Способ изготовления реконструкционной модели микроскопического объекта Советский патент 1982 года по МПК G09B23/28 

Изобретение относится к биологии и может быть использовано, например в;эмбриологических.исследованиях, к да возникает необходимость изучить микроскопические структуры o f eльных органов в объеме и при большом увеличении. Известен способ изготовления ре конструкционной модели микроскопиче кого объекта, включающий его фиксацию, изготовление направляющих орие тиров в виде двух окрашенных параллельных полос, изготовление серии гистологических срезов в плоскости, перпендикулярной направлению ориентиров, перенесение изображения срезов объекта и срезов ориентиров на плоские элементы,изготовление моделей срезов и составление из них объекта tl 3. Согласно этому способу, ориентиры изготавливаются вне микроскопическог объекта, модель которого необходимо получить ; изображение срезов объект переносится сначала на листы бумаги, а с них - на плоские элементы,из которых готовят модели срезов.Процесс изготовления реконструкционной модели по этому способу длителен,а используемый в нем прием изготовления ориентиров не обеспечивает высокую точность способа. Цель изобретения - ускорить способ и повысить его точность. Цель достигается тем, что согласно способу изготовления реконструкционной модели микроскопического объекта, включающему его фиксацию, изготовление направляющих ориентиров в виде двух окрашенных параллельных полос, изготовление серии гистолог 1ческих срезов в плоскости, перпендикулярной направлению ориентиров, перенесение изображения срезов объекта и срезов ориентиров на плоские элементы, изготовление моделей срезов и составление из них модели объекта, при изготовлении ориентиров 39 объект .пронизывают нитями, которые затем закрепляют в натянутом состоянии, изображение срезов объекта и срезов ориентиров переносят на плоские элементы, из которых изготавливают модели срезов об.ъекта, по конту рам срезов ориентиров в моделях срезов объекта прорезают отверстия и при составлении модели об ьекта последовательно нанизывают модели срезо через эти отверстия на вертикальные, жестко закрепленные стержни. Пример . Изготовляют пластическую (объемную) реконструкционную модель формирующейся лоханки, больши И малых чашечек почки зародыша крысы Размеры почки у такого объекта рав-. НЫ 2220 мкм (длина) , 1610 мкм (ширина ) , kBG мкм (толщина). Изготовление серии срезов проводится во фронтальной плоскости ( в этой плоскости исследуемые структуры представлены наиболее демонстративно). При избранной толщине каждого среза в 15 мкм - общее число срезов равно около 100. Ориентиры(тончайшие капроновые нити) пронизыьают сквозь ту область эмбриона, в пределах которой находится исследуемая структура, стремясь при этом расположить их как . можно ближе к ней, чтобы при проекци гистологического среда даже под большим увеличением рядом с исследуемой структурой можно было наблю дать срезы направляющих ориентиров. Нити вводят в эмбрион-перед его фиксацией и закрепляют в натянутом состоянии. Серию гистологических срезов изготавливают классическим методом, После изъятия органа (почки) из забрюшинного пространства новорожден ного крысенка, дальнейшую его обработку проводят по следующей схеме: фиксация препарата (почки) в 7 растворе формалина до 10 дней; промывка проточной ВОД9Й 2 м; обезвожи вание препарата в спиртах возрастающей концентрации; заливка препарата парафином; изготовление серии срезов на санном микротоме; расположение срезов на предметных стеклах в определенной последовательности; депараф низация срезов путем помещения в кси лол; окраска срезов гематоксилин - : эозином по общепринятой схеме; изучение срезов под микроскопом; изготовление реконструкционной модели. Затратбу времени на подготовку исследуемого препарата .и изготовление из него серии срезов для создания реконструкционной модели по известному и предлагаемому способу одинаковая. Но предлагаемый способ, позволяет значительно быстрее- изготовить модель микроскопического объекта на стадиях изготовления моделей срезов и самой реконстрУукционной модели объекта. Так, на изготовление модели почки зародыша крысы по известному способу после изготовления серии срезов требуется 1 ч, а по предлагаемому - около 5 и. Способ согласно изобретению предусматривает использование трех видов ориентиров: введенных в исследуемый объект цветнь1х нитей; отверстий, выполненных на моделях срезов по контурам изображения срезов этих нитей; стержней, на которые нанизывают модели срезов через эти отверстия. Наличие трех типов ориентиров повышает точность изготовления модели. Таким образом, предлагаемый способ позволяет быстрее и точнее, чем известный способ,изготавливать реконструкционную модель микроскопического объекта. Формула изобретения Способ изготовления реконструкционной модели микроскопического объекта, включающий erd фиксацию, из готовление направля(ощих ориентиров в виде .двух окрашенных параллельных , изготовление серии гистологических срезов в Плоскости- перпендикулярной направлению ориентиров. Перенесение изображения срезов объекта и срезов ориентиров на плоские элементы, изготовление; моделей срезов и составление из них модели объекта, о т л ич а ющ и и с я тем, что, с целью ускорения изготовления и повышения точности, модели при изготовлении ориентиров объект пронизывают нитями, которые затем закрепляют в натянутом состоянии,изображение срезов объекта и. срезов ориентиров переносят на плоские элементы, из которых изготавливают модели срезов объекта, по контурам срезов ориентиров в-моделях срезов объекта прорезают отверстия и при составлении модели объекта последовательно нанизывают модели

59i38l66

срезов через эти отверстия на верти- 1. Туркевич Н.Г. Реконструкция кальные, жестко закрепленные стержни. микр(скопических объектов по гнетеИсточники информации,логическим срезам. М., Медицина,

принятые во внимание при экспертизе 19б7, с. (прототип).