ИНДУКТОР ИНТЕРФЕРОНА Российский патент 1995 года по МПК A61K31/18 A61K38/21 

Изобретение относится к медицине и биологии и касается индукторов интерферона.

Известно, что все индукторы интерферона важнейшего фактора неспецифической резистентности клеток, разделяются на две группы: природные (вирусы и природные двухспиральные нуклеиновые кислоты) и синтетические (полимеры и низкомолекулярные препараты).

Природные индукторы интерферона антигенно высокоактивны, могут быть контаминированы другими опасными микроорганизмами и все обладают токсическим действием в концентрациях, необходимых для проявления достаточной противовирусной активности. Эти же недостатки присущи и большинству высокомолекулярных синтетических индукторов интерферона поликарбоксилатам и полинуклеотидам (типа поли (И) и поли (Ц)). Они также являются достаточно токсичными, а их синтез трудоемким и дорогим.

Клинически перспективными признаны такие низкомолекулярные индукторы интерферона, как аналоги госсипола и препараты тилорон (2,7-бис-(2-диэтиламиноэтокси)-3-флуоренон и левамизол ((-)2,3,5,6-тетрагидро-6-фенилимидазо-(2,1-B)-тиазола гидрохлорид.

Основным недостатком этих препаратов является их высокая токсичность и многочисленные побочные эффекты, при этом индукция интерферона проявляется при введении больших доз и является кратковременной.

Сущность изобретения состоит в том, что впервые в качестве индуктора интерферона применили γ-форму стрептоцида.

Известна γ-форма стрептоцида. Изучение специфической антимикробной активности γ-формы стрептоцида показало, что она обладает антимикробной активностью, не уступающей активности фармакопейного стрептоцида.

Фармакопейный стрептоцид оказывает противомикробное действие по отношению к стрептококку, менингококку, гонококку, пневмококку и некоторым другим бактериям. Применяют стрептоцид для лечения ангины, рожистого воспаления, цистита, пиелита, для лечения раневой инфекции и при других инфекционных заболеваниях.

γ -форма стрептоцида так же, как и фармакопейный стрептоцид, ранее в качестве индукторов интерферона известны не были.

В результате проведенных исследований выявлены свойства γ-формы стрептоцида, дающие возможность применить его по новому назначению.

Интеpферониндуцирующая активность γ -формы стрептоцида и фармакопейного стрептоцида изучалась на мышах в опытах in vivo.

В экспериментах были использованы самцы мышей линии CBA массой 10-12 г. В качестве культуры клеток применяли перевиваемую линию клеток мышиных фибробластов Z-929. Клетки выращивали в пластиковых 96-луночных платах (37^оС, 3,5% CO), в среде Игла 2 МЕМ 10% сыворотки крупного рогатого скота. В качестве вируса был выбран вирус энцефалокардита мышей (ВЭМК), штамм Колумбия.

Фармакопейный стрептоцид и заявляемый индуктор γ-форму стрептоцида вводили в дозах 50, 150 мкг/0,2 мл, однократно внутрибрюшинно (0,2 мл на мышь). Забор крови проводили из сонной артерии через 5,24 и 72 ч после введения препаратов. Для каждой пробы брали не менее 5 животных. Титрование интерферона проводили путем определения подавления цитопатического действия на культуре клеток микрометодом.

Результаты исследований представлены в табл.1.

Анализ результатов исследования показал, что фармакопейный стрептоцид не обладает интерферониндуцирующей активностью. В то же время, γ-форма стрептоцида индуцировала интерферон в сыворотке крови мышей уже через 5 ч после введения (ранний интерферон) с активностью 40-80 ед/мл, а через 24 ч титры ИФ достигли уже 160-320 ед/мл. К 72 ч произошло снижение титров интерферона.

Сравнение результатов проведенных исследований с литературными данными позволило оценить γ-форму стрептоцида как высокоактивный индуктор интерферона.

Сравнительная характеристика активности известных индукторов интерферона и заявляемого индуктора γ-формы стрептоцида представлена в табл.2.

Представленные в табл.2 данные позволяют сделать вывод о том, что предложенный новый индуктор интерферона γ-форма стрептоцида является высокоактивным индуктором.

Изобретение иллюстрируется следующим примером.

В опыте использовали 10 мышей-самцов линии CBA массой 10-12 г. В качестве тест-культуры применяли перевиваемую линию клеток мышиных фибробластов Z-929. Клетки выращивали в пластиковых 96-луночных платах (37^оС, 3,5% CO) в среде Игла 2 МЕМ 10% сыворотки крупного рогатого скота. В качестве вируса использовали вирус энцефалокардита мышей (ВЭМК), штамм Колумбия.

5 мышам вводили γ-форму стрептоцида в дозе 50 мкг/0,2 мл (I группа) и 5 мышам в дозе 150 мкг/0,2 мл (II группа) внутрибрюшинно. Забор крови проводили из сонной артерии через 5,24 и 72 ч после введения препарата. Титрование интерферона проводили путем определения подавления цитопатического действия на культуре клеток микрометодом.

В I группе мышей уже через 5 ч уровень интерферона в сыворотке крови достиг 40-80 ед/мл, через 24 ч он составил 160 ед/мл и снижался до 20 ед/мл к 72 ч.

Во II группе животных, через 5 ч после введения препарата уровень интерферона соответствовал 80 ед/мл, через 24 ч произошло повышение до 320 ед/мл и к 72 ч снижение до 20 ед/мл.

Таким образом, при введении γ-формы стрептоцида в дозах 50 и 150 ед/мл выявлено значительное повышение титров интерферона: через 5 ч до 40-80 ед/мл, через 24 ч до 160-320 ед/мл.

Анализ результатов собственных исследований, а также литературных данных по изучаемому вопросу позволил охарактеризовать γ-форму стрептоцида как клинически перспективный индуктор интерферона. Преимуществами γ-формы стрептоцида при применении его в качестве индуктора интерферона являются высокая интерферониндуцирующая активность; малая токсичность, сочетание интерферониндуцирующей и противомикробной активности, что может быть перспективно при лечении инфекций, доступность.

Таким образом, применение γ-формы стрептоцида в качестве индуктора интерферона позволяет расширить арсенал средств индуцирующих интерферон и может быть перспективным для широкого использования в медицинской практике.

Изобретение относится к медицине и биологии и касается индукторов интерферона. Сущность изобретения состоит в применении γ-формы стрептоцида в качестве индуктора интерферона. 2 табл.

Применение γ -формы стрептоцида в качестве индуктора интерферона.