Питательная среда для выращивания пениофоры гигантской Советский патент 1982 года по МПК C12N1/02 A01N63/00 

(54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫРАЩИВАНИЯ ПЕНИОФОРЫ ГИГАНТСКОЙ

1

Изобретение относится к области микробиологии, а именно к выделению сапрофитных дереворазрушающих грибов-антагонистов корневой губки, в частности пениофоры гигантской (Peniophora gigantea), используемой для приготовления биопрепарата против корневой гнили хвойных пород.

При выделении штаммов микроорганизмов в чистую культуры часто происходит заселение питательной среды посторонними микроорганизмами, что затрудняет выделение чистых культур. Поэтому для этой цели используются элективные питательные среды.

Известна среда для выделения де.реворазрушаюгц1х грибов, содержащая в качестве основы агаризованное пивное сусло с добавлением этилового спирта, молочной кислоты, пентахлор нитробензола, сернокислого

магния, двухзамещенного фосфорнокисл ого калия и стрептомицина fl . Известна также среда, содержащая пивное сусло, агар-агар, дихлоран, фенол, этиловый спирт в бенсмил L2J. Однако указанные среды имеют сложный состав и сложную методику приготовления.

Известна также среда следукщего состава:

10

Пивное сусло 4% 1000 мп Агар-агар 20 г Поликарбацин 80% 5 мг Стрептомицин 100% 100 мг Молочная кисло15та 100%2 мл Этиловый спирт 96% 20 MJT Эта среда используется для выделения дереворазрушающего гриба корневой губки (Fomitopsis annosa Karst),

20 При использовании ее для вьщеления гриба-антагониета корневой губкипениофоры гигантской она заселяется другими микроорганизмами С З39Кроме того, известная среда имеет сложный состав и трудоемка в приготовлении., Цель изобретения - создание элективной питательной среды, которая была бы проста по составу и в приготовлении, благоприятной для роста пениофоры гигантской и неблагоприятной для роста других микроорганиз мов. Указанная цель достигается тем, что в агаризованное пивное сусло добавляют стрептомицин и фундазол, при этом содержание всех указанньгх ингредиентов берут в следзшзщих соот ношениях, мае.ч.: Пивное сусло 89,2739-107,1235 Агар-агар .1,3393-2,2318 Стрептомицин 0,0045-0,0180 Фундазол 0,0013-0,0027 Введение в смесь 0,0013-0,0027 мае.ч. фундазола определено экспериментальным путем. Уменьшение или увеличение количества указанного ком понента не позволяет достичь поставленную цепь. Фундазол представля ет собой порошок белого цвета со сла бым запахом, малорастворимый в воде Используется в сельском и лесном хозяйстве как фунгицид системного действия для борьбы с болезнями астений. Ранее для приготовления предлагаемой смеси не применялся. Селективную питательную среду готовят следующим образом. . Пример. Берут 89,2739 мае.ч. пивного сусла и добавляют к нему 1,3393 мае.ч. агар-агара. Полученную смесь стерилизуют в автоклаве при температуре 112°С и давлении 0,5 атм В течение 0,5 ч. Затем добавляют 0,0045 мае.ч. стрептомицина и 0,0013 мае.ч. фундазола, полученную среду перемешивают. После этого среда готова к употреблению. В примере полученная смесь разливалась в чашки Петри, калдая из которых инокулировалась 1 мл водопроводной воды, содержащей в среднем 50 опор пениофоры гигантской. Затем чашки Петри ставились в термостат при температуре 23-25 С и инкубировались в течение 5 сут, Пример 2. Отличается от при мера 1, тем что, исходные компонен ты берут в следующем составе: Пивное сусло 89,2745 Агар-агар 1,3395 Стрептомицин 0,0090 Фундазол 0,0020 Пример 3. Отличается от примеров 1 и 2 тем, что исходные компоненты берут в следующем соотношении: Пивное сусло 107,1285 Агар-агар 2,2318 Стрептомицин 0,0180 Фундазол 0,0027 Данные испытаний представлены в таблице : ИзвестныйКак видно из данных таблицы, характеристики предлагаемой питательной среды значительно цревьш1ает те же характеристики известной. Во всех примерах не наблюдается загрязнение среды другими микроорганизмами, в то время кш на известной среде это явление отмечается. Оптимальным являетея пример 1, где количество колоний пениофоры гигантской наибольшее а их размеры наиболее крупные. Таким образом, использование пред- лагаемой питательной среды позволяет получать незагрязненную посторонними микроорганизмами чистую куль туру пениофоры гигантской с размерами и числом ее колоний на 15-20% большим, чем на известной питательной среде, Формула изобретения Питательная среда для выращивания пениофоры гигантекой, содержащая пивное сусло, агар-агар и стрептомицин, отличающаяся тем, что, с целью повышения ее элективности и упрощения технологии приготовления, она содержит фунда5 9070686

зол при следующем соотношении ий-of Fomes anosus. Phytopatholoqv

гредиентов, мае.ч.:1962, 52, 12.

Пивное сусло 89.2739-107,12852 RS Cotb FW. Selective

Агар-агар 1,2293-2,2318medium for she isolation of wood

Стрептомицин 0,0045-0,0180s rotting Basloliomycetes. Can П

Фундазол 0,0013тО,0027Bot., 1971, 2,49.

,

1. Kuhlman E.Z Hendrix FF. A,o ки сосны. М., ВНИИШ, 1979 (протоselectine medium for she isolationтип).