Способ консервации аллотканей Советский патент 1982 года по МПК A01N1/02 

(54) СПОСОБ КОНСЕРВАЦИИ АЛЛОТКАНЕЙ

1

Изобретение относится к медицине, в частности к трансплантологии, и может быть применено для консервации аллотканей с последущим применением консервированной ткани как пластического материала, при хирургических вмешательствах.

Известен способ консервации аллотканей путем помещения их в консервирующую среду 1.

Однако аллоткани консервированные известным способом обладают повышенной антигенной активностью.

Цель изобретения - уменьшение антигенной активности консервируемых алло тканей и увеличение срока их хранения.

Эта цель достигается тем, что в способе консервации аллотканей путем помещения их в консервирующую среду, аллотка11ь с консервантом помещают в однородное постоянное магнитное поле напряженностью 35-37 МТ при 8-12°С на весь срок консервации.

Способ осуществляют следующим образом.

Аллоткань, предназначенную для консервации, через 1-20 ч после смерти донора забирают и помещают в стерильный сосуд.

наполненный консервирующим раствором, при 8-12°С. Сосуд с аллотканью помещают в однородное постоянное магнитное поле напряженностью 35-37 МТ и выдерживают до момента использования. Непосредственно перед операцией консервируемую аллоткань извлекают из сосуда и используют для пересадки.

Пример 1. Через ч после смерти донора забирают любую из перечисленных

,Q выше видов аллотканей. Для консервации используют установку, снабженную соленоидом, внутри которого помещена камера консервации в виде полого цилиндра с внутренним диаметром 38 мм, длиной 450 мм, установленную на подставке в вертикальном положении. Включение в сеть переменного тока производят через понижающий трансформатор и выпрямитель с вмонтированным амперметром для регулировки напряженности постоянного магнитного поля внутри соленоида.

Для отведения тепла, образующегося при работе соленоида, и охлаждения камеры консервации (полого цилиндра), вокруг соленоида размещены латунные трубки с проточной водой (температура воды 6-

8°С), камера консервации плотно закрывается с обоих торцов для уменьшения влияния окружающей среды.

В стерильный стеклянный сосуд помещают аллоткань, сосуд заполняют 0, раствором тимола- при 8-10°С и помещают в камеру консервации в постоянное магнитное поле напряженностью 35-37 МТ.

Для оценки качества консервации аллоткани проводились гистологические исследования в различные сроки консервации (1, 3, 7, 14, 30 дней и ежемесячно в течение года) Контролем служит консервированная в 0,2%ном растворе тимола аллоткань с тем же сроком консервации без обработки аллоткани магнитным полем. При помещении аллотканей в постоянное магнитное поле признаки распада тканей (мукоидное и фибриноидное набухание, фрагментация ядер) не наблюдались при хранении аллотканей в течение 12-12,5 мес. В контрольной группе признаки распада консервируемой аллоткани наблюдались уже через 5-6 мес.

Если принять содержание ядер в клетках тканей в часы забора аллотканей перед консервацией за 100%, то в опытной группе через 12-12,5 мес. после консервации количество ядер составляло 79-85%, в зависимости от вида аллоткани. В контрольной группе такой процент содержания ядер в клетках выявлен уже к 4-6 мес. консервации.

Предлагаемый способ консервации аллотканей апробирован на группе больных (70 человек), в возрасте 5-75 лет, с диагнозами: проникающие ранения г.паз - 20 чел) сенильная катаракта (после экстракции катаракты) - 30 чел., после антиглаукоматозных операций - 20 чел. Как пластический материал использованы аллосклера, твердая мозговая оболочка и склера мертворожденных плодов, амниотическая оболочка новорожденных.

При этом реакция тканей на перенесенную травму и пересадку аллоткани при использовании предлагаемого способа консервации держалась после экстракции катаракты в среднем 5, 8 дня, после аллопластики при прободных ранениях склеры в среднем 7,5 дня, после антиглаукоматозных операций 3,7 дня, отторжение трансплантатов, консервированных предлагаемым способом, не наблюдали.

Длительность пребывания больных в стационаре: после операции экстракции катаракты в среднем 9,7 дня, после прободных склеральных ранений в среднем 17,4 дня, после антиглаукоматозных операций в среднем 8,6 дня.

Пример 2. Больной Н., 67 лет, поступил в глазную клиническую больницу с диагнозом: сенильная зрелая катаракта правого глаза, незрелая катаракта левого глаза. Проведена экстракапсулярная экстракция

катаракты на правом глазу с первичной аллосклеропластикой, без осложнений.

Способ консервации: в 0,2%-ном растворе тимола и постоянном магнитном поле напряженностью 35-37 МТ. Срок консервации пересаживаемой аллоткани 212 дней. Реакция тканей на травму (локальная, перикорнеальная инъекция, легкий хемиз в области раны) держалась 5 дней. При выписке глаз спокоен. ОД 0,03 + 10ОД 0,9. В области раны сформировался гладкий, нежный, не втянутый рубец.

Для контроля использована группа больных численностью 60 человек 9-73 лет. По диагнозам, при которых проводилась пересадка указанных выще аллотканей,

больные распределялись следующим образом: при экстракции сенильной катаракты - 30 чел., при прободных склеральных ранениях глаз, первичная хирургическая обработка склеральных ран - 15 чел., при антиглзукоматозных операциях - 20 чел. Консервация аллотканей производилась в 0,2%ном растворе тимола без внесения в постоянное магнитное поле. Срок консервации до 5 мес.

Получены следующие результаты. Реак5 ция тканей на травму держалась после экстракции катаракты в среднем 9,0 дней (7 дней - 4; 8 дней - 5; 9 дней - 14; 10 дней - 3; 11 дней - 2; 12 дней -2 глаза), после первичной хирургической обработки склеральных ран - в среднем 10,6

0 дня, после антиглаукоматозных операций - 6,2 дня.

Отторжение трансплантата наблюдалось в трех случаях (5,0%) в сроки 3-17 дней, с присоединением гнойной инфекции в ранние сроки отторжения (3-5 дней) (I ел.)

и без таковой, в поздние сроки (2 ел.), что указывает на наличие повыщенной антигенной активности примененных аллотканей.

Длительность пребывания больных в стационаре после операции экстракции катао ракты в среднем 14,3 дня, после прободных склеральных ранений - 23,8 дня, после антиглаукоматозных операций - 11,7 дня. Послеоперационное лечение больных в опытной и контрольной группах идентично. , Сравнительные клинические испытания показали, что аллоткани, консервированные по предлагаемому способу, обладают сниженной антигенной активностью. Реакция тканей глаза на травму, пересадку аллоткани проходит быстрее в среднем в 1,5- 0 2 раза по сравнению с контрольной группой. (Результат достоверен: р 0,02 - .после экстракции катаракты; р 0,02 - после первичной хирургической обработки склеральных ран; р 0,05 - после антиглаукоматозных операций). Отторжение 5 аллоткани в контроле (5%) и отсутствие его в опытной группе.

Длительность пребывания больных в стационаре в опытной группе в среднем в 1,5- 2 раза меньше в сравнении с контрольной группой (Р 0,02). При этом продолжительность хранения аллотканей, консервированных по предлагаемому способу, по сравнению с известным увеличивается в два раза. Пример 3. Через 1-20 ч после смерти донора выделяют любую из перечисленных выше видов аллотканей. Ткань помеш,ают в стерильный стеклянный тонкостенный сосуд при 8-10°С и помещают в описанную выше камеру консервации в постоянное маг нитное поле напряженностью 35-37 МТ. Для оценки качества консервации аллотканей проводились гистологические исследования в различные сроки консервации (1, 3, 7, 10, 14, 30, 45, 60 дней). Контролем служат консервированные в сухой стерильной посуде при 2-4°С аллоткани с тем же сроком консервации без обработки аллоткани магнитным полем. При помещении аллотканей в постоянное магнитное поле признаки распада тканей (мукоидное и фибриноидное набухание, фрагментация ядер) не наблюдались при хранении аллотканей в течение 45 дней (ткань жизнеспособна). Лишь после 60 дней консервации появляются начальные признаки мукоидного набухания. В контрольной группе начальные признаки распада консервируе.мой аллоткани появились уже на 10-ый день консервации (начальные признаки мукоидного набухания, фрагментация ядер), а на 14-ый день консервации - явления распада ткани явно выражены (мукоидное, умеренно-выраженное фибриноидное набухание, фрагментация ядер). Количество ядер в опытной группе через 45 дней консервации - 76-84%. В контрольной группе такой процент содержания ядер в консервируемой аллоткани наблюдали при 7-дневном сроке консервации. Аллоткань в момент взятия у донора содержала ядер. Предлагаемый способ консервации аллотканей был применен на группе больных, 50 чел, при операциях по поводу: экстракция сенильной катаракты - 20 чел., проникающих ранений склеры - 15 чел., антиглауком атозных операций - 15 чел. При этом реакция тканей на перенесенную травму и пересадку аллоткани при использовании предлагаемого способа консервации держалась после экстракции катаракты в среднем 5,3 дня; после аллопластики при прободных ранениях склеры - в среднем 7,1 дня; после антиглаукоматозных операций - в среднем 3,4 дня. Отторжение трансплантатов аллотканей, консервированных по предлагаемому способу, не наблюдали. Длительность пребывания больных в стационаре после экстракции катаракты - в среднем 9,3 дня, после прободных склеральных ранений - в среднем 17,0 дня, после антиглаукоматозных операций - в среднем 8,1 дня. Предлагаемый способ консервации аллотканей позволяет увеличить срок сохранения жизнеспособности консервированной аллоткани в 2-4 раза по сравнению с известным. При этом антигенная активность консервированного трансплантата значительно уменьшается (уменьшение сроков реакции, например, глаза на травму и пересадку трансплантата, отсутствие отторжений трансплантатов). Это позволит сократить в 1,5-2 раза сроки пребывания больных в стационаре. При применении аллотканей, консервированных по предлагаемому способу, острота зрения; поле зрения и другие функциональные показатели не ниже, чем в опытной и контрольной группах. Формула изобретения Способ консервации аллотканей путем помещения их в консервирующую среду, отличающийся тем, что, с целью уменьшения антигенной активности консервируемых аллотканей и увеличения срока хранения их, аллоткань с консервантом помещают в однородное постоянное магнитное поле напряженностью 35-37 МТ при 8-12°С на весь срок консервации. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе I. Бордюкова Г. Система реконструкции переднего отдела глаза, автореферат докт. диссерт. М., 1980, с. 7