Способ определения меланоцитстимулирующей активности гормональных препаратов Советский патент 1982 года по МПК G01N33/48 

(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МЕЛАНОЦИТСТИМУЛИРУЮШЕЙ АКТИВНОСТИ ГОРМОНАЛЬНЫХ ПРЕПАРАТОВ

1

Изобретение относится к фармакопо- гни, а именно определению активности гормональных препаратов.

Известен способ определения мелано- цитстимупируюшей активности гормональных препаратов путем оценки, биологической реакции лабораторных животных на введение испытуемого препарата 1.

Однако известный способ трудоемок и Длителен (5 сут) и требует дорогосто- Q ящих животных.

Цель изобретения - ускорение способа.

Цель достигается тем, что согласно способу определения мепаноцитстимулирующей активности гормональных препара- 15 тов путем оценки биологической реакции лабораторных животных на введение испытуемого препарата, в качестве лабораторных животных используют личинки травяной лягушки, RayiotemporannpH этом го их помещают в темноту, да нее отбирают посветлевших личинок, разделяют их на группы и погружают в водные растворы испытуемого препарата разных концентраций, затем вновь помещают в темноту на ;ЗО-35 мин и по степени потемнения кожи в отдельных группах личинок определяют активность препарата.

Пример 1. При определении активности препарата кортркотропина берут головастиков травяной лягушки, приготавливают ряд воднь1Х разведений препарата разной активности, ЕД./МП: 2; 1,75; 1,5О; 1,25; 1,00, исходя из того, что исходная активность кортикотропина маркирована как 4О Ед/мл.

Головастиков помешают в темноту и посветлевших личинок погружают в приготовленные растворы по 7-9 штук в каждый и сноьа помешают в темноту. Через ЗО мин после начала опыта головастиков просматривают. Потемнение личинок происходит только в группе, погруженной в раствор, где активность кортикотропина составляет 2 Ед. /мл. Отсюда Делают вывод, что порог активности, вы-, зывающий потемнение головастиков, 1,82,0 Ед/мл.

Пример 2. При определении мепаноцитстимупирующей активности субпимированного сырья (иепьные свиные гипо4иэы) приготавливают экстракты сублимированного сырья разной концентрации.

Дпя этого измельченный порошок сублимированного сырья перемешивают в воде на магнитной мешапке в течение 1 ч. Объем воды и навеску порошка подбирают таким образом, чтобы кондентраиия исспедуемого вещества составила 10ОО мг/мп. Через 1 ч sKCTpaKt фильтруют через два слоя марпн и готовят растворы, концентрация исследуемого сырья в которых составляет, мг/мл: 10; 5{ 2,5; 1. Головастиков, предварительно посветлевших в темните, разделяют на труппы по 79 шт. Ь каждой и помещают в приготовленные растворы. Черед ЗО мин головастиков просматривают.

Показано, что потемнение происходит в растворах с коннентраиией2,5и 1,0 мг/мл. Отсюда депают вывод, что активность препарата 3-5 мг/мл.

Предложенный способ позволяет уменьшить затраты на содержание и приобретение экспериментальных животных. Рабочее время на проведение одной пробы сокращается примерно в 25 раз.

Формула изобретения

Способ определения меланоцитстимуi пирующей активности гормональных препаратов путем оценки биологической реакции лабораторных животных на введение испытуемого препарата, отличающийся тем, что, с целью ускорения способа, в качестве лабораторных животных используют личинки травяной лягушки Ravia te povxan npH этом их п мешают в темноту, далее отбирают по-светлевших личинок, разделяют их на группы и погружают в бодные раствори испытуемого препарата разных концентррадий, затем вновь помешают в темноту на 30-35 мин и по степени потемнения кожи в отдельных группах гшчинок определяют активность препарата.;

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1. Биологический метод определения АКТГ. Государственная фармакопея СССР изд. ГХ, Медгиз, 1961, с. 837.