Изобретение относится к микробиологической промышленности, в частности к производству средств защиты растений от вредителей и касается нового штамма гриба для производства энтомопатогенного препарата.
Известны штаммы микромицета Verti- cillium lecanii для производства инсектицидных препаратов (1, 2).
Однако биологическая эффективность их недостаточно высокая.
Целью изобретения является получение нового более продуктивного и терморезистентного штамма.
Штамм гриба Verticillium lecanii PУ4/1 получен путем селекции исходного штамма Verticillium lecanii N 4 и отбора однородных колоний с учетом продуктивности, биологической эффективности и термоустойчивости. Штамм гриба Verticillium lecanii РУ 4/1 депонирован в Центральной коллекции микроорганизмов государственного концерна "Биопрепарат" (ЦКМК "Б") под N ЦКМ F-53Ц.
Культурально-морфологические признаки штамма.
При выращивании штамма на агаризованной среде Чапека при 25-27оС в течение 4 сут формирует однородные колонии белого цвета, круглые с ровными краями и опущенной поверхностью, выпуклые, напоминающие полусферу, врастающие в толщу агара с зоной просветления. Гифы гриба тонкие, прозрачные, сентированные, от них отходят конидиеносцы в виде боковых веточек, расположенные под острым углом от главной оси конидиеносца или на его ветвях по 2-5 штук в мутовке. Конидии овально-удлиненные, одноклеточные, бесцветные, размером 2-7 х 1,5-2,0 мк.
При выращивании на сусло-агаре колонии кремового оттенка и более рельефно выступает центр колоний. После 7 сут выращивания наблюдается радиальное сегментирование колоний, просматриваемое сквозь толщу агара и обильное накопление конидиальных спор.
Физиолого-биохимические признаки штамма.
Морфологические признаки штамма, изменение рН культуральной среды в динамике роста и его продуктивность при выращивании на различных по составу питательных средах при температуре 25оС представленных в табл. 1, 2, 3.
Штамм РУ 4/1 незначительно превосходит родительский штамм по содержанию жизнеспособных спор при глубинном культивировании.
Изучена терморезистентность штамма. Результаты оценки штаммов к температурному воздействию представлены в табл. 4, из которых следует, что штамм РУ 4/1 не уступает по устойчивости к высушиванию родительскому штамму.
Отношение к источника углерода.
Оценка штаммов в "пестром" ряду Гисса, содержащих источники углерода: сахарозу, лактозу и глицерин, показала, что все испытанные компоненты утилизируются более полно уже после 2-суточной экспозиции штаммом РУ 4/1. Особенно наглядно это выражено на примере глицерина, где отмечается значительная задержка в развитии культуры исходного штамма N 4 (изменение окраски среды на 5-7-е сутки).
Отношение к источника азота: хорошо утилизирует пептон, гидролизат рыбы, гидролизат мяса, азотнокислый аммоний, сернокислый аммоний, казеин, рыбо-костную муку, мясной бульон, дрожжи и их гидролизаты.
Хранение штамма: штамм хранят на плотной агаризованной среде (2,5% агар-агара) в виде конидиальных спор при 0-4оС.
Биологическая эффективность штамма РУ 4/1 проверена на личинках оранжерейной белокрылки и составляет 80-95% а родительского штамма N 4 65-70% при концентрации 0,8-1,2˙107 спор/мл.
При обработке листьев растений огурца, пораженных белокрылкой, отмечен эффективный рост гриба на пупариях и имаго насекомых.
Пример использования штамма для получения препарата.
В жидкую питательную среду, содержащую 1% технической глюкозы, 3% глицерина и 7% гидролизата белково-витаминного концентрата, вносят 7% споровой культуры штамма и культивируют при 25оС при аэрировании (объем:объем) и перемешивании в ферментере объемом 50 л в течение 58 ч. Полученную культуральную жидкость концентрируют в 10 раз по объему. В концентрат вносят стабилизатор суспензии и прилипатель. Получают препарат с титром 20 млрд спор/см3.
Таким образом, предложенный штамм превосходит родительский по продуктивности и биологической активности.
Использование: микробиологическая промышленность, производство средств защиты растений от вредителей. Сущность изобретения - микромицей Verticillium lecanii РУ-1 получен путем селекции исходного штамма Verticillium lecanii N 4 и отбора однородных колоний с учетом продуктивности, биологической эффективности и термоустойчивости. Штамм депонирован в Центральной коллекции микроорганизмов государственного концерна Биопрепарат под N ЦКМ F- 53 Ц. Для получения инсектицидного препарата штамм заливают в жидкую питательную среду, содержащую 1% технической глюкозы, 3% глицерина и 7% белково-витаминного препарата, культивируют при аэрации в течение 58 ч, полученную культуральную жидкость концентрируют, вводят прилипатель и стабилизатор и получают препарат с титром 20 млрд спор/см3. 4 табл.
Штамм микромицета Verticillium lecanii ЦК МК "Б" ЦКМ F-53Ц для производства инсектицидного препарата.
| Аппарат для очищения воды при помощи химических реактивов | 1917 |
|
SU2A1 |
| Нефтяной конвертер | 1922 |
|
SU64A1 |
