
Цель изобретения - быстрое выделение чистых культур энтомофторовых грибов.
Цель достигается тем, что ко дну чащкн Петри жестко закреплены полые цилиндры с крышкой, а увлажняющий материал размещен между цилиндрами на дне чашки Петри.
/Цилиндры с крышками выполнены из свегопрозрачного материала, преимуществеино стекла.
Цилиндры размещены по окружиосги и в центре дна чашки Петри.
На чертеже схематически изображеиа влажная камера, общий вид.
Влажная камера содержит чашку Петри 1, цилиндры 2 с питательной средой Д и крышкой (покровное стекло) 4, увлажняюц(ий материал 5.
Подготовка камеры к работе осуществлЯ ется следующим образом.
Ко дну чашки Петри I по окружности и в центре на расстоянии 20-25 мм от края ЖИДКИЛ4 стеклом или эпоксидной смолой приклеивают 4-5 полых цилиндра 2 с отшлифованными раями, имеющих диаметр 20- 25 мм и высоту 10-12 мм. После затвердения смолы цилиндры проверяют на герметичность, затем чашки Петри 1 подвергают стерилизации. Под действием высокой температуры смола полимеризуетСя и цилиндры 2 приклеиваются ко дну чашки Петри 1. В.цилиндры 2 пипеткой разливают питательную среду 3 из яичного желтка объемом 1 - 1,5 мм и коагулируют его в термостате при 80-90°С в течение 10-15 мин. Цилиндры 2 снабжены крышкой 4. На дно чашки Петри 1 в пространство между цилиндрами 2 помещают увлажняюший материал 5 (стерильнуй) фильтровальную бумагу, вату или наливают стерильную воду), что обеспечивает высокую влажность в течение всего периода культивирования. Над цилиндром 2 с питательной средой 3 к крышке чашки Петри 1 или к крышке цилиндра (покров-, ному стеклу ) 4 прикрепляют зараженное грибом насекомое 6 или его часть и выдерживают в таком положении в течение нескольких часов. Для поддержания условий стерильности выделение гриба можно проводить из одного насекомого 5, не открывая чашку Петри 1, а поворачивая ее крышку после очередной экспозиции до поло)«ения следующего цилиндра 2 с питательной средой. Конидии, отбросившиеся от погибцгеп насекомого 5, в определеннЬй последовательности попадают иа поверхность питательной среды всех цилиндров 2. Можно поместит|р. погибшие особи одновременно над всеми цилиндрами 2, прикрепляя их к крыш1 е цилиндра (покровному стеклу) 4. Таким образом, создается самостоятельная микрокамера, позволяющая проводить выделение энтомофторовых грибов из очень мелких насекомых, клещей, из их частей, размеры которых не превышают 0, мм.
Пример. При использовании известной влажной камеры в течение 7 лет выделяют из 2 видов насекомых (цветочно тли и гороховой тли) 3 вида энтомофторО1:ых гриГюв {Ь штаммов): Entomophthora thaxterianaиз цветочной тлИ;
Е. th xterianaиз гороховой тли,
Е. majerиз гороховой тли;
Е. m3jer из цветочной T/IH;
Е. aphidisиз гороховой тли.
Однако при йыделении энтомофторовых rpifj6oB в известной камере часто наблюдают
образование капель воды т ГГредметиом стебле насекомых, что в значительной степени препятствует отбрасыванию конидий и, следовательно, ие позволяет вйделить гриб на питательную среду. Кроме того, В такой камере невозможно создать условия высокой влажности в течение продолжительного времени. Влага нужра для формирования и отбрасывания конидий от зараженных насекомых, а также для прорастания конидий на Питательной среде. Фильтровальная бумага быстро высыхает, выделение продолжается в течение 2 суток. Дополнительное смачивание бумаги создает риск заражения среды сапрофитной микрофлорой. При использовании предло сенной камеры
за значительно более корот{ ;ий срок (в течение 2 лет) выделяют из 4 видов насекомых (капустной белянки, зерновой тли, цветочной тли и гороховой тли) 4 вида (5 штаммов) энтомофторовых грибов: E.S pharos регги а,из капустной белянки;
Е. thaxterianaиз зерновой тли;
Е, coronafnsиз цветочной тли.
Е. aphidisиз гороховой тли;
Таким образом, процесс выделения чистых
5: культур энтомофторовых грибов В предложеиной камере происходит значительно быстг jJee, чем в известных камерах.
Формула изобретения
. Влажная камера для выделения энтомофторовых грибов из зараженных насекомых, включающая чашку Петри с питательной средой и увлажняющий материал, отличающаяся тем, что, с целью быстрого В14делекня чистых культур эитомофторовых грибов, ко дну чашки Петри жестко закреплены полые цилиндры с крышкой, а увлажняющий, материал размещен между цилиндрами на дне чашки Петри.
и в центре дна чаШки Петри.
Источники информации, принятые во внимание при экспертизе .
