СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА ИЗ МЕДИЦИНСКОЙ ПИЯВКИ, ОБЛАДАЮЩЕГО АНТИТРОМБОТИЧЕСКИМ, ТРОМБОЛИТИЧЕСКИМ, АНТИАТЕРОСКЛЕРОТИЧЕСКИМ И ГИПОТЕНЗИВНЫМ ДЕЙСТВИЕМ Российский патент 1995 года по МПК A61K35/62 

Изобретение относится к способам получения биологически активных веществ и может быть применено в гематологии, медицинской промышленности, ветеринарии, медицине и в лабораторной практике,
Известен способ получения лечебного препарата из медицинской пиявки, обладающего только тромболитическим действием, но не обладающего противотромболитическим, антиатеросклеротическим и гипотензивным действием.

Целью изобретения является получение лекарственного препарата из медицинской пиявки, обладающего антитромботическим, тромболитическим, антиатеросклеротическим и гипотензивным действием.

Цель достигается тем, что медицинских пиявок промывают водой и физиологическим раствором, замораживают и лиофильно высушивают для повышения биологической активности препарата с помощью специального приема, лиофильно высушенный продукт освобождают от кожного покрова, растирают в порошок и используют.

Следующие материалы иллюстрируют достижение цели.

Берут 20 штук медицинских пиявок, многократно промывают водой, а затем физиологическим раствором, замораживают при температуре -70^оС и лиофильно высушивают. Средняя масса одной высушенной пиявки составляет 0,35 ± 0,05 г. После удаления ткани кожного покрова ее растирают в порошок и взвешивают. Его масса составляет 0,15 ± 0,03 г в расчете на одну пиявку. Из 20 пиявок в среднем получается 2,5-3,0 г лечебного порошка.

Наблюдается высокая растворимость препарата в физиологическом растворе. Время свертывания фибриногена тромбином в присутствии раствора (антитромбиновая активность) повышается на 70% время рекальцификации плазмы крови увеличивается почти в два раза, дестабилазная активность в полтора раза, антитриптическая активность повышается также в два раза, антихимотриптическая активность на 70%
При внутривенном введении крысам экстракта, приготовленного из расчета 5 мг порошка в 1 мл физиологического раствора, степень тромбообразования составляет 50 ± 5% (контроль 100%) при интервале 24 ч между введением препарата и сыворотки крови человека, стимулирующей формирование тромба на фоне стазирования яремной вены крысы. При оральном способе введения степень тромбообразования составляет 75 ± 5% (n 8, p < 0,01).

При внутривенном введении экстракта, полученного из 20 мг препарата, степень тромболизиса составляет 75 ± 5% (n 8; р < 0,01), а при оральном введении той же дозы степень тромболизиса составила 70 ± 5% (n 12, р < 0,01). В контрольной группе животных степень тромболизиса 20 ± 5% (n 3) за счет спонтанного тромболизиса.

При ежедневном оральном введении крысам, находящимся на атерогенной диете (по Вильграму в модификации Базазьяна) и имеющим выраженные признаки атеросклероза, вводили по 50 мг препарата (n 10) в течение 10 дней. В результате были обнаружены явления регресса атеросклероза, о чем судили по уменьшению площади липидных набуханий в грудной и в брюшной аортах по сравнению с контрольной группой крыс (n 10), получавших физиологический раствор вместо лечебного препарата.

Гипотензивный эффект выявляли при оральном введении суспензии 40 мг препарата в 1 мл физиологического раствора крысам линии SHR (спонтанно гипертензивным). Исходный уровень давления в хвостовой вене составлял 160 ± 5 мм рт.ст. После однократного введения препарата на следующий день зафиксировано понижение давления до 135 ± 5 мм рт.ст. на вторые сутки после введения препарата оно повышалось до 150 ± 5 мм, и далее на пятые сутки возвращалось к исходному уровню (n 12).

Объект относится к способам получения биологически активных препаратов, действие которых направлено на блокирование тромбообразования, растворение старых тромбов, снижение кровяного давления, на предупреждение и регресс атеросклероза. Целью изобретения является повышение биологической активности целевого продукта. Это достигается тем, что медицинских пиявок многократно промывают дистиллированной водой и физиологическим раствором, замораживают, лиофилизируют, отделяют с помощью специальных приемов ткань кожного покрова, растирают в порошок и используют в экспериментах на животных в виде порошка или суспензии в физиологическом растворе при оральном способе введения или в виде водных экстрактов при подкожном, внутримышечном или внутривенном введениях животным.

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА ИЗ МЕДИЦИНСКОЙ ПИЯВКИ, ОБЛАДАЮЩЕГО АНТИТРОМБОТИЧЕСКИМ, ТРОМБОЛИТИЧЕСКИМ, АНТИАТЕРОСКЛЕРОТИЧЕСКИМ И ГИПОТЕНЗИВНЫМ ДЕЙСТВИЕМ, заключающийся в том, что пиявку промывают последовательно дистиллированной водой, физиологическим раствором, замораживают, лиофильно высушивают, удаляют ткани кожного покрова и целевой продукт растирают в порошок.