СПОСОБ ОЦЕНКИ ЭФФЕКТИВНОСТИ ЛАЗЕРОТЕРАПИИ Российский патент 1997 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к области медицины, в частности к области гастроэнтерологической патологии, и может быть использовано для оценки эффективности лечения заболеваний желудочно-кишечного тракта с язвенно-эррозивными повреждениями и определения длительности курса лазеротерапии, преимущественно у детей, в тех случаях, когда клиническая симптоматика улучшается до окончания полного курса лазеротерапии.

Большая часть известных способов определения длительности лазеротерапии основана на оценке клинической динамики заболеваний на фоне лечения.

Недостатком их является то, что они ориентируются на показатели клинической симптоматики не всегда объективного характера и не всегда несут полную информацию о состоянии больного и патологического процесса в целом. Отсюда большая степень вероятности как неоправданного удлинения курса лазеротерапии, так и возможность недостаточной продолжительности лечебного курса, уменьшающей конечную эффективность.

Известны способы оценки эффективности лазеротерапии, основанные на контроле параметров до и после воздействия с последующей оценкой результатов исследования состояния пациента. В них с целью снижения травматичности проводят контроль проб крови in vitro в динамике, наблюдают картину поведения разных показателей крови, дающих более полную и объективную картину изменения состояния больного: СОЭ, сахара, сиаловых кислот, гамма-глобулинов, гемоглобина, лимфоцитов, общего белка и т.д. (патент СССР N 1806377, МКИ:G 01 N 33/48, приор. 22.10.90).

В другом изобретении способе определения эффективности микроволновой терапии при гастродуоденальной патологии, в пробах крови определяют уровни пирувата, лактата и малата до и после воздействия с последующим расчетом показателей и при сохранении динамики полученных соотношений после курса терапии определяют ее эффективность (авт.св. СССР N 1725116, МКИ: G 01 N 33/48). Суть способа заключается в том, что воздействие осуществляют на биологически активные точки с последующей оценкой результатов исследования состояния пациента по оптической плотности пробы.

Недостатком данного способа является то, что оценка состояния больного и его реакции на применение физиотерапевтической процедуры проводится по уровню метаболитов, что является недостаточно точным способом для диагностики современного уровня развития медицины. Более точным является исследование состояния рецепторного аппарата клетки.

Система оценки должна быть основана на наборе адекватных показателей, позволяющих объективно судить о качестве проводимого лечения. К настоящему времени таких критериев разработано недостаточно.

Наиболее близким к предлагаемому является способ оценки влияния лазерного излучения на гемолитическую устойчивость эритроцитов, описанный Л. И. Сергеевой и С. В. Ереминой в статье "Гемолитическая устойчивость эритроцитов животных при действии лазерного облучения в сборнике "Биологическое действие лазерного излучения", Куйбышев, 1984 г. заключающийся в определении кинетической кривой изменения оптической плотности опытного и контрольного образцов взвеси эритроцитов после воздействия соляной кислотой до и после лазерного облучения.

Однако данный способ приемлем только при исследовании больного при высокой активности воспалительного процесса и не позволяет определить индивидуальную чувствительность больного к лазеротерапии.

Целью изобретения является повышение точности в определении эффективности и длительности лазеротерапии.

Сущность изобретения заключается в том, что в способе оценки эффективности лазеротерапии, включающем забор крови до и после лазеротерапии, воздействие на данные и контрольные пробы крови on vitro гемолитиком и определение изменения оптической плотности до и после лечения, по которому судят о результате лазеротерапии, до воздействия гемолитиком на пробы крови проводят инкубацию их с лектинами, в дозах предпороговой концентрации, не вызывающей агглютинации эритроцитов, при увеличении количества повышенностойких эритроцитов после лазеротерапии у больных с исходно сниженным их количеством в сравнении с контролем оценивают лечение как эффективное; при увеличении количества пониженностойких эритроцитов у больных после лазеротерапии с исходно сниженным их количеством показано продление курса лазеротерапии; при уменьшении количества повышенностойких эритроцитов после лазеротерапии с исходно увеличенным их количеством в сравнении с контролем - лазеротерапия не эффективна.

Кроме того, отличительной особенностью является группа лектинов, при использовании которых наблюдается наибольшее повышение точности в определении эффективности лечения. В качестве таких лектинов используют агглютинин завязей пшеницы, лектин арахиса, бобовника анагиролистного и бузины черной и др.

Еще одной особенностью заявляемого способа является то, что в случае использования лектина бобовника анагиролистного до инкубации пробы крови больного с лектином у него определяют индивидуальную предпороговую концентрацию лектина, не вызывающую агглютинацию эритроцитов.

Способ заключается в следующем.

Проводят забор крови в количестве 1-2 мл и добавляют в 10-15 мл свежеприготовленного раствора 0,85% NaCl. Предварительно определяют индивидуальную концентрацию лектина, обладающего гемагглютинирующими свойствами по отношению к крови больного и здорового донора методом реакции гемагглютинации. Приготавливают набор двухкратных разведений лектинов в физиологическом растворе (1: 2. 1:4, 1:8 и т.д.) всего 15 разведений. Затем вносят по несколько капель взвеси отмытых эритроцитов. Жидкость слегка встряхивают для равномерного распределения эритроцитов. Взвесь оставляют на 60-120 минут, учет реакции гемагглютинации проводят по форме осадка (гемаггллютинация произошла, если образовалась сплошная гомогенная розовая пленка, которая при встряхивании распадается на хлопья). При отсутствии реакции эритроциты, оседая, образуют в центре лунки ярко-красное пятно. Затем проводят определение гемолитической стойкости эритроцитов по методу кислотных эритрограмм, как в опытной пробе крови больного, так и контрольной пробе здорового донора. Пробу крови (0,2 мл) разводят в 2 мл физиологического раствора (0,85% NaCl дистиллированной воде), затем помещают в термостат. Включают нагреватель термостата (на 700 вт) и фотоколориметр. Приборы подогревают 15-20 минут. Температура в баке термостата и в рабочей кювете перед проведением анализа должна быть 24 градуса С. На фотоэлектроколориметре (ФЭК-М) стрелку гальванометра устанавливают на значение "О", устанавливают красный светофильтр. В правое плечо колориметра помещают компенсирующую кювету с CuSO₄. Шунт чувствительности гальванометра ставят в положение "1". Левый отсчетный барабан устанавливают на нулевую отметку красной шкалы. После открытия шторки осветителя показатели гальванометра приводят к значению "0". Окончательную настройку производят после переключения шунта чувствительности в положение "2". Приведение показателей гальванометра к "0" проверяется после каждого анализа. Взвесь эритроцитов доводят до стандартной концентрации: шунт чувствительности гальванометра устанавливают в положение "1", левую шкалу барабана выводят до показания "0,700". Из пробирки с кровью, находящейся в термостате, набирают кровь и вводят ее, помешивая, в рабочую кювету с физиологическим раствором (разведение крови в рабочей кювете физраствором проводится до получения значения "0" по шкале гальванометра. Шунт гальванометра переводят в положение "2" и концентрацию эритроцитов доводят до стандартной "0,700", оптической плотности по шкале барабана. При отключенном гальванометре из рабочей кюветы отбирают 2 мл взвеси, остальной раствор удаляют, а взятые 2 мл вновь вводят в рабочую кювету. Включая отсчет времени, одновременно вводят 2 мл 0,004 N соляной кислоты в рабочую кювету, при этом шкалу барабана переводят на деление "0,450" (оптическая плотность НСl соответствует данному значению). Стрелку гальванометра приводят к "0" при вращении отсчетного барабана и через 30 секунд снимают первый отсчет. В дальнейшем при постоянном снижении оптической плотности, выводят стрелку из нулевого положения, удерживая стрелку гальванометра на значении "0". Через каждые 30 секунд снимают показания оптической шкалы левого барабана. Запись проводят до конца гемолиза. При прекращении движения стрелки гальванометра фиксируют время окончания гемолиза (отсутствие отклонения стрелки в течении минуты). Показания шкалы барабана при этом будет соответствовать 0,020-0,060. Шунт чувствительности гальванометра переводят в положение "0", жидкость отсасывают, кювету промывают. Следующим этапом работы проводят инкубирование эритроцитов больного с лектинами: к одному мл раствора крови добавляют один мл лектина в физиологическом растворе (лектин зародышей пшеницы в концентрации 8 мкг/мл, лектина бузины черной 1 мкг/мл, лектина бобовника анагиролистного - 31 мкг/мл, лектина арахиса 125 кг/мл и т.д.). Инкубацию проводят в течении 30 минут. Затем эти эритроциты используют для получения эритрограмм и изучения действия лектинов на гемолитическую стойкость эритроцитов на основании изменения распределения эритроцитов по стойкости.

Для определения эффективности лазеротерапии достаточно ограничиться инкбированием эритроцитарной взвеси с одним из названных лектинов.

Параллельно методом кислотных эритрограмм проводят анализ эритроцитарной взвеси здорового донора группы до инкубации с лектином и после инкубации.

Анализ данного исследования проводят на основании сравнения показателей оптической плотности эритроцитарной взвеси, полученной от больного с показателями оптической плотности эритроцитарной взвеси здорового донора после воздействия на пробы гемолитика и после инкубации проб с лектинами.

Способ поясняется следующими примерами.

Пример 1.

Больной Н. 14 лет
Клинический диагноз: Хронический гастродуоденит с повышенной кислотообразующей функцией. Фаза обострения.

Особенности клинической картины заболевания: отмечается усиление болей в эпигастральной области натощак и в ночное время. После проведения 10-дневного курса лазеротерапии состояние улучшилось, живот в области эпигастрия безболезнен. Больному проведено исследование крови методом кислотных эритрограмм до и после лазеротерапии без лектинов и после инкубации проб крови поочередно с лектинами бобовника анагиролистного, бузины черной, арахиса и зародышей пшеницы.

Результаты исследований представлены в таблицах 1, 2, где показано изменение оптической плотности эритроцитарной взвеси больного под воздействием гемолитика с течением времени. В нижней части таблицы приведено процентное распределение эритроцитов по стойкости. Количество пониженностойких эритроцитов здесь и в последующих таблицах обозначается Пнс, количество среднестойких эритроцитов Сс, количество повышенностойких эритроцитов Пвс.

Распределение эритроцитов больного по стойкости к гемолитику до лазеротерапии приведено в табл.1.

Распределение эритроцитов больного по стойкости к гемолитику после лазеротерапии приведено в табл.2.

В результате проведения лазеротерапии увеличивается количество повышенностойких эритроцитов у больных с исходно сниженными их концентрациями по сравнению с контролем. Достижение этого эффекта можно считать показанием для прекращения курса лазеротерапии (первая группа больных в табл. 7). Следовательно, данному ребенку показана лазеротерапия, длительностью в 10 процедур.

Пример 2.

Больная С. 11 лет
Клинический диагноз: Хронический антробульбит, вторая степень активности, с повышенной кислотообразующей функцией. Фаза обострения. Особенности клинической картины заболевания: отмечается усиление болей в эпигастральной области перед приемом пищи. После проведения 10-дневного курса лазеротерапии состояние улучшилось, при пальпации сохраняется болезненность в области эпигастрия. Больному проведено исследование крови методом кислотных эритрограмм до и после лазеротерапии без лектинов и после инкубации пробы с лектинами бобовника анагиролистного и завязей пшеницы. Распределение эритроцитов больного по стойкости к гемолитику до лазеротерапии, приведены в табл. 3.

Распределение эритроцитов больного по стойкости к гемолитику после лазеротерапии, приведены в табл. 4.

Увеличение количества пониженностойких эритроцитов у больных с исходно сниженным их количеством соответствует первоначальному воздействию лазерного излучения на мембрану эритроцитов с пониженной резистентностью и недостаточностью курса лазеротерапии длительностью в 10 процедур для таких больных (вторая группа больных в табл. 7). По данным, полученным в результате исследования, рекомендовано данному больному продолжение курса лазеротерапии (до 15 процедур) с контрольным проведением исследования методом кислотных эритрограмм. После проведения полного курса лазеротерапии клиническая оценка: значительное улучшение состояния.

Пример 3
Больная П. 13 лет Клинический диагноз: Хронический антробульбит, с повышенной кислотообразующей функцией желудка. Фаза обострения. Хронический пиелонефрит. Имеется наследственная отягощенность по язвенной болезни желудка. Особенности клинической картины заболевания: отмечается усиление болей эпигастральной области, интенсивные, усиливающиеся перед приемом пищи, тошнота, отрыжка кислым. После проведения 10-дневного курса лазеротерапии состояние не изменилось, живот в области эпигастрия болезнен. Больному проведено исследование крови методом кислотных эритрограмм до и после лазеротерапии без лектинов и после инкубации пробы с лектинами бобовника анагиролистного, бузины черной, арахиса и завязей пшеницы.

Распределение эритроцитов больного по стойкости к гемолитику до лазеротерапии приведены в табл. 5.

Распределение эритроцитов больного по стойкости к гемолитику после лазеротерапии, приведены в табл. 6.

Уменьшение количества повышенностойких эритроцитов после лазеротерапии с исходно увеличенным их количеством до лечения в сравнении с нормой - лазеротерапия не эффективна.

Выводы:
По данному способу были исследованы 26 больных с гастродуоденальной патологией. У этих больных проведены исследования крови методом кислотных эритрограмм до лечения, после 3 процедуры (у 6 чел.) и после 10 процедуры лазеротерапии.

В результате проведенных исследований были выделены 2 группы больных, у которых по-разному изменяется кинетика гемолитического процесса при проведении лазеротерапии (табл. 7): первая группа больных детей с исходным понижением повышенностойких эритроцитов (18 человек).

вторая группа больных детей с исходным повышением количества повышенностойких эритроцитов (8 детей).

После проведения 10 процедур у больных первой группы наблюдаются нормализация основных показателей электрограммы: уменьшается количество Пнс эритроцитов, приходит к контрольным данным количество Со и количество Пвс эритроцитов. При контрольном обследовании отмечается стабилизация общего состояния больного, снижение воспалительных изменений со стороны слизистой оболочки желудка и двенадцатиперстной кишки по данным эндоскопии. Таким образом, применение лазеротерапии в лечении воспалительных заболеваний желудка и двенадцатиперстной кишки у детей первой группы способствует улучшению состояния больных и более эффективному проведению противорецидивного лечения.

У второй группы больных в результате лечения эритрограммы сдвигается влево, в сторону Пнс эритроцитов, количество которых становится выше нормы за счет снижения количества Пвс эритроцитов. У детей данной группы отмечены способности течения заболевания характеризующееся упорным течением болевого синдрома, частыми обострениями заболевания.

Эритрограмма больных второй группы до лечения смещена вправо. Такая форма исходной эритрограммы характерна для больных, имеющих риск развития язвенной болезни. У всех больных данной группы имелись сочетанные заболевания моче-половой сферы и верхних дыхательных путей. Учитывая полученные данные необходимо увеличить курс лазеротерапии в представляемой группе детей (до 14-15 процедур) Критерием окончания курса являются достижение концентраций Пвс до показателей Пвс эритрограммы здорового донора.

Полученные результаты сведены в таблицах:
Изменение основных показателей эритрограммы при проведении лазеротерапии у больных с хроническими гастродуоденита приведены в табл.7.

Для повышения чувствительности способа проводилось изучение изменений в стойкости мембраны эритроцита в результате проведения лазеротерапии с использованием лектинов с различной углеводной специфичностью (табл. 8, 9) отмечается увеличение концентрации повышенностойких эритроцитов при инкубации эритроцитов с лектинами зародышей пшеницы, бузины черной, бобовника анагиролистного после проведения лазеротерапии (по сравнению с концентрацией повышенностойких эритроцитов при инкубации с лектинами до лазеротерапии). С использованием лектинов до и после лазеротерапии была исследована кровь больных первой группы: с лектином зародышей пшеницы 12 человек; с лектином арахиса у 8 человек; с лектином бобовника анагиролистного у 8 человек; с лектином бузины черной у 8 человек.

Изменение основных показателей эритрограммы при инкубировании эритроцитов больного с лектинами до лечения, приведены в табл. 8.

Изменение основных показателей эритрограммы при инкубировании эритроцитов больного с лектинами после лечения, приведены в табл. 9.

Изобретение относится к области медицины, в частности к области гастроэнтерологической патологии, и может быть использовано для оценки эффективности лечения заболеваний желудочно-кишечного тракта с язвенно-эррозивными повреждениями и определения длительности курса лазеротерапии, преимущественно у детей, в тех случаях, когда клиническая симптоматика улучшается до окончания полного курса лазеротерапии. Целью изобретения является повышение точности в определении эффективности и длительности лазеротерапии. Сущность изобретения заключается в том, что в способе оценки эффективности лазеротерапии, включающем забор крови до и после лазеротерапии, воздействие на данные и контрольные пробы крови in vitro гемолитиком и определение изменения оптической плотности до и после лечения, по которому судят о результате лазеротерапии, до воздействия гемолитиком на пробы крови проводят инкубацию их с лектинами, в дозах предпороговой концентрации, не вызывающей агглютинации эритроцитов, и судят о результатах по динамике распределения эритроцитов по стойкости следующим образом: при увеличении количества повышенностойких эритроцитов после лазеротерапии у больных с исходно сниженным их количеством в сравнении с контролем - лечение эффективно; при увеличении количества пониженностойких эритроцитов у больных после лазеротерапии с исходно сниженным их количеством - показано продление курса лазеротерапии; при уменьшении количества повышенностойких эритроцитов после лазеротерапии с исходно увеличенным их количеством в сравнении с контролем-лазеротерапия не эффективна. Кроме того, в качестве лектинов используются агглютинин завязей пшеницы, лектин арахиса, бобовника анагиролистного, бузины черной и т.д. 2 з.п. ф-лы, 9 табл.

1. Способ оценки эффективности лазеротерапии, включающий забор крови до и после лазеротерапии, воздействие на данные и контрольные пробы крови in vitro гемолитиком и определение изменения оптической плотности до и после лечения, по которому судят о результате лазеротерапии, отличающийся тем, что до воздействия гемолитиком на пробы крови проводят инкубацию их с лектинами в дозах предпороговой концентрации, не вызывающей агглютинацию эритроцитов, и при увеличении количества повышенно-стойких эритроцитов после лазеротерапии у больных с исходно сниженным их количеством в сравнении с контролем оценивают лечение как эффективное, при увеличении количества пониженно-стойких эритроцитов у больных после лазеротерапии с исходно сниженным их количеством показано продление курса лазеротерапии, при уменьшении количества повышенно-стойких эритроцитов после лазеротерапии с исходно увеличенным их количеством в сравнении с контролем лазеротерапия не эффективна. 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве лектинов используют агглютинин зародышей пшеницы, лектин арахиса, бобовника анагиролистного и бузины черной. 3. Способ по п.1, отличающийся тем, что до инкубации пробы крови больного с лектином бобовника анагиролистного у него определяют индивидуальную предпороговую концентрацию лектина, не вызывающую агглютинацию эритроцитов.