СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ 6-(D-α -АМИНОФЕНИЛАЦЕТАМИДО)-ПЕНИЦИЛЛАНОВОЙ КИСЛОТЫ НАТРИЕВОЙ СОЛИ Российский патент 1994 года по МПК G01N21/78 

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам определения 6-(D-α-аминофенилацетамидо)- пенициллановой кислоты натриевой соли, и может быть применено в практике центральных заводских лабораторий, контрольно-аналитических лабораторий химических предприятий.

Известен способ определения 6-(D-α-аминофенилацетамидо)-пенициллановой кислоты тригидрата, заключающийся в растворении анализируемой пробы в диметилформамиде (ДМФА), обработке раствором аллоксана тригидрата в ДМФА в условиях нагревания при температуре 99-100^оС на водяной бане с последующим охлаждением реакционной смеси, разбавлением ДМФА и фотометрированием образующегося окрашенного раствора (1).

Способ характеризуется трудоемкостью (нагревание при определенных условиях, охлаждение), применением токсичного растворителя, сложностью приготовления реактива и трудностью его стандартизации.

Известен способ определения 6-(D-α-аминофенилацетамидо)-пенициллановой кислоты, состоящий в обработке анализируемой пробы сульфатом меди при рН 5,2 в условиях нагревания при 75^оС в течение 30 мин с последующим фотометрированием образующегося окрашенного продукта.

Способ трудоемок (нагревание при 75^оС в течение 30 мин), длителен, недостаточно селективен.

Наиболее близким к изобретению является способ определения 6-(D-α-аминофенилацетамидо)-пенициллановой кислоты натриевой соли, заключающийся в обработке анализируемого объекта молибдатом аммония в среде серной кислоты в условиях нагревания при 95^оС в течение 10 мин (3).

Способ характеризуется трудоемкостью (нагревание в течение 10 мин при 95^оС, охлаждение) и недостаточно высокой селективностью (подобным образом определяются практически все пенициллины).

Целью изобретения является упрощение способа и повышение селективности определения.

Поставленная цель достигается тем, что в способе определения 6-(D-α-аминофенилацетамидо)-пенициллановой кислоты натриевой соли, заключающийся в обработке анализируемой пробы неорганическим реагентом с последующим фотометрированием образующегося окрашенного раствора, в качестве неорганического реагента используют 65%-ный раствор азотной кислоты, а перед фотометрированием к реакционной смеси прибавляют раствор гидроксида натрия до рН 9-14.

Способ осуществляется следующим образом: анализируемую пробу обрабатывают 65%-ным раствором азотной кислоты, к реакционной смеси прибавляют 20% -ный раствор гидроксида натрия, до рН 9-14, а образующийся окрашенный раствор фотометрируют.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

П р и м е р 1. Качественное определение 6-(D-α-аминофенилацетамидо)-пеницилла- новой кислоты, натриевой соли. Около 2 мг 6-(D-α-аминофенилацетамидо)-пеницилла- новой кислоты натриевой соли помещают в пробирку и обрабатывают 1 мл 65% раствора азотной кислоты. Через 3 мин к реакционной смеси прибавляют 4 мл 20%-ного раствора гидроксида натрия. Появляется желтое окрашивание. Чувствительность реакции - 3 мкг/мл.

П р и м е р 2. Количественное определение 6-(D-α-аминофенилацетамидо)-пенициллановой кислоты натриевой соли. В шесть выпарительных чашек помещали 0,05, 0,10, 0,20, 0,30, 0,40, 0,50 мл 0,1% раствора 6-(D-α-аминофенилацетамидо)-пенициллановой кислоты натриевой соли в этаноле и испаряли растворитель в токе воздуха. К сухим остаткам прибавляли по 1 мл 65%-ного раствора азотной кислоты и перемешивали содержимое чашек в течение 5 мин. По истечении указанного времени в каждый реакционный раствор вносили 4 мл 20% -ного раствора гидроксида натрия и фотометрировали образующиеся окрашенные растворы на приборе КФК-2 при длине волны 400 нм (светофильтр N 3) в кювете с толщиной рабочего слоя 10 мм. Измерения проводили на фоне раствора, полученного в контрольном опыте. По результатам измерений строили калибровочный график и рассчитывали его уравнение методом наименьших квадратов, которое в данном случае имеет вид
D=0,004932 С-0,04019,
где D - оптическая плотность, С - концентрация анализируемого соединения в фотометрируемом растворе, мкг/мл.

Подчинение основному закону светопоглощения наблюдается в интервале концентраций 5-100 мкг/мл.

Методика количественного определения
Около 0,05 г (точная навеска) 6-(D-α-аминофенилацетамидо)-пенициллановой кислоты натриевой соли растворяют в этаноле в мерной колбе вместимостью 50 мл и доводят до метки этанолом. В выпарительную чашку вносят 0,4 мл полученного раствора, испаряют растворитель в токе воздуха и дальнейшие операции осуществляют по схеме, описанной для построения калибровочного графика. Результаты определения и метрологические характеристики представлены в таблице.

Изобретение позволяет определять 6-(D-α-аминофенилацетамидо)-пенициллановой кислоты натриевую соль в присутствии близких по строению структур: 6-(α-карбоксифенилацетамидо)-пенициллановой кислоты динатриевой соли, бензилпенициллина натриевой соли, 3-фенил-5-метил-4-изоксазолилпенициллина натриевой соли моногидрата, 6-(феноксиацетамидо)-пенициллановой кислоты. Продолжительность определения 8-10 мин.

Использование: изобретение относится к аналитической химии, фотометрическим методам анализа материалов и может быть применено в практике центральных заводских лабораторий и контрольно-аналитических лабораторий химических заводов. Сущность изобретения: анализируемую пробу обрабатывают 65% -ным раствором азотной кислоты, к реакционной смеси прибавляют раствор гидроксида натрия до pH 9 - 14, а образующийся окрашенный раствор фотометрируют. 1 табл.

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ 6-(D-α -АМИНОФЕНИЛАЦЕТАМИДО)-ПЕНИЦИЛЛАНОВОЙ КИСЛОТЫ НАТРИЕВОЙ СОЛИ путем обработки анализируемой пробы неорганическим реагентом с последующим фотометрированием образующегося окрашенного раствора, отличающийся тем, что в качестве неорганического реагента используют 65%-ный раствор азотной кислоты, а перед фотометрированием к реакционной смеси прибавляют раствор гидроксида натрия до рН 9 - 14.