ИНДУКТОР ИНТЕРФЕРОНА Российский патент 2005 года по МПК A61K35/78 

Область техники

Изобретение относится к области медицины. Более конкретно оно относится к борьбе с вирусными инфекциями путем индуцирования в организме, нуждающемся в лечении, интерферонов.

Уровень техники

Интерфероны - это группа биологически активных белков или гликопротеидов, синтезируемых клеткой в процессе защитной реакции на чужеродные агенты - вирусную инфекцию, антигенное или митогенное воздействие.

При стимуляции клеток индуктором происходит активация генов, кодирующих белки интерферонов и трансляция - продукция этих белков. Интерферон секретируется во внеклеточную жидкость и через рецепторы действует на другие клетки. В результате связывания интерферйна с рецептором активируются так называемые ИФН-зависимые гены, продукты которых обладают антивирусным действием (аденилатсинтетазы, протеинкиназы фактора инициации синтеза белка, антигены главного комплекса гистосовместимости I класса.)

Существуют два типа интерферона. К первому типу относятся α- и β-интерфероны, ко второму типу - γ-интерферон. Способностью вырабатывать α-интерферон обладают все виды ядерных клеток, а γ-интерферон продуцируется только двумя видами ядерных клеток - макрофагами и Т лимфоцитами.

Агентов, индуцирующих синтез интерферонов, очень много. Наиболее сильные индукторы α-ИФН-вирусы, дсРНК и другие двуспиральные комплексы. В качестве индукторов γ-интерферона могут выступать и некоторые иммуномодуляторы (см. Рафальский В.В. Клиническое применение препаратов интерферона; http://www.antibiobic.ru/books/if/5.sthtml).

Ранее иммуномодулирующая активность была обнаружена у вещества растительного происхождения, содержащегося в бересте (верхней части коры березы) - бетулина, что явилось предметом изобретения по заявке того же заявителя №2003120857).

Исследования, проведенные авторами настоящего изобретения, позволили обнаружить у бетулина интерферониндуцирующую активность, что позволяет использовать его, а также содержащие его экстракты бересты в качестве индуктора интерферона.

Осуществление изобретения

Исследование интерферониндуцирующей активности бетулина проводилось in vivo (в организме мышей) с использованием препаратов сухого экстракта бересты, производимого заявителем - ООО “Березовый мир”.

В исследовании были использованы белые беспородные мыши (массой 15-18 г).

Исследовались 3 образца препарата бетулина: препарат №1, содержащий 72% бетулина, препарат №2 (также с 72% содержанием бетулина) и препарат №3 (с 98% содержанием бетулина). Исследуемые вещества растворяли в 1,0% растворе Твин 80. Препарат №1 вводили однократно внутрибрюшинно в дозе 25,0 и 50,0 мг/кг веса. Препараты №2 и №3 вводили однократно перорально в дозе 50,0; 100,0 и 150,0 мг/кг веса.

Для сравнения использовали известный индуктор интерферона ридостин, представляющий собой дсРНК киллерного штамма дрожжей S. Cerevisea. Препарат вводили внутрибрюшинно, однократно, в дозе 7,5 мг/кг веса.

Уровень интерферона в периферической крови определяли через 5, 24, 48 и 72 часа после введения препарата.

Определение содержания интерферона проводили биологическим методом по защите культуры клеток мышиных фибробластов L929 от 100 ЦПД₅₀ вируса энцефаломиокардита мышей.

Были получены следующие результаты.

Введенный внутрибрюшинно препарат №1 индуцировал образование интерферона, который определялся в крови мышей через 24 часа после введения. Полученные результаты приведены в таблице 1. Отмечается дозовая зависимость уровня интерферона (64 ед/мл при дозе в 25,0 мг/кг и до 256 ед/мл при дозе 50,0 мг/кг).

Введение препаратов бетулина №2 и №3 перорально также индуцировало синтез интерфрона у мышей, уровень которого достигал своего пика к 48 часам после введения. (таблица 2). При применении препарата №2 отмечается четкая дозовая зависимость уровня интерферона, максимальный титр интерферона в 640 ед/мл наблюдали через 48 часов при дозе в 150,0 мг/кг.

При применении препарата №3 также наблюдался высокий уровень интерферона с максимумом на 48 часов. При этом все исследуемые дозы препарата индуцировали одинаково высокий уровень синтеза интерферона.

Промышленная применимость

Таким образом, все исследуемые образцы препарата бересты экстракта сухого, содержащего бетулин, индуцировали высокий уровень синтеза интерферона как при внутрибрюшинном, так и пероральном пути введения. Дозовая зависимость уровня синтеза интерферона указывает на прямую связь бетулина с индукцией интерферона. Отсутствие четкой дозовой зависимости при максимальном содержании бетулина в препарате может указывать на достижение плато в соотношении индуктор - рецепторы интерферона.

Важным свойством бетулина является его способность индуцировать синтез интерферона при пероральном введения.

Таблица 1ПрепаратДоза, мг/кгУровень интерферона, ед/мл5 часов24 часа48 часов№125,086432(Бетулин 72%)50,08256256Ридостин7,5128256256Таблица 2ПрепаратДоза, мг/кгУровень интерферона, ед/мл24 часа48 часов72 часа№250,080160<10(Бетулин 72%)100,0160320<10150,0320640<10№350,016032040(Бетулин 98%)100,032032020150,0160320<10

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и используется для индуцирования синтеза интерферона. Применение бетулина в качестве индуктора интерферона. Применение экстракта бересты в качестве индуктора интерферона при содержании бетулина в экстракте бересты свыше 70%. Бетулин и экстракт бересты способствуют эффективному синтезу интерферона в организме. 2 н. и 1 з.п. ф-лы, 2 табл.

1. Применение бетулина в качестве индуктора интерферона.2. Применение экстракта бересты в качестве индуктора интерферона.3. Применение по п.2 при содержании бетулина в экстракте бересты свыше 70%.