ПРЕПАРАТ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ДИАРЕИ НОВОРОЖДЕННЫХ ПОРОСЯТ И СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ДИАРЕИ НОВОРОЖДЕННЫХ ПОРОСЯТ Российский патент 1997 года по МПК A61K31/00 

Изобретение относится к области ветеринарии, в частности к антимикробным препаратам, используемым для лечения диареи новорожденных поросят и к способам их применения.

Известен препарат для лечения диареи новорожденных поросят и способ его применения фуразолидон (Методические указания по профилактике и лечению желудочно-кишечных болезней у новорожденных поросят. ВНИИ незаразных болезней животных. Воронеж, 1988, с.18), который применяют в дозе 0,3-0,5 г, эту дозу делят на три части и дают 3 раза с интервалом 4-6 ч.

Недостатком данного препарата и способа его применения является то, что он задается каждому поросенку по нескольку раз в день, что достаточно сложно и трудоемко. Препарат токсичен для поросят-сосунов в дозах, незначительно превышающих лечебные.

Известны также препараты для лечения диареи новорожденных поросят - антибиотики ампициллин и тетрациклин и способы их применения (Методические указания по профилактике и лечению желудочно-кишечных болезней у новорожденных поросят. ВНИИ незаразных болезней животных. Воронеж, 1988, с.17). Наиболее близкими по технической сущности к заявленному изобретению являются препарат бифузол и способ его применения (Наставление по применению бифузола, Утв. 22.12.81. Ветеринарные препараты. Справочник/Под ред. А.Д.Третьякова. М. Агропромиздат, 1988, с.31-32).

Недостатком данных препаратов и способов их применения является то, что они вводятся непосредственно каждому поросенку, а это сложно и трудоемко, а также то, что данные препараты малоэффективны и не приводят к полному выздоровлению всех больных поросят. Курс лечения этими препаратами продолжителен и составляет 5-6 дней.

В основу изобретения положена задача создать такой антимикробный препарат для лечения диареи новорожденных поросят и способ его применения с такими антимикробными веществами, растворителями-проникателями и вспомогательным компонентом и с таким их соотношением, которые, действуя в комплексе, смогли бы после нанесения препарата на кожу молочной железы свиноматки проникать в молочную железу свиноматки и, выделяясь с молоком при сосании поросятами, оказывать эффективное антимикробное терапевтическое и профилактическое действие в желудочно-кишечном тракте новорожденных поросят-сосунов.

Поставленная задача решается тем, что антимикробный препарат для лечения диареи новорожденных поросят, содержащий антимикробное вещество, согласно изобретению, в качестве антимикробных веществ содержит соль 2-алкокси-6,9-диаминоакридина формулы

где R алкил С₁-C₃, Ас-ацил-лактат; семикарбазон-5-нитрофурфурола; эфир параоксибензойной кислоты формулы
n-HOC₆H₄COOR', (2)
где R' алкил С₁-C₄; в качестве растворителей-проникателей использованы диметилсульфоксид; производный ацетамида формулы
, (3)
где R" алкил C₁-C₃; изо-пропанол, олеиновая кислота и морфолин, а в качестве вспомогательного компонента вода, при следующем соотношении компонентов, г/л раствора:
Соль 2-алкокси-6,9-диаминоакридина 4-8
Семикарбазон-5-нитрофурола 4-8
Эфир параоксибензойной кислоты 2-4
Диметилсульфоксид 250-350
Производный ацетамида 250-350
Изо-пропанол 100-150
Олеиновая кислота 16-24
Морфолин 4-6
Вода Остальное
Целесообразно в качестве соли 2-алкокси-6,9-диаминоакридина использовать 2-этокси-6,9-диаминоакридина лактат, в качестве эфира параоксибензойной кислоты использовать пропиловый эфир параоксибензойной кислоты, а в качестве производного ацетамида диметилацетамид.

Способ лечения диареи новорожденных поросят, заключающийся во введении в пищеварительный тракт поросенка антимикробного препарата, согласно изобретению, для этих целей используют трансдермальный препарат антимикробного действия, который наносят на кожу молочной железы свиноматки на второй-третий день после опороса за 2-3 ч перед кормлением поросят в течение 24 дней по 2 раза в день, а поросятам он поступает с молоком матери.

Использование в составе антимикробного препарата антимикробных веществ соли 2-алкокси-6,9-диаминоакридина формулы (1), семикарбазона-5-нитрофурфурола и эфира параоксибензойной кислоты формулы (2), имеющих различное химическое строение и различный характер антимикробного действия, находящихся в наиболее активном растворенном (молекулярно-дисперсном) состоянии, приводит к высокой антимикробной активности препарата и расширяет спектр его действия на патогенную микрофлору животных. Входящие в состав препарата растворители-проникатели диметилсульфоксид, производный ацетамида формулы (3), изопропанол, олеиновая кислота и морфолин, которые имеют различное химическое строение и механизм проникновения через кожу, за счет чего они в комплексе обладают повышенной способностью проникать через кожу и транспортировать в организм антимикробные вещества. Входящий в состав трансдермального антимикробного препарата вспомогательный компонент -вода - смягчает действие растворителей на кожу путем снижения ее обезвоживания и повреждаемости.

Предложенный препарат прост в употреблении и не требует больших затрат труда от ветеринарных работников, так как его наносят на кожу молочной железы свиноматки за 2-3 ч перед кормлением поросят. Препарат через кожу молочной железы за это время проникает в молочную железу и поступает в пищеварительный тракт поросят с молоком матери во время кормления.

Для экспериментальной проверки заявляемого препарата и способа его применения были подготовлены компоненты в следующих соотношениях (табл. 1).

Ниже приводит характеристики компонентов, входящих в состав заявляемого антимикробного препарата.

А н т и м и к р о б н ы е в е щ е с т в а
1. 2-Этокси-6,9-диаминоакридина лактат выпускается в России согласно Р. 64.228.314, ГФ-10, ст. 27, желтый мелкокристаллический порошок горького вкуса, без запаха, растворим в 50 частях холодной воды и в 9 частях кипящей. Весьма сильное антимикробное средство, обладающее бактериостатическим действием на патогенную кишечную грамотрицательную микрофлору в концентрациях 25-50 мкг/мл; препарат в растворе не тормозит фагоцитоза, не раздражает кожу, слизистые оболочки и ткани организма, не токсичен для организма. Применяется в хирургии и для лечения желудочно-кишечных болезней молодняка животных.

2. Семикарбазон-5-нитрофурфурола (фурацилин) выпускается промышленностью в соответствии с требованиями ГФ-Х, ст. 295, мелкокристаллический порошок зеленовато-желтого цвета, горького вкуса, очень слабо (1:4200) растворимый в воде, относится к группе активных противомикробных средств, объединяемых под общим названием производные нитрофурана; устойчив к действию сульфаниламидов и антибиотиков, малотоксичен для животных и в обычных лечебных и профилактических дозах положительно влияет на организм животных, повышая его сопротивляемость к инфекции.

3. Пропиловый эфир пара-оксибензойной кислоты кристаллический порошок без запаха, малорастворимый в воде, хорошо растворимый в спиртах (этиловом, пропиловом, этилцеллозольве), обладает сильным антимикpобным действием в концентрации 0,05% и в 14 раз активней эталонного антимикробного вещества фенола; применяется как антимикробный консервант в парфюмерных и фармацевтических препаратах, а за рубежом как консервант в фруктовых и овощных консервах и соках.

Р а с т в о р и т е л и п р о н и к а т е л и
1. Диметилсульфоксид (ДМСО; Димексид) СH₃-SO-CH₃ жидкость при температуре выше 18^oС, а при меньшей кристаллической вещество, температура кипения 189^oС, d 1,1 (20^oС); смешивается с водой и всеми органическими растворителями; хороший растворитель для многих органических веществ; малотоксичен для животных и человека; кожу не раздражает, разрешен для применения в ветеринарии и медицине; проникает через кожу и транспортирует растворенные в нем препараты через кожу.

Диметилацетамид (CH₃)₂N-CO-CH₃; М=87, температура кипения 165-175^oС жидкость подвижная, бесцветная, со специфическим запахом; смешивается с водой, спиртом, эфиром, олеиновой кислотой; выпускается промышленностью, используется как растворитель, максимальная переносимая доза внутрь для мышей 0,5 г/кг, для крыс 1,0 г/кг, при непродолжительном нанесении на кожу животных (2-3 дня) не вызывает раздражения; способствует трансдермальному проведению растворенных в нем лекарственных веществ.

3. Изо-пропанол ближайший аналог этилового спирта, представляет собой прозрачную бесцветную подвижную жидкость, способную проникать через кожу, нетоксичен, не действует раздражающе на кожу.

4. Олеиновая кислота СН₁₈H₃₄O₂ жидкое вещество при температуре выше 14^oС, а при меньших температурах твердое вещество; существует в двух модификациях: α Т.пл. 13,4^oС; b Т.пл. 16^oC, d₄ ²⁰ 0,89; нетоксичное вещество, кожу не раздражает, способна проникать трансдермально и транспортировать через кожу лекарственные вещества.

5. Морфолин циклический аминоэфир C₄H₉NO₂; мол. масса 87, температура кипения 128-130^oС; прозрачная бесцветная жидкость, обладает свойствами простого эфира и вторичного амина; смешивается во всех соотношениях с водой, спиртом, эфиром, бензолом; выпускается промышленностью в качестве растворителя и химического реагента; в больших дозах действует на организм наркотически.

В с п о м о г а т е л ь н ы й к о м п о н е н т
Вода оксид водорода (Н₂O); простейшее, устойчивое в обычных условиях химическое соединение водорода с кислородом; бесцветная жидкость без запаха и вкуса; температура кипения 100^oС.

Антимикробный препарат получают и используют следующим образом.

Пример 1. Для получения 1,0 л антимикробного препарата смешивают обычным способом следующие жидкие компоненты, мл:
Диметилсульфоксид 250
Диметилацетамид 250
Изо-пропиловый спирт 100
Олеиновая кислота 16
Морфолин 4
Вода 370
Полученную смесь нагревают до 60^oС и растворяют в ней антимикробные вещества в следующих количествах, г:
2-Этокси-6,9-диаминоакридина лактат 4
Семикарбазон-5-нитрофурфурола 4
Пропиловый эфир параоксибензойной кислоты 2
В примере 1 соотношение компонентов соответствует нижнему пределу от номинала. Полученный препарат представляет собой однородный прозрачный раствор желтого цвета со специфическим запахом. На 2-3-й день после опороса полученный препарат наносили плоской волосяной кистью на кожу вымени свиноматки в дозе 20 мл за 2-3 ч перед кормлением поросят по 2 раза в день в течение двух дней, а поросятам он поступал с молоком матери во время кормления.

Пример 2. Способ получения препарата и его применение аналогичны примеру 1 при следующем соотношении компонентов, мл:
Диметилсульфоксид 300
Диметилацетамид 300
Изо-пропиловый спирт 125
Олеиновая кислота 20
Морфолин 5
Вода 235 г
2-Этокси-6,9-диаминоакридина лактат 6 г
Семикарбазон-5-нитрофурфурола 6 г
Пропиловый эфир параоксибензойной кислоты 3 г
В примере 2 соотношение компонентов соответствует номинальным значениям. Полученный препарат представляет собой однородный прозрачный раствор желтого цвета со специфическим запахом.

Пример 3. Способ получения препарата и его применение аналогичны примерам 1 и 2 при следующем соотношении компонентов, мл:
Диметилсульфоксид 350
Диметилацетамид 350
Изо-пропиловый спирт 150
Олеиновая кислота 24
Морфолин 6
Вода 100 г
2-Этокси-6,9-диаминоакридина лактат 8 г
Семикарбазон-5-нитрофурфурола 8 г
Пропиловый эфир параоксибензойной кислоты 4 г
В примере 3 соотношение компонентов соответствует верхнему пределу от номинала. Полученный препарат представляет собой однородный прозрачный раствор желтого цвета со специфическим запахом.

Антимикробное действие препарата изучали в эксперименте in vitro на культурах кишечных микробов Escherichia и Salmond la typhimurium, выделенных у больных диареей новорожденных поросят. Бактериостатическое действие препарата определяли методом его серийных разведений в жидких питательных средах и оценивали по минимальной задерживающей рост микробов концентрации (МЗК) целого препарата и его действующих антимикробных веществ. Из препарата по примеру 2 готовили двукратные серийные разведения в воде, которые вносили в жидкую питательную среду с определенной культурой микробов. Установлено, что при номинальных значениях содержащихся в препарате антимикробных веществ рост кишечной палочки и сальмонеллы подавляется в МЗК 7-16 мкг/мл. Это свидетельствует о высокой бактериостатической активности препарата его МЗК в 1000-2000 раз меньше суммарного содержания антимикробных веществ в препарате, что подтверждает высокую лечебную и профилактическую эффективность антимикробного препарата.

Местное действие антимикробного препарата на кожу животных испытано в экспериментах на белых мышах, кроликах и свиньях.

Препараты по примерам 1-3 испытали каждый на 10 белых мышах-самцах живой массой 20±1,0 г. Разовую дозу препарата 20 мл/кг массы животных (0,2 мл на мышь) наносили пипеткой на кожно-волосяной покров 2 раза в день три дня подряд. Токсических явлений не было, все животные остались живы, аппетит и подвижность сохранялись. На коже не было признаков воспаления зуда, расчесов, болезненности, облысения, отечности и утолщений кожной складки.

Аналогичное наблюдение проведено на девяти кроликах, каждый препарат испытан на трех животных. Препараты наносили на участок кожно-волосяного покрова площадью 4х5 см в дозе 1,0 мл два раза в день три дня подряд. Беспокойства животных не было, не отмечено признаков воспаления кожи.

Аналогичные наблюдения проведены на трех свиноматках на 2-3-й день после опороса. Препараты по примерам 1-3 испытали каждый на одной свиноматке: наносили плоской волосяной кистью на кожу живота на правый и левый ряды сосков и пакетов молочных желез по 2 раза в день три дня подряд. Раздражение кожи и беспокойства животных не было.

Фармакологическое действие антимикробного препарата изучено в лабораторных экспериментах, а также на свиноматках подсосных и их поросятах-сосунах.

Методом тонкослойной хроматографии на стеклянных пластинах с фиксированными сорбентами установлена высокая подвижность (Rр) антимикробных веществ в комплексном составе растворителя, содержащегося в препарате. Это имеет положительное значение для трансдермального проникновения антимикробных веществ препарата.

Методом диализа препарата через полупроницаемую пленку в дистиллированную воду установлен переход антимикробных веществ препарата в диализат совместно с составом-растворителем, что также имеет положительное значение для трансдермального продвижения антимикробных веществ препарата.

Трансдермальное прохождение антримикробных веществ препарата и проникновение их в пакеты молочных желез свиноматок изучены в эксперименте на двух подсосных свиньях на второй день после опороса. Препарат (при номинальных значениях компонентов) наносили плоской волосяной кистью на кожу вымени свиноматки в дозе 20 мл. Пробы молока брали из сосков по 2-3 мл с помощью отсасывателя грудного молока, применяемого в медицине. Пробы молока брали 4 раза с интервалами через 1 ч. Исследование на содержание в них антимикробных веществ проводили на жидкостном хроматографе "Миллихром". Через 2 ч после нанесения препарата на кожу молочной железы антимикробные вещества найдены в бактериостатической концентрации 18-29 мкг/мл в молоке из всех пакетов желез. Через 3 ч после нанесения препарата на кожу вымени свиноматки антимикробные вещества содержатся в молоке на терапевтическом (бактериостатическом) уровне, а через 4 ч количество их снижается до 6-11 мкг/мл.

Проведенные исследования показали, что антимикробные вещества препарата проникают через кожу вымени свиноматки, попадают в молочные железы и выделяются в течение 2-3 ч.

Испытание лечебного действия известного и заявляемого препарата по примерам 1-3 было проведено на 24 свиноматках вместе с их приплодом, взятых в опыт на 2-й день после опороса. Свиноматок разделяли на четыре группы по шесть голов, из которых три были подопытные и одна контрольная.

У свиноматок первой группы родилось 57 поросят, из которых 28 заболело диареей на 2-3-й день. Для их лечения свиноматкам наносили на кожу вымени волосяной кистью препарат по примеру 1 в дозе 20 мл по 2 раза в день два дня подряд.

У свиноматок второй группы родилось 56 поросят, из которых 26 заболело диареей на 2-3-й день. Для лечения поросят свиноматкам наносили на кожу вымени препарат по примеру 2 тем же способом, как и свиноматкам первой группы.

У свиноматок третьей группы родилось 56 поросят, из которых 24 заболело диареей на 2-3-й день. Для лечения поросят свиноматкам наносили на кожу вымени препарат по примеру 3 тем же способом, как первой и второй группам свиноматок.

У свиноматок четвертой группы контрольной родилось 59 поросят, из которых 23 заболело диареей на 2-3-й день. Больных поросят лечили индивидуально согласно "Методическим указаниям по профилактике и лечению желудочно-кишечных болезней у новорожденных поросят" (Воронеж, ВНИИ незаразных болезней животных, 1988), утвержденным Главным управлением ветеринарии Госагропрома СССР 23.12.87 (прототип). С лечебной целью применяли больным антибиотики: ампициллин в дозах 80 мг поросенку 2-3 раза в день в течение 3-4 дней; тетрациклин внутримышечно в дозе 20 мг/кг массы животного по 2 раза в день в течение 3-4 дней.

Результаты испытаний лечебного действия известных и заявляемого препаратов представлены в табл. 2.

Из данных табл. 2 видно, что заявляемый препарат в интервале испытанных доз дал высокий лечебный эффект при диареи поросят. Лишь один поросенок из первой группы погиб от диареи на 4-й день после рождения. У него установлен гастроэнтерит, а при бактериологическом исследовании материала из тонкого кишечника выделен энтеропатогенный штамм кишечной палочки.

У выздоровевших животных рецидивов заболевания диареей не было и они нормально развивались. Препарат не вызывал раздражения кожи.

Препарат с соотношением компонентов ниже нижнего предела показал низкий лечебный эффект ввиду недостаточного количества антимикробных веществ.

Препарат с соотношением компонентов выше верхнего предела не дает дополнительного лечебного эффекта, при этом происходит перерасход компонентов, что снижает экономичность препарата.

Известный препарат недостаточно эффективен и не приводит к полному выздоровлению всех больных поросят. Курс лечения этим препаратом более продолжителен. Через 3-4 дня после начала лечения выздоровело 17 поросят (73,9% ) и погибло от диареи 26,1% При вскрытии погибших установлен гастроэнтерит, а при бактериологическом исследовании дисбактериоз в тонком отделе кишечника.

Испытание профилактического действия препарата проводили в свиноводческом хозяйстве на 40 свиноматках вместе с приплодом. Использовали всех свиноматок первого опороса, у которых, как правило, рождаются слабые поросята, подверженные заболеванию диареей в первые дни жизни. Свиноматок разделили на четыре группы по 10 голов, из которых три подопытных и одна контрольная.

У свиноматок первой группы родилось 94 поросенка. Для профилактики диареи у поросят их свиноматкам наносили на кожу вымени плоской волосяной кистью препарат по примеру 1 в дозе 20 мл два раза на второй день после опороса и два раза на третий.

У свиноматок второй группы родился 91 поросенок. Для профилактики диареи у поросят свиноматкам наносили на кожу вымени препарат по примеру 2 тем же способом, как и первой группе.

У свиноматок третьей группы родилось 87 поросят. Для профилактики диареи у поросят их свиноматкам наносили на кожу вымени препарат по примеру 3 тем же способом, как свиноматкам первой и второй групп.

У свиноматок четвертой группы (контрольной) родилось 93 поросенка. Свиноматкам не применяли для профилактики диареи у поросят заявленный препарат.

Результаты испытания профилактического действия заявляемого препарата при диареи новорожденных поросят представлены в табл. 3.

Из табл. 3 видно, что препараты по примерам 1-3 показали высокий профилактически эффект в отношении диареи у поросят в первые дни после их рождения, заболеваемость снизилась в 4-5 раз, а падеж поросят полностью исключен по сравнению с поросятами контрольной группы, из которой заболело 55,9% и пало 16,1%
Таким образом, предложенный антимикробный препарат для лечения диареи новорожденных поросят и способ его применения при соотношении компонентов, находящихся в диапазоне предельных значений, включая предельные значения, состоит из таких антимикробных веществ, растворителей-проникателей и вспомогательного компонента, которые, действуя в комплексе после нанесения препарата на кожу молочной железы, могут проникать в молочную железу и выделяться с молоком при сосании поросятами, оказывая эффективное антимикробное терапевтическое и профилактическое действие в желудочно-кишечном тракте новорожденных поросят-сосунов.

Изобретение относится к ветеринарии, в частности к антимикробным препаратам, используемым для лечения диареи новорожденных поросят, и способам их применения.

Антимикробный препарат для лечения диареи новорожденных поросят включает антимикробное вещество.

Новым является то, что антимикробный препарат трансдермального действия в качестве антимикробных веществ содержит соль 2-алкокси-6,9-диаминоакридина формулы (1), где R -алкил С₁-C₃, Ас - ацил-лактат; семикарбазон-5-нитрофурфурола; эфир параоксибензойной кислоты формулы (2), где R -алкил C₁-C₄; в качестве растворителей-проникателей использованы диметилсульфоксид, производный ацетамида формулы (3), где R - алкил C₁-C₃, изо-пропанол, олеиновая кислота и морфин, а в качестве вспомогательного компонента - вода, при следующем соотношении компонентов, г/л раствора:
Соль 2-алкокси-6,9-диаминоакридина - 4-8
Семикарбазон-5-нитрофурфурола - 4-8
Эфир параоксибензойной кислоты - 2-4
Диметилсульфоксид - 250-350
Производный ацетамида - 250-350
Изо-пропанол - 100-150
Олеиновая кислота - 16-24
Морфолин - 4-6
Вода - Остальное
В качестве соли 2-алкокси-6,9-диминоактидина использован 2-этокси-6,9-диаминоакридина лактат.

В качестве эфира параоксибензойной кислоты использован пропиловый эфир параоксибензойной кислоты.

В качестве производного ацетамида использован диметилацетамид.

Способ лечения диареи новорожденных поросят заключается во введении в пищеварительный тракт поросенка антимикробного препарата.

Новым является то, что используют трансдермальный препарат антимикробного действия, который наносят на кожу молочной железы свиноматки на второй-третий день после опороса за 2-3 ч перед кормлением поросят в течение двух дней по 2 раза в день, а поросятам он поступает с молоком матери. 2 с.п. ф-лы, 3 табл.

1. Препарат для лечения диареи новорожденных поросят, включающий вещество нитрофуранового ряда, отличающийся тем, что в качестве вещества нитрофуранового ряда используют семикарбазон-5-нитрофурфурола, причем препарат дополнительно содержит 2-этоксидиаминоакридина лактат, пропиловый эфир параоксибензойной кислоты, диметилсульфоксид, диметилацетамид, изо-пропанол, олеиновую кислоту, морфолин и воду при следующем соотношении компонентов, г/л раствора:
2-Этокси-6,9-диаминоакридина лактат 4 8
Семикарбазан-5-нитрофурфурола 4 8
Пропиловый эфир параоксибензойной кислоты 2 4
Диметилсульфоксид 250 350
Диметилацетамид 250 350
Изопропанол 100 150
Олеиновая кислота 16 24
Морфолин 4 6
Вода Остальное
2. Способ лечения диареи новорожденных поросят, включающий введение в пищеварительный тракт поросенка препарата, включающего вещество нитрофуранового ряда, отличающийся тем, что в качестве вещества нитрофуранового ряда используют семикарбазон-5-нитрофурфурола, причем препарат дополнительно содержит 2-этоксидиаминоакридина лактат, пропиловый эфир параоксибензойной кислоты, диметилсульфоксид, изопропанол, олеиновую кислоту, морфолин и воду при следующем соотношении компонентов, г/л раствора:
2-Этокси-6-9-диаминоакридина лактат 4 8
Семикарбазон-5-нитрофурфурола 4 8
Пропиловый эфир параксибензойной кислоты 2 4
Диметилсульфоксид 250 350
Диметилацетамид 250 350
Изопропанол 100 150
Олеиновая кислота 16 24
Морфолин 4 6
Вода Остальное
причем введение осуществляют с молоком матери путем нанесения препарата на кожу молочной железы свиноматки на второй-третий день после опороса за 2
3 ч перед кормлением поросят в течение 2-х дней по 2 раза в день.