СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПЕРОРАЛЬНОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ ЦИТОКИНА (ЕГО ВАРИАНТЫ) Российский патент 1996 года по МПК A61K9/16 

Изобретение относится к фармакологии и может быть использовано для получения пероральных лекарственных форм на основе цитокинов (например, альфа- или гамма-интерферонов, ФНО-альфа).

Известны оральные препараты, содержащих альфа-интерферон, однако способы их получения, состав и подробные фармакологические свойства в публикациях не упоминаются в большинстве случаев. Описано применение интерферона в твердой дозированной форме (лепешки, разжевываемый витамин, шипучие таблетки), которая высвобождает интерферон по растворению во рту при контакте со слизистой рта и глотки [1] Предложено применение реr os препарата природного альфа-интерферона, в этом случае интерферон также может осуществлять свое действие только в области горла и глотки. Универсальность упомянутых лекарственных форм для других цитокинов не предусматривается.

Целью изобретения является создание твердой пероральной лекарственной формы цитокина, активное начало которой высвобождается в тонком отделе кишечника.

В псевдоожиженном слое гранулируют наполнитель из лактозы, сахарозы, стеарата кальция раствором препарата цитокина, затем на полученные таким образом гранулы наносят кишечнорастворимое покрытие, состоящие из смеси шеллака и кислоты олеиновой или ацетилфталилцеллюлозы и масла касторового. В состав лекарственной формы входят ядро и покрытие, содержащие соответственно лактозу, сахарозу, стеарат кальция и цитокин (например, альфа- или гамма-интерферон, ФНО-альфа), шеллак и кислоту олеиновую или ацетилфталилцеллюлозу и масло касторовое, при этом указанные компоненты взяты в следующем соотношении, мас. лактоза 43-79; сахароза 5-17; стеарат кальция 0,5-1; шеллак 8-40 (или ацетилфталилцеллюлоза 4-8, или масло касторовое 1-2); кислота олеиновая 2-10 препарат цитокина остальное.

Из практики отечественной и зарубежной медицины не известно о способе гранулирования в псевдоожиженном слое наполнителя раствором препарата цитокина с последующим нанесением кишечно-растворимого покрытия, а также о наличии лекарственной формы, полученной по описанному способу, в состав которой входят ядро и покрытие, содержащие компоненты, взятые в вышеуказанных соотношениях.

Гранулирование в псевдоожиженном слое наполнителя позволяет получить универсальную для цитокинов пероральную лекарственную форму, защищающую цитокин от воздействия протеолитических ферментов, инактивации другими компонентами секрета пищеварительных желез, создает условия для всасывания цитокина в тонком отделе кишечника, сохранение его повышенной концентрации в крови в течение 24 ч, упрощает стандартизацию препарата, исключает возможность присутствия в лекарственной форме возбудителей заболеваний, передаваемых с кровью, дает возможность точнее проводить индивидуальный подбор доз цитокина, в том числе в педиатрии.

Предлагаемая лекарственная форма апробирована в эксперименте на кроликах в лабораторных условиях.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

П р и м е р 1. Смешивали порошкообразные ингредиенты наполнителя, взятые в соотношении, мас. лактоза 89; сахароза 10; стеарат кальция 1. Полученный наполнитель гранулировали в псевдоожиженном слое при 20^оС в течение 60 мин раствором препарата генно-инженерного альфа-2-интерферона. Гранулы переводили в псевдоожиженное состояние и при 30^оС в течение 120 мин распыляли состав, содержащий мас. вода 86,3; шеллак 7,4; кислота олеиновая 1,9; 10%-ный водный раствор аммиака 4,4. Затем подсушивали гранулы при 30^оС в течение 15 мин. Полученная лекарственная форма содержала ядро и покрытие при следующем соотношении компонентов, мас. лактоза 43; сахароза 5; стеарат кальция 0,5; шеллак 40; кислота олеиновая 10; препарат генно-инженерного альфа-2-интерферона остальное. Активность альфа-2-интерферона в гранулах сохранялась более 7 мес (время наблюдения).

При пероральном введении кролику полученных гранул при разовой дозе генно-инженерного альфа-2-интерферона 1х10⁶ МЕ через 1 и 2 ч в периферической крови интерферон не определялся. Через 3 ч его активность в сыворотке крови составляла 10 МЕ/мл, через 4 ч 20 МЕ/мл, через 5 ч 80 МЕ/мл, через 7ч 50 МЕ/мл, через 24 ч 10 МЕ/мл.

П р и м е р 2. Смешивали порошкообразные вещества наполнителя, взятые в соотношении, мас. лактоза 35; сахароза 14; стеарат кальция 1. Полученный наполнитель гранулировали по описанному в примере 1 способу раствором препарата генно-инженерного гамма-интерферона. Покрытие наносили по описанному в примере 1 способу в течение 30 мин. Полученные гранулы подсушивали в течение 15 мин при температуре 30^оС. Полученная лекарственная форма содержала ядро и покрытие при следующем соотношении компонентов, мас. лактоза 50; сахароза 8; стеарат кальция 0,6; шеллак 32; кислота олеиновая 8; препарат генно-инженерного гамма-интерферона остальное. Активность гамма-интерферона в гранулах сохранялась в течение 3 мес (время наблюдения).

При пероральном введении кролику полученных гранул при разовой дозе 1х10⁶ МЕ, через 1 и 2 ч гамма-интерферона в крови не определялось, через 3 ч его активность в сыворотке крови составляла 8 МЕ/мл, через 4 ч 16 МЕ/мл, через 5 ч 32 МЕ/мл, через 7 ч 32 МЕ/мл, через 24 ч 8 МЕ/мл.

П р и м е р 3. Для получения наполнителя смешивали порошкообразные ингредиенты в следующем соотношении, мас. лактоза 90; сахароза 9; стеарат кальция 1. Полученный наполнитель гранулировали аналогично примеру 1 раствором препарата ФНО-альфа. Гранулы переводили в псевдоожиженное состояние, и при 30^оС в течение 30 мин распыляли состав аналогично примеру N 1. После подсушивания в течение 15 мин при 30^оС получали гранулированный препарат, содержащий следующие компоненты в соотношении, мас. лактоза 79; сахароза 9; стеарат кальция 1; шеллак 8; кислота олеиновая 2; препарат ФНО-альфа остальное. Активность ФНО-альфа в гранулах сохранялась более 7 мес (время наблюдения).

При пероральном введении кролику полученных гранул при разовой дозе ФНО-альфа 2х10⁴ Ед 1 и 2 ч в периферической крови ФНО-альфа не определялся. Через 3 ч его активность составила 4 Ед/мл, через 5 ч 10 Ед/мл, через 7 ч 4 Ед/мл, через 24 ч 2 Ед/мл.

П р и м е р 4. Смешивали порошкообразные компоненты наполнителя, взятые в соотношении, мас. лактоза 81; сахароза 18; стеарат кальция 1. Полученный наполнитель гранулировали по описанному в примере 1 способу. Покрытие наносили по описанному в примере 1 способу в течение 60 мин. Затем подсушивали гранулы при 30^оС в течение 15 мин. Полученная лекарственная форма содержала ядро и покрытие при следующем соотношении компонентов, мас. лактоза 71; сахароза 16; стеарат кальция 1; шеллак 8, кислота олеиновая 2, препарат генно-инженерного альфа-2-интерферона остальное. Активность альфа-интерферона в гранулах сохранялась в течение 7 мес.

При пероральном введении кролику полученных гранул при разовой дозе генно-инженерного альфа-2-интерферона 1х10⁶ МЕ изменение активности интерферона в сыворотке крови происходило аналогично изменению его активности, описанному в примере 1.

П р и м е р 5. Смешивали порошкообразные вещества, составляющие наполнитель, взятые в соотношении, мас. лактоза 90; сахароза 9; стеарат кальция 1. Полученный наполнитель гранулировали по описанному в примере 2 способу. Покрытие наносили по описанному в примере 1 способу в течение 30 мин. После подсушивания гранул при 30^оС в течение 15 мин полученная лекарственная форма содержала ядро и покрытие при следующем соотношении, мас. лактоза 79; сахароза 8; стеарат кальция 1; шеллак 8; кислота олеиновая 2; препарат генно-инженерного гамма-интерферона остальное.

Активность гамма-интерферона в гранулах сохранялась более 3 мес (время наблюдения).

При пероральном введении кролику полученных гранул при разовой дозе гамма-интерферона 1х10⁶ МЕ изменения активности его в сыворотке крови происходило аналогично описанному в примере 2.

П р и м е р 6. Порошкообразные компоненты наполнителя смешивали, взятые в следующем соотношении, мас. лактоза 89; сахароза 10; стеарат кальция 1. Полученный наполнитель гранулировали по описанному в примере 2 способу, гранулы переводили в псевдоожиженное состояние и при комнатной температуре в течение 30 мин распыляли состав, содержащий, мас. ацетон 53,8; спирт этиловый, 96% -ный 35,8; ацетилфталилцеллюлоза 8,7; масло касторовое 1,7. Затем гранулы подсушивали при 30^оС в течение 5 мин.

Полученная лекарственная форма содержала ядро и покрытие при следующем соотношении компонентов, мас. лактоза 79; сахароза 9; стеарат кальция 1; ацетилфталилцеллюлоза 8; масло касторовое 2; препарат генно-инженерного гамма-интерферона остальное.

Активность гамма-интерферона в гранулах сохранялась более 3 мес (срок наблюдения).

При пероральном введении кролику полученных гранул при разовой дозе генно-инженерного гамма-интерферона 1х10⁶ МЕ изменение активности гамма-интерферона в сыворотке крови происходило аналогично изменению его активности, описанному в примере N 2.

П р и м е р 7. Смешивали порошкообразные вещества наполнителя, взятые в соотношении, мас. лактоза 85; сахароза 14; стеарат кальция 1.

Полученный наполнитель гранулировали по описанному в примере 1 способу. Покрытие наносили по описанному в примере 6 способу в течение 20 мин. Затем подсушивали гранулы при 30^оС в течение 5 мин.

Полученная лекарственная форма содержала ядро и покрытие при следующем соотношении, мас. лактоза 77; сахароза 13; стеарат кальция 1; ацетилфталилцеллюлоза 6; масло касторовое 1,5; препарат генно-инженерного альфа-2-интерферона остальное. Активность альфа-интерферона в гранулах сохранялась более 7 мес.

При пероральном введении кролику полученных гранул при разовой дозе интерферона 1х10⁶ МЕ, изменение его активности происходило аналогично примеру 1.

П р и м е р 8. Смешивали порошкообразные вещества наполнителя, взятые в соотношении, мас. лактоза 80; сахароза 18,5; стеарат кальция 0,5. Полученный наполнитель гранулировали по описанному в примере 2 способу. Покрытие наносили по описанному в примере 6 способу в течение 10 мин. Затем подсушивали гранулы при 30^оС в течение 5 мин. Полученная лекарственная форма содержала ядро и покрытие при следующем соотношении компонентов, мас. лактоза 76; сахароза 17; стеарат кальция 0,5; ацетилфталилцеллюлоза 4; масло касторовое 1; препарат генно-инженерного гамма-интерферона остальное. Активность гамма-интерферона в гранулах сохранялась более 3 мес (срок наблюдения).

При пероральном введении кролику полученных гранул при разовой дозе гамма-интерферона 1х10⁶ МЕ изменение его активности в сыворотке крови происходило аналогично изменению его активности, описанному в примере 2.

П р и м е р 9. Наполнитель состоял из следующих порошкообразных компонентов, мас. лактоза 89; сахароза 10; стеарат кальция 1, который после перемешивания гранулировали аналогично примеру 3 раствором препарата ФНО-альфа. Гранулы переводили в псевдоожиженное состояние и в течение 30 мин распыляли состав, содержащий, мас. ацетон 53,8; спирт этиловый, 96%-ный 35,8; ацетилфталилцеллюлоза 8,7; масло касторовое 1,7. После подсушивания гранул при 30^оС в течение 5 мин получали гранулированный препарат, состоящий из ядра и оболочки, в следующем соотношении компонентов, мас. лактоза 79; сахароза 9; стеарат кальция 1; ацетилфталилцеллюлоза 8; масло касторовое 2; препарат ФНО-альфа остальное.

Активность ФНО-альфа в гранулах сохранялась 7 мес (срок наблюдения).

При пероральном введении кролику полученных гранул при разовой дозе ФНО-альфа 1х10⁴ Ед через один и два часа в периферической крови ФНО-альфа не определялся. Через 3 ч его активность составляла 4 Ед/мл, через 5 ч 8 Ед/мл, через 7 ч 4 Ед/мл, через 24 ч 2 Ед/мл.

Таким образом, при изготовлении лекарственной формы по описанному способу не требуется проводить предварительную лиофилизацию препарата цитокина, имеется возможность более точного дозирования цитокина (по сравнению с жидкой лекарственной формой). В течение длительного времени сохраняется активность цитокина в предлагаемой лекарственной форме, сохранение повышенной концентрации цитокина в сыворотке крови экспериментальных животных отмечалось в течение 24 ч.

Изобретение относится к медицине, в частности, к способу получения лекарственной формы цитокина. Сущность изобретения заключается в том, что цитокин смешивают с наполнителем, полученный в свою очередь смешиванием лактозы, сахарозы и стеарата кальция наполнитель гранулируют в псевдосжиженном слое раствором цитокина и распыляют кишечно-растворимое покрытие, содержащее олеиновую кислоту, аммиак, шеллак и воду. Изобретение содержит 2 варианта исполнения. Способ может быть использован для приготовления пероральных форм цитокинов, например альфа- или гамма -интерферона, ФНО-альфа и т. п. 2 с. п. ф - лы.

1. Способ получения пероральной лекарственной формы цитокина путем гранулирования цитокина с наполнителем, отличающийся тем, что наполнитель получают смешиванием лактозы, сахарозы и стеарата кальция при следующем соотношении компонентов, мас.

Сахароза 10,0 14,0
Стеарат кальция 0,6 1,0
Лактоза Остальное
полученный наполнитель гранулируют в псевдоожиженном слое раствором цитокина, далее гранулы переводят в псевдоожиженное состояние и распыляют кишечно-растворимое покрытие, содержащее олеиновую кислоту, шеллак, 10%-ный раствор аммиака и воду при следующем соотношении компонентов, мас.

Олеиновая кислота 1,9 2,0
10%-ный раствор аммиака 4,4
Шеллак 7,4 32
Вода Остальное
далее гранулы подсушивают, а полученная лекарственная форма содержит лактозу, сахарозу, стеарат кальция, шеллак, кислоту олеиновую и цитокин.

Сахароза 10 14
Стеарат кальция 0,6 1,0
Лактоза Остальное
полученный наполнитель гранулируют в псевдоожиженном слое раствором цитокина, далее гранулы переводят в псевдоожиженное состояние и распыляют кишечно-растворимое покрытие, содержащее ацетилфталилцеллюлозу, масло касторовое, 96% -ный этиловый спирт и ацетон при следующем соотношении компонентов, мас.

Ацетилфталилцеллюлоза 4,0 8,7
Масло касторовое 1,5 2,0
96%-ный этиловый спирт 36,8
Ацетон Остальное
далее гранулы подсушивают, а полученный продукт содержит лактозу, сахарозу, стеарат кальция, ацетилфталилцеллюлозу, масло касторовое и цитокин.