СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОТИВОВИРУСНОГО СРЕДСТВА Российский патент 1994 года по МПК A61K31/47 A61K9/08 

Изобретение относится к медицине и ветеринарии, а именно к производству и применению лекарственных средств акридинового ряда, являющихся супериндуктором интерферонов ( α , β и γ ) и обладающих ярко выраженным иммуностимулирующим действием.

Известны способы получения парентеральных лекарственных форм производных акридина, обладающих противовирусным действием.

Известный способ получения лекарственного средства включает последовательное дозированное растворение буферных веществ метилпарабина и пропилпарабина (1-окси-4-карбоксиметилбензола и 1-окси-4-карбоксипропилбензола), производного акридина, установление рН полученного раствора равным 9,0, фильтрацию, запайку ампул в атмосфере инертного газа (азота), их стерилизацию.

К недостаткам известного способа (прототипа) следует отнести:
высокое значение рН растворов равное 9,0 приводит к быстрой инактивации лекарственного средства даже при хранении в темноте:
высокая светочувствительность препарата (под действием света происходит его инактивация), которая требует специальных условий хранения и затрудняет применение.

Все лекарственные средства на основе производных акридина, например, такие как акрихин, этакридин, аминоакрихин, высоко чувствительны к действию света, что значительно усложняет их использование в медицинской и ветеринарной практике.

Это связано с тем, что акридиновое кольцо таких соединений поглощает свет части спектра (400-480 нм) и в водных растворах подвергается фотопревращениям (фотовосстановлению, димеризации и взаимодействию с другими компонентами водных растворов), что приводит к образованию физиологически неактивных, а часто и токсичных соединений.

Замещенные фенолы (а особенно фенолят анионы, присутствующие в растворах при рН = 9,0), используемые в прототипе в качестве буферных веществ, а также первичные и вторичные аминогруппы многих соединений, например трис-(оксиметил)аминометан(трис-буфер), этилендиаминтетрауксусная кислота (трилон Б) и т. п. , участвуют в реакциях фотопревращений акридинового кольца, резко ускоряя процессы его фотодеструкции.

Задачей изобретения является разработка упрощенного способа получения высокоэффективного лекарственного средства, устойчивого к действию света и стабильного при хранении.

Поставленная задача реализуется способом получения, включающим последовательное растворение буферного вещества и производного акридина, установление рН, последующую фильтрацию, фасовку и стерилизацию. В качестве буферного вещества используют цитратный буфер, в качестве производного акридина - натрия 10-метиленкарбоксилат-9-акридон при массовом соотношении (производное акридина - цитратный буфер) 1: (0,01-0,1). Кроме того, в раствор дополнительно вводят N,N,N^',N^'-тетраметилтионина хлорид в соотношении 1: (0,001-0,01). После этого рН полученного раствора устанавливают 6,7-8,3.

Отличиями заявляемого способа от способа-прототипа являются:
использование новых производного акридина и вспомогательных веществ;
введение в смешанный раствор в определенном соотношении производного акридина и вспомогательных веществ; в качестве производного акридина использован - натрия 10-метиленкарбоксилат-9-акридон, а в качестве вспомогательных - цитратный буфер и N,N ,N^',N^'-тетраметилтионина хлорид;
установление рН полученного раствора от 6,7 до 8,3;
цитратный буфер является исключительно инертным соединением, не способным к образованию долгоживущих радикалов и следовательно не увеличивающий скорость фотопревращений основного вещества - производного акридина;
N, N, N^', N^'-тетраметилтионина хлорид служит внутренним светофильтром, поглощает попадающий в ампулу свет, имеет низкий энергетический уровень возбужденных синглетного и триплетного состояний, подвергается обратимым фотопревращениям (образование на свету лейкоформы, которая в темноте снова переходит в исходное вещество) и полностью предохраняет основное вещество - производное акридина от фотоинактивации.

Проведенные исследования показали, что для предохранения акридинов от фотодеструкции необходимо:
исключение веществ способствующих фотопревращениям, таких как различные фенолы (особенно фенолят анионы, которые присутствуют в растворах при рН = 9,0) а также первичные и вторичные амины;
введение в растворы веществ с одной стороны преимущественно поглощающих попадающий в раствор свет (внутренние светофильтры), а с другой - легче чем акридины, подвергающиеся фотопревращениям (т.е. имеющие значительно более низкие по энергии возбужденные триплетные состояния). Особый интерес представляет использование таких веществ, у которых возможны обратимые фотопревращения;
при высоких значениях рН растворов 9,0-10,0, производные акридинового ряда, имеющие в своем составе β-карбоксильные группы, подвергаются в процессе хранения декарбоксилированию. Так, из натрия 10-метиленкарбоксилат-9-акридона образуются 9-метил-10-акридон и карбонат натрия.

Изучение этих процессов показало, что снижение значения рН до 8,3 полностью тоpмозит декарбоксилирование. В проведенных опытах растворы производных акридина, имеющие рН ≅ 8,3, выдерживают хранение при комнатной температуре без разложения в течение 2,5 лет (срок наблюдения).

Заявляемые количества вспомогательных веществ по отношению к производному акридина обусловлены тем, что при более высоком содержании не наблюдается увеличение положительного эффекта, а при более низком - эффект практически отсутствует.

Выбор внутреннего светозащитного компонента - N,N,N^', N^'-тетраметилтионина хлорида в первую очередь определялся его фотохимическими свойствами, а также тем , что вещество уже около 80 лет с успехом используется в медицинской практике при парентеральном способе введения в концентрациях более, чем в тысячи раз превышающих предлагаемые для использования в данной лекарственной форме (Государственная фармакопея СССР. Х издания. ФС 407-"Метиленовый синий").

Используемый для стабилизации рН растворов цитратный буфер, не содержит способствующих фотодеструкции групп (фенольных гидроксилов и первичных (вторичных аминогрупп) и, следовательно, не вызывает повышения светочувствительности производного акридина, а также совершенно безвреден.

Заявляемый интервал рН растворов обусловлен тем, что при более высоких значениях рН, чем 8,3 наблюдается снижение стабильности лекарственного средства, а при более низких значениях, чем 6,7, наблюдается появление взвеси плохо растворимого в воде 10-метиленкарбокси-9-акридона.

Данные по эффективности лечения предлагаемым лекарственным средством различных заболеваний, в том числе и тяжелых, не поддающихся лечению известными препаратами, приведены в табл.1-3.

Препарат не вызывает побочных эффектов, кожно-раздражающего действия, хорошо переносится подопытными животными. LD₅₀ при внутривенном способе введения (белые крысы) составляет 400-450 мг/кг, при внутримышечном - 600-680 мг/кг, при внутрибрюшинном - 1100-1200 мг/кг.

П р и м е р. В 900 мл воды для инъекций (апирогенной воды) растворяют 4,0 г цитрата натрия, затем 100 г натрия 10-метиленкарбоксилат-9-акридона. При перемешивании к полученному раствору добавляют 0,05 г N,N,N^', N^'-тетраметилтионина хлорида (метиленового синего). рН полученного раствора доводят 10%-ной соляной кислотой до 7,5 (исходное рН смеси 10,35). Раствор фильтруют через мембранный фильтр "Владипор" МФА-ЭМ N 1 с размером пор 0,2 мкм. Объем отфильтрованного раствора доводят до 1000 мл водой для инъекций. Разливают во флаконы (марка стекла НС-1) по 10 мл. Герметично укупоривают под обкатку. Стерилизуют в автоклаве. Получают 98 флаконов (2 флакона - брак, не выдержали стерилизации) лекарственного средства, содержащих по 10 мл 10%-ного стерильного прозрачного раствора, устойчивого к действию света и выдерживающих хранение при комнатной температуре в течение 2,5 лет (срок наблюдения).

Выход конечной продукции в лабораторных условиях 97-98, в заводских - 95-97%.

В предлагаемом способе получения лекарственного средства возможно варьировать концентрацию основного вещества от 0,1% до 25%, а также объем ампул и флаконов, без изменения приемов изготовления, и нет необходимости в проведении каких-либо стадий в атмосфере инертного газа.

Предлагаемый способ, в отличие от способа-прототипа, позволяет получить высокоэффективное, стабильное при длительном хранении, не подвергающееся инактивации на свету лекарственное средство.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности. Сущность изобретения: растворяют в воде цитратный буфер, натрия 10-метиленкарбоксилат-9-акридон, N,N,N′,N′ -тетраметионина хлорид, устанавливают pH 6,7 - 8,3, фильтруют, фасуют и стерилизуют. Полученное средство обладает противовирусным, противоопухолевым действием, стабильно при хранении. 2 з.п. ф-лы, 3 табл.

1. СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОТИВОВИРУСНОГО СРЕДСТВА путем растворения буферного вещества, производного акридина, установления рН, фильтрации, фасовки и стерилизации, отличающийся тем, что, с целью повышения фармакологической активности целевого продукта и одновременного придания противоопухолевой активности, в раствор дополнительно вводят N,N,N',N'-тетраметилтионина хлорид, затем устанавливают рН 6,7 - 8,3, при этом в качестве производного акридина используют натрия 10-метиленкарбоксилат-9-акридон, в качестве буферного вещества - цитратный буфер. 2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что массовое соотношение производного акридина и буферного вещества 1 : (0,01 - 0,1). 3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что массовое соотношение производного акридина и N,N,N',N'-тетраметилтионина хлорида 1 : (0,001 - 0,01).