ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКАЯ ПИЩЕВАЯ КОМПОЗИЦИЯ "ЖЕНСОЛАР", ОБЛАДАЮЩАЯ АЛКОПРОТЕКТОРНЫМ ДЕЙСТВИЕМ (ВАРИАНТЫ) Российский патент 1997 года по МПК A61K35/78 

Изобретение относится к экспериментальной медицине и касается лечебно-профилактических пищевых композиций, используемых для защиты центральной нервной системы (ЦНС) от токсического действия этанола. Предлагаемые композиции могут быть использованы в медицине и пищевой промышленности.

Для лечения алкоголизма в клинической практике используются средства аверсивной терапии (тетурам, апоморфин, эметин), психотропные средства (аминазин, трифтазин, левомепромазин, карбидин, галоперидол, хлорпротиксен, пирацитам и др.). Однако указанный комплекс противоалкогольной терапии направлен прежде всего на лечение клинически выраженных форм алкоголизма или носит характер противорецидивной терапии.

Что касается методов защиты от токсичных доз этанола организма в целом и ЦНС, в частности, с помощью лекарственных веществ, то последние классифицировались на две категории: 1) методы удаления этанола и его метаболита ацетальдегида из крови (D-пенициламин и другие вещества); 2) методы ускорения метаболизма этанола (клофибрат и другие вещества) [1]
В последнее время стали появляться сообщения о том, что отдельные экстракты из лекарственных растений способны защищать ЦНС от токсического действия этанола [2,3]
Прототипом заявляемой композиции может служить применение настоя крапивы в качестве антиалкогольного средства [4] Однако в настое крапивы отсутствуют вещества, способные, с одной стороны, вмешиваться в биохимические механизмы формирования нарушений, вызываемых токсическими дозами алкоголя, а с другой
ингибировать или пролонгировать всасывание избыточных доз алкоголя в кровь.

Недостатком известных средств защиты от токсических доз этанола является их незначительная эффективность. Ни один из существующих лекарственных препаратов нельзя рекомендовать сегодня в качестве полноценного фармакологического средства для успешного проведения лечебно-профилактической терапии при хроническом алкоголизме и ликвидации последствий острой алкогольной интоксикации. Поэтому в настоящее время остается актуальным изыскание новых лекарственных средств для профилактики и лечения людей, злоупотребляющих алкоголем.

Задача изобретения расширение арсенала лечебно-профилактических пищевых композиций, предотвращающих острую алкогольную интоксикацию, повышающих эффективность защиты ЦНС и организма в целом от воздействия избыточных доз этанола.

Задача решена тем, что лечебно-профилактическая пищевая композиция "Женсолар", обладающая алкопротекторным действием на основе лекарственных растений, содержит суммарный гликозидный экстракт (СГЭ) корня женьшеня и этанольные экстракты корня аралии и корня солодки при следующем соотношении компонентов, мас.

Суммарный гликозидный экстракт корня женьшеня 45-55
Экстракт из корня аралии 20-30
Экстракт из корня солодки 20-30
Вариант лечебно-профилактической пищевой композиции "Женсолар" содержит суммарный гликозидный экстракт (СГЭ) культуры тканей женьшеня и этанольные экстракты корня аралии и корня солодки при следующем соотношении компонентов, мас.

Суммарный гликозидный экстракт культуры тканей женьшеня 55-65
Экстракт из корня аралии 15-25
Экстракт из корня солодки 15-25
Композиционный состав обладает выраженной способностью восстанавливать нарушения ЦНС в период и после воздействия алкоголя, нетоксичен и безопасен при многолетнем его потреблении, обладает положительными органолептическими признаками и может быть использован в качестве лечебно-профилактической пищевой добавки.

Предлагаемая композиция содержит в качестве алкопротекторных субстанций тритерпеновые гликозиды даммаранового ряда, олеаноловой и глицирретовой кислот, флавоноидные соединения агликонового и гликозидного характера, относящиеся к классам флавонов, флавонолов, халконов и ауронов, которые составляют природные комплексы, обладающие выраженной защитной и восстанавливающей активностью при употреблении токсичных доз этанола.

Способ получения композиции "Женсолар" и составляющих ее компонентов.

Настойки и экстракты из корней женьшеня Panax ginseng C.A. Mey. аралии маньчжурской Aralia mandshurica Rupr. et Maxim (A. elata Seem.) и солодки уральской Glycyrrhiza uralensis Fisch имеют разрешение Государственной фармакопеи СССР для использования в медицине и применяются как лекарственные средства с широким спектром медико-биологического действия. Однако алкопротекторные свойства указанных препаратов в патентной литературе не описаны.

Для получения общего экстракта и суммарного гликозидного экстракта (СГЭ) из корня женьшеня используют 5-6-летние корни дальневосточной элитной популяции женьшеня Panax ginseng C.A. Meyer, выращенные на плантациях совхоза "Женьшень" (Приморский край, Анучинский район).

Суммарный экстракт получают путем экстракции измельченных сухих корней женьшеня 70% -ной водно-спиртовой жидкостью из расчета 100 л на 10 кг сырья при 30-40^oC в течение 3-5 суток до полного извлечения и фильтруют. Фильтрат высушивают до постоянного веса и растворяют в минимальном количестве воды. Полученную водную суспензию последовательно обрабатывают пентаном и бутанолом, насыщенным водой. Бутанольный экстракт тщательно высушивают под вакуумом и получают сухой светло-коричневый остаток, составляющий суммарный гликозидный экстракт (СГЭ). СГЭ состоит главным образом из следующих гинзенозидов -Rg₁(1,38 мг/г сухого корня), -Re(1,31), -Rf(0,3), -Rc (0,61), -Rb₂(0,5), -Rb₁(4,15), -Ro(0,38), а также минорных гинзенозидов -Rd (0,016) -NG-R2 (0,03), -Z-R1 (0,096), метиловых эфиров гликозидов Ro (0,19) и Z-R1 (0,096). СГЭ корня женьшеня используют для приготовления композиции "Женсолар" в сухом виде или в виде водных и водно-спиртовых растворов.

Для получения СГЭ сухой каллюсной биомассы культуры тканей женьшеня ("Биоженьшень") используют хорошо растущие культуральные штаммы, которые содержат активные гинзенозиды. Культуральная биомасса близка по составу, органолептическим и фармакологическим свойствам к природному корню женьшеня. Процедуры выделения СГЭ из сухой биомассы культуры тканей женьшеня такие же, как описаны выше для получения СГЭ из сухого корня женьшеня. СГЭ культуры тканей женьшеня штамма 1с, состоит главным образом из следующих гинзенозидов (мг/г сухого корня): -Rg₁(3,23), -Rе(4,8), -Rf(1,5), -Rb₁(3,4), -Rc(0,8),-Rb₂(0,8) и -Rd(0,9). Штамм депонирован во Всесоюзную коллекцию клеток высших растений при Институте физиологии растений АН СССР и прошел адаптацию к условиям промышленного выращивания на предприятиях концерна "Космофарм". Ростовые и продукционные характеристики штамма стабильны в течение периода наблюдений (3 года). СГЭ культуры тканей женьшеня ("Биоженьшень") используют в сухом виде или в виде водных и водно-спиртовых растворов.

Измельченные корни аралии заливают 70%-ной водно-спиртовой жидкостью из расчета 100 л на 20 кг сырья. Настойку выдерживают 3-5 суток при 30-40^oC, охлаждают до 10^oC, фильтруют и выпаривают под вакуумом до постоянного веса. Полученный сухой коричневый остаток используют для приготовления композиции"Женсолар" в сухом виде или в виде водных и водно-спиртовых растворов.

Измельченные корни солодки заливают 40%-ной водно-спиртовой жидкостью из расчета 100 л на 10 кг сырья. Настойку выдерживают 3-5 суток при 30-40^oC, охлаждают до 10^oC, фильтруют и высушивают до постоянного веса. Полученный сухой светло-коричневый остаток используют для приготовления композиции "Женсолар" в сухом виде или в виде водных и водно-спиртовых растворов.

Пример 1. Для получения композиции "Женсолар" к 2 частям суммарного гликозидного экстракта корня женьшеня добавляют 1 часть экстракта корня аралии и 1 часть экстракта корня солодки (мас. 50:25:25, соответственно). Полученную смесь используют в сухом виде или в виде водных и водно-спиртовых растворов.

При растворении в воде композиция "Женсолар" образует стойкую однородную суспензию, имеющую цвет от желтого до светло-коричневого, слабый характерный запах и сладковатый вкус. Композиция в водном растворе обладает низкой токсичностью LD₅₀ > 3000 г/кг массы крысы и мыши при пероральном введении. Суспензия обладает способностью обеспечивать рациональные пути восстановления организма после воздействия токсичных доз алкоголя, снижает отрицательные эффекты его токсичных метаболитов и частично ингибирует всасывание токсичных доз алкоголя в кровь.

Пример 2. Для получения композиции "Женсолар" к 3 частям суммарного гликозидного экстракта ткани женьшеня добавляют 1 часть экстракта корня аралии и 1 часть экстракта корня солодки (мас. 60:20:20, соответственно). Полученную смесь используют в сухом виде или в виде водных и водно-спиртовых растворов.

При растворении в воде композиция образует стойкую однородную суспензию, имеющую цвет от желтого до светло-коричневого, слабый характерный запах и сладковатый вкус. Композиция в водном растворе обладает низкой токсичностью
LD₅₀ > 3000 г/кг массы крысы или мыши при пероральном введении. Суспензия обладает способностью обеспечивать рациональные пути восстановления организма после воздействия токсических доз алкоголя, снижает отрицательные эффекты его токсичных метаболитов и частично ингибирует всасывание токсичных доз алкоголя в кровь.

Пример 3. Композицию "Женсолар" получают как в примере 1. При растворении указанной композиции в 40%-ной водно-спиртовой жидкости получают светло-желтый раствор. Раствор обладает способностью снижать отрицательные эффекты этанола и его токсичных метаболитов, а также частично ингибировать всасывание токсичных доз алкоголя в кровь.

Пример 4. Композицию "Женсолар" получают как в примере 2. При растворении указанной композиции в 40%-ной водно-спиртовой жидкости получают светло-желтый раствор. Раствор обладает способностью снижать отрицательные эффекты этанола и его токсичных метаболитов, а также частично ингибировать всасывание токсичных доз алкоголя в кровь.

Характеристика фармакологической активности лечебно-профилактической композиции "Женсолар".

Выявление способности композиции "Женсолар", восстанавливать нарушения роста мозга после и в период действия токсичных доз этанола.

В опытах использовали новорожденных крысят линии Вистар, разделенных на группы по 6-8 животных в каждой. На 6-й день после рождения группам животных вводили 25%-ный раствор водного этанола из расчета 3 г/кг два раза с интервалом 3 ч. Исследуемые субстанции вводили либо одновременно с этанолом, либо на следующий день после введения этанола в течение пяти дней. На 20-й день после рождения у животных удаляли мозг, определяли вес мозжечка как наиболее чувствительной части головного мозга к алкогольной интоксикации и рассчитывали восстанавливающий эффект композиции и отдельных субстанций. Процент восстановления групп животных, прошедших лечебный курс, определяли путем сравнения среднего веса мозжечка в каждой группе (0) с группой, получавшей этанол (Э) и контрольной группой (К) по следующей формуле:
восстановления [(О-Э)/(К-Э)]• 100%
А. Восстанавливающее действие композиции на рост мозга после введения этанола. В табл.1 приведены сравнительные результаты восстанавливающего действия обоих вариантов композиции "Женсолар" на рост мозжечка новорожденных крысят, нарушенный токсическими дозами этанола. Для сравнения исследовали восстанавливающие свойства экстракта корня женьшеня, СГЭ корня женьшеня и СГЭ культуры тканей женьшеня. Пятикратное лечение композициями и отдельными субстанциями проводили на следующий день после введения этанола.

Как видно из данных табл.1, после введения в организм экспериментальных животных избыточных доз этанола экстракт корня женьшеня при 5-кратном лечении оказывает незначительное влияние на токсическое действие этанола. СГЭ корня женьшеня и культуры тканей женьшеня по сравнению с суммарным экстрактом обладают выраженным восстанавливающим действием. Наибольший лечебный эффект показывают оба варианта композиции.

Таким образом, оба варианта композиции "Женсолар" восстанавливают вес мозжечка, нарушение роста которого наблюдается после алкогольной интоксикации экспериментальных животных.

В. Алкопротекторное действие на рост мозга композиции "Женсолар" при совместном введении с токсическими дозами этанола. Из данных, приведенных в табл.2, можно видеть, что экстракт корня женьшеня не оказывает значимого защитного и восстанавливающего эффекта на рост мозжечка. Экспериментальные испытания защитного действия СГЭ корня женьшеня, СГЭ культуры тканей женьшеня и композиции "Женсолар" показали, что они частично предотвращают наблюдаемое нарушение роста мозжечка, вызванное токсичным действием этанола. При этом оба варианта композиции показывают более выраженный алкопротекторный эффект, чем отдельные субстанции.

Таким образом, композиция "Женсолар" при совместном введении с этанолом обладает восстанавливающим действием на ЦНС.

Ингибирующее действие композиции "Женсолар" и составляющих ее компонентов на всасывание этонола в кровь. Опыты проводили на белых крысах линии Вистар весом 180-220 г.

Композиции и отдельные субстанции вводили перорально за 15 мин до введения этанола. Определенные концентрации этанола в плазме крови крыс проводили через 60 мин ферментативным методом с использованием алкогольдегидрогеназы (АДГ). Для удаления белка плазмы крови смешивали 4 мл раствора хлорной кислоты + 0,5 мл плазмы, центрифугировали при 3000 об./мин и использовали надосадочную жидкость для исследований. Состав инкубационной среды для контроля: буфер 4,8 мл, NAD 0,1 мл, хлорная кислота 0,1 мл, АДГ 0,02 мл. Состав инкубационной среды для опыта: буфер -4,8 мл, супер -0,1 мл, NAD 0,1 мл, АДГ 0,02 мл (0,12 мг белка на мл раствора (24 ед./мл). Смесь тщательно перемешивали и инкубировали 70 мин при 25^oC. Показания снимали на спектрофотометре при 340 нм. Концентрацию этанола определяли по калибровочной кривой в диапазоне от 25 до 145 мкм.

В табл.3 приведены данные об ингибирующей активности на абсорбцию этанола обоих вариантов алкопротекторной композиции "Женсолар" и составляющих ее компонентов. Данная композиция проявляет ингибирующее (или пролонгирующее) действие на всасывание токсичных доз этанола в кровь. Этанольные экстракты корней аралии и солодки, входящие в состав обоих вариантов композиции, также обладают ингибирующей активностью на абсорбцию этанола. Это связано со значительным содержанием в указанных экстрактах кислых тритерпеновых гликозидов -3 бета глюкуронозидов [2] соответственно олеаноловой и глицирретовой кислот.

Таким образом, композиция "Женсолар" эффективно ингибирует абсорбцию этанола из желудочно-кишечного тракта и его поступление в плазму крови, защищая от повреждений ЦНС.

Выявление способности композиции "Женсолар" ослаблять острую алкогольную интоксикацию.

А. Влияние композиции на продолжительность этанолового наркоза. Эксперименты выполнены на 50 беспородных мышах. 25%-ный раствор этанола вводили внутрибрюшинно в наркотической дозе 4,5 г/кг. Композицию вводили мышам как предварительно многократно (8 дней), так и однократно. В день проведения эксперимента композицию вводили за 1 ч до введения этанола. Определяли продолжительность этанолового наркоза в опытной и контрольной группах. За критерий сна принимали способность животных сохранять боковое положение. Исследования показали, что предварительное введение композиции мышам вызывает сокращение длительности этанолового наркоза у животных примерно в 1,7 раза. Так, если продолжительность наркотического сна у контрольной группы мышей (12 животных) составляет 30,8 ± 6 мин, то в группах животных, которым предварительно вводили курсовую дозу (20 мг/кг ежедневно), продолжительность наркотического сна составила 17,6 ± 4 мин. Однократное введение композиции также вызывает сокращение длительности этанолового наркоза.

Таким образом, композиция "Женсолар" сокращает продолжительность этанолового наркоза у мышей как при курсовом, так и при однократном введении. Укорочение алкогольного наркоза указывает на пробуждающее действие данной композиции.

Б. Влияние композиций "Женсолар" на выживаемость мышей при внутрибрюшинном введении этанола в летальных дозах. Опыты проведены на 35 беспородных мышах весом 20 ± 2 г. 25%-ный раствор этанола вводили животным в дозе 9 г/кг (из расчета на абсолютный спирт). Композицию вводили предварительно в течение 5 дней. В ходе эксперимента отмечали число погибших животных в опытной и контрольной группах через 24 ч после однократного введения этанола. Основная гибель животных при введении этанола в дозе 9 г/кг беспородным мышам контрольной группы отмечена через 24 ч (87%). В группах животных, получавших композицию "Женсолар" в дозе 20 мг/кг, погибает значительно меньше мышей (47%).

Таким образом, при введении беспородным мышам летальных доз этанола композиция "Женсолар" оказывает защитное действие.

Источники информации
1. Машковский М. Д. Лекарственные средства. В двух частях. -12-е изд. перераб. и доп.-М. Медицина,1993.-736 с.

2.Yoshikawa M. Harada E. Matsudo H. Murakami T. Yamahara J. and Murakami N. Elatosides A and B, potent inhibitors of ethanol absorption in rats from the bark of Aralia elata Seem. the structure-activity relationships of oleanolic acid oligoglycosides. Chem. Pharm. Bull. 1993, v.41, p.2069-2071.

3. Оксенгендлер Г.И. Яды и организм. Алкоголь под объективом токсикологии. "Наука", Санкт-Петербург, 1991, с.108-137.

4.Патент РФ 2011382, А 61 К 35/78, 30.04.94.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и касается лечебно-профилактических пищевых композиций, используемых для защиты центральной нервной системы (ЦНС) от токсичного воздействия этанола. Предлагаемые композиции могут быть использованы в медицине и пищевой промышленности. Предлагаемая лечебно-профилактическая пищевая композиция "Женсолар" включает в себя суммарный гликозидный экстракт корня женьшеня, экстракт из корня аралии и экстракт из корня солодки. Другой вариант композиции "Женсолар" содержит суммарный гликозидный экстракт культуры тканей женьшеня и этанольные экстракты корня аралии и корня солодки. Композиции обладают выраженной способностью восстанавливать нарушения ЦНС в период и после воздействия избыточных доз алкоголя, нетоксичны и безопасны при многолетнем их потреблении, обладают положительными органолептическими признаками и могут быть использованы в качестве лечебно-профилактической пищевой добавки. 2 с.п. ф-лы, 3 табл.

1. Лечебно-профилактическая пищевая композиция, обладающая алкопротекторным действием на основе лекарственных растений, отличающаяся тем, что она содержит суммарный гликозидный экстракт корня женьшеня и этанольные экстракты корней аралии и солодки при следующем соотношении компонентов, мас.

Суммарный гликозидный экстракт корня женьшеня 45 55
Экстракт корня аралии 20 30
Экстракт корня солодки 20 30
2. Лечебно-профилактическая пищевая композиция, обладающая алкопротекторным действием, отличающаяся тем, что она содержит суммарный гликозидный экстракт культуры тканей женьшеня и этанольные экстракты корней аралии и солодки при следующем соотношении компонентов, мас.

Суммарный гликозидный экстракт культуры тканей 55 65
Экстракт корня аралии 15 25
Экстракт корня солодки 15 25