СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АЛКОГОЛЬНЕЙТРАЛИЗИРУЮЩЕЙ СЫВОРОТКИ Российский патент 1997 года по МПК G01N33/68 

Изобретение относится к медицине, касается способов получения антитоксических, в частности алкоголь-нейтрализующих, сывороток.

Из известных способов получения алкоголь-нейтрализующих сывороток наиболее близким по технической сущности является способ получения алкоголь-нейтрализующей сыворотки (Глебов В.С. Нейроиммунология в клинике и эксперименте. М. 1975, с. 376-380), в котором 96^o этиловый спирт смешивают в равных соотношениях с 44% -ным раствором глицерина и ежедневно внутримышечно вводят животным на протяжении от 21 до 35 дней в постепенно нарастающих дозах от 0,08 до 1,6 г этилового спирта на 1 кг веса животного. Курсовая доза этилового спирта составляет 31-37 г на 1 кг веса животного. Обескровливание проводят через 2 суток после последней инъекции этилового спирта. Отделение сыворотки проводят стандартным методом. Полученная сыворотка, соединенная в равном объеме с 96^o этиловым спиртом, после центрифугирования при 2500 об/мин в течение 5 минут при внутривенном введении белым мышам в количестве 0,2 мл снижает 50%-ную смертельную дозу этилового спирта до 40-25%
Наиболее существенными недостатками этого способа получения алкоголь-нейтрализующих сывороток являются: значительная длительность получения сывороток (21-35 дней); их недостаточная алкоголь-нейтрализующая активность; выраженная способность таких сывороток пассивно переносить повышенную чувствительность к этиловому спирту; наличие местных осложнений у алкоголизированных животных в виде локального очага асептического воспаления и последующих параличей конечностей в результате длительности алкоголизации и введения массивных разовых доз этилового спирта.

Цель настоящего изобретения ускорение и упрощение способа получения алкоголь-нейтрализующих сывороток, повышение их алкоголь-нейтрализующей активности и уменьшение токсических свойств.

Указанная цель достигается тем, что в предлагаемом способе 96^o этиловый спирт в смеси с 40%-ным раствором глюкозы вводят внутримышечно животным в течение 5 дней ежедневно от 0,06 до 0,5 г на 1 кг веса животного.

Предлагаемый способ осуществляют следующим образом. 96^o этиловый спирт смешивают в равных объемах с 40%-ным раствором глюкозы и вводят внутримышечно животным (кроликам) в течение 5 дней, ежедневно в дозе 0,06- 0,5 г на 1 кг веса животного с постепенным наращиванием дозы на 0,15-0,2 г на 1 кг веса при общей курсовой дозе этилового спирта 1,4-1,5 г на 1 кг веса животного. Обескровливают животных через 2 суток после последней инъекции. Собранную кровь помещают на 1 час в термостат при 37^oC для образования сгустка и центрифугируют при 2,500 об/мин в течение 5 минут. Полученную сыворотку сохраняют в стерильных ампулах при 2-4^oC.

Пример 1. Кролик N 17 породы шиншилла, самец, вес 2,5 кг. Алкоголизация внутримышечная, ежедневно в течение 5 дней по схеме, приведенной в таблице. 10.7.78 г. животное обескровлено. При вскрытии локальных местных поражений в местах инъекций не отмечено.

Полученная сыворотка проверена по следующим тестам.

1. Проверка на специфичность (алкоголь-нейтрализующий тест). Полученная сыворотка соединена в равном объеме с 96^o этиловым спиртом и после центрифугирования в течение 10 минут при 5000 об/мин введена внутривенно 50 белым мышам весом 18-20 г в дозе 0,2 мл, содержащая 50%-ную смертельную дозу этилового спирта. Смертельный исход отмечен у 4 мышей (8%). В контрольном исследовании сыворотка кролика N 17 заменена сывороткой интактного кролика и смесь внутривенно введена 50 белым мышам в дозе 0,2 мл. Погибло 26 мышей (52%).

2. Проверка на безвредность (определение наличия в сыворотке веществ, способных пассивно переносить повышенную чувствительность к этиловому спирту). 10 белым мышам внутривенно ввели полученную сыворотку, разведенную 1:10 стерильным физиологическим раствором в дозе 0,2 мл. Через 48 часов тем же мышам внутривенно ввели 0,2 мл 3%-ного этилового спирта. У 9 мышей состояние после введения этилового спирта не изменилось, у одной кратковременная обездвиженность, одышка, почесывание носа.

3. Проверка на стерильность. Полученная сыворотка высеяна на сахарный бульон и косой агар. Высевы выдержаны в термостате при 37^oC в течение 7 дней. Роста микробов не отмечено.

Предлагаемый способ: дает возможность получать эффективную сыворотку, нейтрализующую токсическое действие этилового спирта, а целевой продукт специфичен по отношению к этиловому спирту; исключает возможность появления анафилактоподобных реакций при последующем введении этилового спирта; предотвращает появление местных реакций и параличей конечностей у алкоголизируемых животных.

Изобретение относится к медицине, в частности к получению антитоксических алкоголь-нейтрализующих сывороток. Сущность изобретения: животному ежедневно внутримышечно вводят этиловый спирт в смеси с 40%-ным раствором глюкозы. Изобретение позволяет получить эффективную сыворотку, нейтрализующую токсическое действие алкоголя. 1 табл.

Способ получения алкогольнейтрализирующей сыворотки, включающий внутримышечное ежедневное введение животным 96^o-ного этилового спирта в смеси с разбавителем в равных соотношениях с постепенным наращиванием доз, обескровливанием животных и отделением сыворотки, отличающийся тем, что этиловый спирт вводят в смеси с 40%-ным раствором глюкозы в течение 5 дней в дозе 0,06 0,5 г на 1 кг веса животного при общей курсовой дозе 1,5 1,5 г этилового спирта на 1 кг веса животного.