Способ определения 6-(феноксиацетамидо)-пенициллановой кислоты и динатриевой соли 6-( @ -карбоксифенилацетамидо)-пенициллановой кислоты Советский патент 1990 года по МПК G01N21/78 

Изобретение относится к аналитической химии, в частности к анализу 6-(фенаксиацетамидо)-пенициллановой кислоты и динатриевой соли 6-(с6-кар- боксифенилацетамидо)-пенициллановой кислоты и может быть применено в заводских контрольно-аналитических лабораториях, центральных заводских лабораториях химических предприятий.

Цель изобретения - повышение точности, селективности определения и сокращение времени проведения способа.

Пример 1. Определение 6-(фе- ноксиацетамидо)-пенициллановой кислоты.

1. Качественное определение.

Около 2 мг 6-(феноксиацетамидо)- -пенициллановой кислоты помещают в выпарительную чашку, вносят 0,5 мл 10%-ного раствора нитрата калия в концентрированной серной кислоте и перемешивают содержимое чашки до полного растворения прореагировавшей 6-(феноксиацетамидо)-пеницилла- новой кислоты. К полученному раствору прибавляют при перемешивании

О5

1

оо со оь

1 мл волы и порциями 10%-ный раств гидроксида натрия, перенося содержимое чаюки в стеклянный стаканчик и одновременно таким образом нейтрлизуя кислую реакцию раствора до нейтральных или слабощелочных значений рН. Затем прибавляют 5 мл универсального буфера,, доводя реакцию среды до рН 9, и 4 мл 0,15%-ного раствора 2,3,5-трифенилтетразолия хлорида. Образующийся продукт экстргируют 10 мл трихлорметана. Слой тр хлорметана окрашивается в желтый цвет. Чувствительность реакции 2,5 мкг/мл.

2. Количественное определение. Методом изомолярных серий и насыщения установлено, что 6-(фенокси- ацетамидо)-пенициллановая кислота и 2,3,5-трифенилтетразолия хлорид реагируют в молярном отношении 1:1. Максимумы поглощения продукта реакции (раствор в трихлорметане) нахо- |дятся при 374 и 415 нм.

I Построение калибровочного график I В шесть выпарительных чашек поме- |щают 0,25; 0,50; 1,00; 1,50; 2,00 и |2,50 мл 0,05%-ного ацетонового раст- JBopa 6-(феноксиацетамидо)-пеницилла- |нбвой кислоты и испаряют раствори- |тель до получения сухих остатков. В |каждую чашку вносят 0,5 мл 10%-ного jpacTBopa нитрата калия в крнцентриро |ванной серной кислоте и перемешива|ют содержимое чашек до полного раст- ворения прореагировавшей 6-(фенокси- ацетамидо)-пенициллановой кислоты. К полученным растворам прибавляют при перемешивании 1 мл воды и пор- Ь;иями 10%-ный раствор гидроксида нат ;рия, перенося содержимое чашек в :стеклянные стаканчики.и одновременно таким образом нейтрализуя кислую ре- :акцию раствора до нейтральных или слабощелочных значений рН, Затем при бавляют 5 мл универсального буфера Кдоводят реакцию среды до рН 9) и мл 0,15%-ного раствора 2,3,5-три- еЬенилтетразолия хпорида. Образую- йийся продукт экстрагируют трихлор- Метаном двавды по 10 мл. Экстракты Объединяют- в мерной колбе емкостью 5 мл и доводят трихлорметаном до Нетки, Оптическую плотность окра- Шенных растворов измеряют на фото- электроколориметре КФК-2 при длине Волны 400 нм (светофильтр № 3) в кювете с толщиной рабочего слоя

-

25

°

50

5

50 мм. Раствором для сравнения служит экстракт, полученный в контрольном опыте. По результатам измерении строят калибровочный график. Све- топоглощение окрашенных растворов подчиняется закону Бугера-Ламберта- Бера в интервале концентраций 5- 50 мкг/мл. Методом наименьших квадратов расчитывают уравнение калибровочного графика, которое в данном случае имеет вид: D 0,01596 С + + 0,01901, где D - оптическая плотность; С - концентрация анализируемого вещества в фотометрируемом растворе, мкг/мл.

Методика количественного определения.

Около 0,05 г (точная навеска)

6-(феноксиацетамидо)-пенициллановой кислоты растворяют в мерной колбе емкостью 50 мл в ацетоне. 0,75 мл полученного раствора вносят в выпарительную чашку и дальнейшие операции осуп ествляют по схеме, описанной для построения калибровочного графика. Определение количественного содержания 6-(феноксиацетамидо)-пени- цилпановой кислоты проводят по уравнению калибровочного графика и пересчитывают на навеску. Результаты определения и метрологические характеристики представлены в табл. 1.

Пример 2. Определение динат- риевой соли 6-(о4-карбоксифенилацет- амидо)-пенициллановой кислоты. 1. Качественное определение. Околб 2 мг динатриевой соли 6-(j)6- -карбоксифенилацетамидо)-пеницилла- новой кислоты помещают в выпарительную чашку, вносят 0,5 мл 10%-ного раствора нитрата калия в концентрированной серной кислоте и перемешивают содержимое чашки до полного растворения прореагировавшей динатриевой соли

6-(о1:-карбоксифенилацетамидо)-пеницил- лановой кислоты. К полученному раствору прибавляют при перемешивании 1 мл воды и порциями 10%-ный раствор гидроксида натрия, перенося содержимое чашки в стеклянный стаканчик и одновременно таким образом нейтрали- ,зуя кислую реакцию раствора до нейтральных или слабощелочных значений рН. Затем прибавляют 5 мл универсального буфера, доводя реакцию среды до рН 9, и 4 мл 0,15%-ного раствора 2,3,5-трифенилтетразолия хлорида. Образующийся продукт экстрагир тот 10 чп

5

трихлорметана. Слой трихпорметана орашивается в желтый цвет. Чувствительность реакции 0,8 мкг/мл.

2. Количественное определение. Методом изомолярных серий и насыщения установлено, что динатриевая соль 6-(()-карбоксифенилацетамидо)- -пенициллановой кислоты и 2,3,5-три фенилтетразолия хлорид реагируют в молярном отношении 2:1. Максимум поглощения продукта реакции (раствор в трихлорметане) находится при 375 им.

Построение калибровочного график В пять выпарительных чашек внося 0,25; 0,50; 1,00; 1,50 и 2,00 мл стандартного (0,025%-ного) этаноль- ного раствора динатриевой соли 6- (о6 -карбоксифенш1ацетамидо)-пенициллан вой кислоты и испаряют растворитель до получения сухих остатков. В каждую чашку вносят 0,5 мл 10%-ного ра раствора нитрата калия в концентрирванной серной кислоте и перемешивают содержимое чашек до полного растворения прореагировавшей динатриевой соли б-(о -карбоксифенилацетамидо)- -пенициллановой кислоты. К полученным растворам прибавляют при перемешивании 1 мл воды и порциями 10%-ный раствор гидроксида натрия, перенося содержимое чашек в стеклянные стаканчики и одновременно таким образом нейтрализуя кислую реакцию раствора до нейтральных или слабощелочных значений рН. Затем прибавляют 5 мл универсального буфера, доводя реакци среды до рН 9, и 4 мл 0,15%-ного раствора 2,3,5-трифенилтетразолия хлорида. Образующийся продукт экстрагируют трихпорметаном дважды по 10 мл. Экстракты объединяют в мерной колбе емкостью 25 мл и доводят трихлорме- таном до метки. Оптическую плотность окрашенных растворов измеряют на фо- тоэлектроколориметре КФК-2 при длине волны 400 нм (светофильтр № 3) в кювете с тол1аиной рабочего слоя 50 мм Раствором для сравнения служит экстракт, полученный в контрольном опыте По результатам измерений строят ка- либровочный график. Светопоглощение окрашенных растворов подчиняется закону Бугера-Ламберта-Бера в интервале концентраций 2,5-20, О мкг/мл, Методом наименьших квадратов рассчитывают уравнение калибровочного графика, которое в данном случае имеет

10

15

25

20

30

35

40

45

0

вид D 0,01873-С + 0,09732, где D - оптическая плотность, С - концентрация анализируемого вещества в фото- метрируемом растворе, мкг/мл.

Методика количественного определения.

Около 0,025 г (точная навеска) динатриевой соли 6-(Ь -карбоксифенил- ацетамидо)-пенициллановой кислоты растворяют в этаноле в мерной колбе емкостью 50 мл 0,5 мл полученного раствора вносят в выпарительную чаижу. Этанол испаряют и дальнейшие операции осуществляют по схеме, описанной для построения калибровочного графика. Определение количественного содержания динатриевой соли 6- (oi.-K ар б ок сифе нил аце т амид о) - -пенициллановой кислоты проводят по уравнению калибровочного графика и пересчитывают на навеску. Результаты определения и метрологические харак- теристики представлены в табл.2.

Предлагаемый способ по сравнению с известным повышает селективность определения, В отличие от известного он позволяет анализировать 6-(фенок- сиацетамидо)-пенициллановую кислоту и динатриевую соль 6-(К-карбоксифе- нилацетамидо)-пенициллановой кислоты в присутствии бензола, алкилбензо- лов, галогенбензолов, производных бензойной кислоты, не содержащих нит- рогрупп рибофлавина. Определению не мешает ряд , содержащих в своей структуре одну или несколько нитрогрупп (В-С- -трео-1-п-нитрофе- нил-2 дихлор ацетил амин опропанди ол- -1,3; 2,4-динитрохлорбензол; 3,5-ди- нитро-6-хлорбензойная кислота), а также различные неорганические соединения, обладающие собственной окраской.

I

Предлагаемый способ в 1,5-2 раза сокращает время проведения анализа и повьш1ает точность определения (относительная ошибка уменьшается с 4 до 1,86%). Сравнительная характеристика предлагаемого и известного способов-представлена в табл.3.

Формула изобретения

. 20 -

55

Способ определения 6-(феноксИацет- амидо)-пенициллановой кислоты и динатриевой соли 6-(р{,-карбоксифенил- ацетамидо)-пенициллановой кислоты

1617336

путем обработки анализируемой пробы picTBopoM нитрата калия в концент- рированной серной кислоте, разбав- Л(5ния реакционной смеси водой, обра- цветореагентом в щелочной ере- де с последующим фотометрированием полученного раствора, отличаю- и с я тем, что, с целью повыi

8

.шения точности, селективности определения и сокращения времени осуществления способа, в качестве цвето- реагента используют раствор 2,3,5- -трифеншттётразолил, обработку цве- тореагентом ведут при рН 9, перед фотометрированием окрашенный продукт экстрагируют трихлорметаном.

Изобретение относится к аналитической химии, в частности к определению 6-(феноксиацетамидо)-пенициллановой кислоты и динатриевой соли 6-(α-карбоксифенилацетамидо)-пенициллановой кислоты. Цель - повышение точности, селективности определения и сокращение времени проведения способа. Получение ведут путем обработки анализируемой пробы раствором нитрата калия в конц. H₂SO₄, разбавления реакционной смеси водой. Процесс ведут с последующей обработкой полученной смеси раствором 2,3,5-трифенилтетразолия при PH 9, окрашенный продукт экстрагируют трихлорметаном и фотометрируют. Способ в 1,5-2 раза сокращает время проведения анализа и повышает точность определения (относительная ошибка уменьшается с 4% до 1,86%). 3 табл.

Т а б л и ц а 1

Результаты количественного определения 6-(фег- ноксиацетамидо)-пенициллановой кислоты .

Т а б л и ц а 2

Результаты количественного определения динат- риевой соли 6-(«(-карбоксифенилацетамидо)-пеницилла- новой кислоты

Таблица 3

Сравнительная характеристика предлагаемого и известного способов

Сравниваемые параметры

Предлагаемый- способ

елективность

Способ позволяет селективно определять 6-(фе- ноксиацетамидо)-пени- циллановую кислоту и динатриевую соль 6- (оС- -карбоксифенилацетами- до)-пенициллановой кислоты в присутствии бензола, алкилбензолов, га- логенбензолов, производных бензойной кислоты, не содержащих нитро- групп, рибофлавина. Определению не мешает ряд нитросоединений: D-(-)- .-трео-1-п-нитрофенил-2- -дихлорацетиламинопро- панд1;и ол-1, 3; 2,4-дин ит - рохлорбензо л; 3,5-ди- нитро-6-хлорбензойная кислота, а также различные неорганические вещества, обладающие собственной окраской

15-18 мин

1,85

Известный способ

Способ не позволяет селективно определять б-(феноксиацетамидо)- -пенициллановую кислоту и динатриевую соль 6-(с)С-карбокси- фенш1ацетамидо)-пе- нициллановой кислоты в присутствии бензола, алкилбензолов, гапогенбензолов, некоторых производных . бензойной кислоты, не содержащих нитрогрупп, рибофлавина. Определению мешает ряд нитросоединений: В-(-)-трео -1-п-нитpoфeнил-2-диx- лopaцeтилaминoпpoпaн- диoл-1,3; 2,4-динитро- хлорбензол; 3,5-динит- ро-6-хлорбензойная кислота, а также различные неорганические вещества, обладающие собственной окраской

30-35 мин

f4