Способ моделирования опухоли пищевода Советский патент 1982 года по МПК G09B23/28 

(54) СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ОПУХОЛИ ПИЩЕВОДА

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальному канцерогенезу, предназначено для моделирования рака пищевода у белых крыс и может быть использовано в экспериментальной онкологии и нутрициологии.

Известен способ моделирования опухолей пищевода путем введения канцерогенного вещества, например афлатоксина 1 .

Однако указанный способ не обеспечивает приближение к клиническому течению заболевания.

Цель Изобретения - приближение к .клиническому течению заболевания.

Поставленная цель достигается тем, что при осуществлении способа моделирования опухолей пищевода путём введения канцерогенного вещества,животных вскармливают пищей, дефицитной aNИHoкиcлoтaми - лизином, мети онином, треонином - и витамином А, а в качестве канцерогена вводят афлатоксин 15-16 мес.

Способ осуществляют следующим образом.

В эксперимент берут белых крысят с исходной массой тела 40-50 г.Для кормления животных используют диету, в которой с целью достижения дефицита 3-х незаменимых аминокислот лизина, метионина, треонина 75% животного белка - казеина заменяются пшеничной клейковиной, дефицитной по содержанию указанных аминокислот, а из витаминного состава диеты исключается витамин А.

В качестве онкогенного фактора используют афлатоксин В, извлеченный

10 с помощью хлороформа из культуры гриба (казахстанский штамм 1б72а), выращенной на пшенице при 30°С. Афлатоксин В,, добавляют-из расчета 45 мкг на 1 кг диеты. Животные

15 30 дней содержатся на неполноценной диете, после чего в нее ежедневно, до появления опухоли, вводят афлатоксин в указанной дозе.

Пример. В эксперимент берут

20 4 группы крысят, 1-ую и 2-ую группы животных содержат на полноценной диете. Солевую,смесь в диету добавляют из расчета 40 г на 1 кг рациона. Ее составные компоненты представлены

25 следующим образом: углекислый кальций 10,9 г/кг, фосфорнокислый калий 9,0 г/кг . хлористый калий 11,54 г, хлористый натрий 4,18 .г, сернокислый магний 3,58 г, сернокислое железо 644,4омг, сернокислая медь

30 1.5,6 мг, фтористый натрий 22,6 мг, хлористый кобальт 0,8 мг, сернокислый марганец 8,0 мг, сернокислый цинк 88,0 мг, молибденовокислый аммоний 1,0 мг, алюмокалиевые квасцы 3,2 мг, йодистый калий 2,0 мг. Состав (г/100 г) и калорийность диеты для крыс, содержащихся на пол ноценном рационе, приведены в табл, 1, Водорастворимые витамины вводят в рацион в следующих количествах, мг/кг: тиамин5,0 Рибофлавин 5,0 Пиридоксин 5,0 Нантотенат Са 28,0 Никотинамид 20,0 Иноэитол200,0 Фолиевая кисло-. та,0,2 Цианокобаламин 0,02 ьиотин 0,1 Холин1000,0 Викасол1,0. Жирорастворимые.витамины вводят в диету в виде масляного раствора, гз количестве: витамин Д 1563 ME, ви тамин Е 10 мг, витамин А 6000 ME. 3-ю и 4-ю группы животных содержат на диете, дефицитной по содержа нию 3-х незаменимых аминокислот - л зина, метионина, треонина, что дост гается заменой 75%-ов животного бел растительным белкой - пщеничной клейковиной (см. табл. 2). В диету добавляют ту жесолевую .смесь, предварительно обогащенную 24 мг углекислого Са и 237 мг фосфорнокислого К на 1 кг корма, так как в клейковине их содержание соот ветственно ниже, чем в казеине. Обо гащением достигается полная идентич ность солевого состава обеих диет. Состав (г/100 г) и калорийность диеты крыс, содержащихся на неполн ценном рационе, приведена в табл. Количество и состав водораствор мых витаминов одинаковы в обоих ра ционах. Отличия по жирорастворимым витаминам состоят в том, что из ди ты для 3-ей и 4-й групп животных в тами А исключаете. В корм для жи вотных 2-й и-4-й групп добавляют а лат |ксин В 45мкг на 1 кг корма. Спустя 15-16 мес от начала эксп римента павших и забитых животных подвергают вскрытию, а пищеводы макроскопическому и микроскопическому исследованию. В табл. 3 представлены данные о частоте возникно нения опухолей пищевода у крыс. Ка видно из табл. 3, опухоли возникаю во много раз чаще у животных, соде жащихся на неполноценной диете с д бавлением афлатоксина . В этой группе зарегистрирована также и злокачественная опухоль. Кроме того, из табл. 3 следует, что опухоли, вызванные комбинированным воздействием афлатоксина и неполноценной диеты, возникают значительно раньше. На неполноценной диете доброкачественные опухоли при даче афлатоксина возникают через 15 мес, злокачественные - через 16 мес. Следовательно, опухоли возникают во второй половине жизни крыс, что соответствует пожилому возрасту у людей, наиболее подверженному данному заболеванию . На вскрытии павшей .крысы из 4-й группы отмечено утолщение стенки пищевода в нижней трети, здесь же определялось несколько образований величиной 2-4 мм в диаметре, возвышающихся над поверхностью слизистой, некоторые из них с изъявлениями в центре. Образования сероватого цвета с шероховатой поверхностью, края язв подрытые, дно грязно-серого цвета. Гистологически - покровный эпителий нижнего отдела пищевода заметно утолщен, на этом фоне видны множество мелких, средних и крупных пальцевидных разрастаний. Крупные разрастания имеют отчетливо ветвящийся вид. Основа образований представлена склеротически уплотненной соединительной тканной стромой, поверхность покрыта многослойным плоским эпителием неравномерной толщины с признаками пролиферации клеток базального слоя и с явлениями гипер- и паракераТоза в наружных слоях. Клетки покровного эпителия ветвящихся образований характеризуются отчетливой атипией, выраженным полиформизмом и гиперхромностью ядер. У основания образований наблюдается инфильтрация субэпителиального слоя клетками.атипического плоского эпителия округлой и вытянутой формы, с веретенообразными и угловатыми гиперхромными ядрами, формирующими, различной величины очаги и ячейки. Заключение: плоскоклеточный рак нижней трети пищевода на фоне папилломатоза. Предлагаемый способ моделирования опухоли пищевода афлатоксином на фоне использования диеты, дефицитной по содержанию эссенциальных аминокислот - лизина, метионина, треонина, и витамина А, легко воспроизвог ДИМ, не требует использования дорого.стоящих реактивов и оборудования, является удобной моделью для изучения роли афлатоксина и фактора питания в этиологии, патогенезе и морфогенезе опухолей эзофагальной локализации. Данный способ может быть использован с целью воспроизведения опухоли пищевода афлатоксинного генеза для изучения проканцерогенного и антиканцерогенного значения тех или иных нарушений в питании, что имеет значение в

39 44 23

I I

47

IV

разработке методов профилактики и лечения рака пищевода на основе соответствующей коррекции пищевых рационов.

Таблица 1

Таблица 3

1(2,3%)

25

12 (25,5%)

15

79609128

Формула изобретенияаминокислотами - лизином, метионином,

Способ моделирования опухоли пище-ве канцерогена вводят афлатоксин В в

вода путем введения канцерогенноготечение 15-16 мес. вещества, отличающийсяИсточники информации,

тем, что, с целью приближения к кли- принятые во внимание при экспертизе , ническому течению заболевания, живот- 1. Druckrey Н. et al. - Natur

ных вскармливают пищей/ дефицитнойwlssenschaften,, 1962, 49, 19.

треонином и витамином А, а в качест