ПРОТИВОАЛЛЕРГИЧЕСКАЯ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ МЕСТНОГО ГЛАЗНОГО ПРИМЕНЕНИЯ И СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ Российский патент 1998 года по МПК A61K31/33 

Изобретение относится к противоаллергической композиции для местного офтальмологического применения. Конкретно, настоящее изобретение относится к противоаллергической композиции для местного глазного применения, включающей ингибитор выработки IgE антител.

Аллергические реакции подразделяются на четыре типа, т.е. типы I, II, III и IV. Тип I (немедленный, анафилактический) аллергической реакции связан с иммуноглобулином E (здесь упоминается как IgE). Эту реакцию в общих чертах можно разделить на следующие три стадии. Первая стадия - стадия сенсибилизации, включающая выработку IgE антител и связывание их с тучными клетками или базофилами. Второй этап включает дегрануляцию тучных клеток или базофилов и высвобождение химических медиаторов. Третий этап включает эффекты высвобожденных химических медиаторов на органы-мишени. Таким образом, аллергическая реакция типа 1 против чужеродных антигенов приводит к развитию симптомов, обусловленных вышеперечисленными этапами реакции.

Для лечения аллергических состояний осуществляется лишь симптоматическое лечение, которое тормозит упомянутые выше второй и/или третий этапы реакции. Другими словами, лечение осуществляется посредством ингибирования высвобождения химических медиаторов, сопровождающего дегрануляцию, и/или посредством ингибирования аллергических реакций, вызванных высвобожденными химическими медиаторами. Это симптоматическое лечение эффективно не только при системном применении противоаллергических агентов, но также и при местном их применении, например офтальмологическом, эффективность такого лечения ограничена вследствие того, что оно не ингибирует выработку IgE антител, которая является первым и главным этапом аллергической реакции первого типа.

В последнее время разрабатываются лекарства, ингибирующие вышеупомянутый первый этап реакции, а именно ингибиторы выработки IgE антител, в качестве фундаментальных средств против аллергической реакции типа 1. Примеры таких ингибиторов включают (±)-{2-[4-(3-этокси-2-гидроксипропокси)фенилкарбамоил] этил} - диметилсульфония p-толуолсульфонат (здесь иногда упоминается как суплатаст тозилат), этил 2,6-био-(N-метилкарбамолл)пиридин-4-карбоксилат (здесь иногда упоминается как CS-1433) и т.п. Сообщалось об их противоаллергических эффектах при системном применении, а именно при оральном применении и подобных (U.S. 4556737, Ner Current. том 3, N 26 (1992) и т.д. для суплатаст тозилата; Allergy, том 36, N 8 (1987) и т.д. для CS-1433). Однако, не было сообщений о действии этих лекарств при местном глазном применении, поскольку не ясны механизмы выработки антител IgE при местной сенсибилизации.

Как упоминалось выше, в настоящее время не существует удовлетворительных противоаллергических агентов для местного глазного применения.

Основной целью настоящего изобретения является создание противоаллергической фармакологической композиции для местного глазного применения.

На фиг. 1 приведен график, изображающий изменение выработки IgE антител в яремном лимфатическом узле мыши после конъюнктивальной иммунизации во времени (ось абсцисс показывает количество дней с момента иммунизации, ось ординат - количество анти-ТНФ IgE, нг/мл); на фиг. 2 - график, изображающий изменения выработки антител IgE в сыворотке, секретируемой клетками удаленного лимфатического узла (ось абсцисс показывает количество дней с момента иммунизации, ось ординат - количество анти-ТНФ IgE, нг/мл); на фиг. 3 - график, показывающий выработку IgE антител в клетках различных лимфатических узлов, таких как клетки яремного лимфатического узла и клетки брыжеечного лимфатического узла (ось ординат показывает количество анти-ТНФ IgE нг/мл), цифры 1, 2 и 3 обозначают следующие органы соответственно: 1 - лимфатический узел, 2 - селезенка, 3 - брыжеечный лимфатический узел.

Авторы настоящего изобретения провели интенсивные исследования, чтобы получить противоаллергические агенты, эффективные при местном глазном применении, основывая свою деятельность на той точке зрения, что лекарства в целом, предпочтительно применять местно и что если IgE антитела локально продуцируются в глазах, местно глазное применение является предпочтительным по сравнению с системным, подразумевающим доставку лекарства в организме.

Результатом этих исследований явилось то, что сначала обнаружился факт выработки IgE антител только в лимфатических узлах, расположенных вблизи от глаз (яремные лимфатические узлы, в частности околоушные лимфатические узлы) при локальной иммунизации глаза. Последующие исследования, основанные на этом первом открытии, обнаружили, что местное глазное применение ингибиторов вышеупомянутой выработки IgE антител существенно подавляет выработку IgE антител лимфоцитами. Таким образом, настоящее изобретение было завершено.

С одной стороны, настоящее изобретение создает новую и эффективную противоаллергическую композицию для местного глазного применения, включающую в качестве активного ингредиента ингибиторы выработки IgE антител.

Конкретно, настоящее изобретение создает противоаллергическую фармацевтическую композицию для местного глазного применения, включающую в качестве активного ингредиента (±) -{2-[4-(3-этокси-2-гидроксипропокси)фенилкарбамоил] -этил}-диметилсульфония p-толуолсульфонат (т.е. суплатаст толуолсульфонил) следующей формулы (I):

Целью настоящего изобретения является также создание способа получения противоаллергической фармацевтической композиции для местного глазного применения, который включает смешивание ингибитора выработки IgE антител с фармацевтически приемлемым носителем, наполнителем или растворителем.

Ингибиторы выработки IgE антител, которые являются активным ингредиентом фармацевтической композиции настоящего изобретения, включают упомянутые выше суплатаст тозилат, CS-1433 и им подобные. Их физические и химические свойства, а также получение описано, например в US, patent N 4556737 для суплатаст тозилата и в US, patent N 4691018 для CS-1433. Суплатаст тозилат можно получить, например, реакцией между (±) -{2-[4-(3-этокси-2-гидроксипропокси)фенилкарбамоил] этил} -метилсульфидом и метил-p-толуолсульфонатом (см. US, patent N 4556737). CS-1433 можно получить, например, реакцией между триэтилпиридин-2,4,6-трикарбоксилатом и метиламином (см. US, patent N 4691018).

Как следует из результатов экспериментов, приведенных в настоящем документе, ингибиторы выработки IgE антител обладали отличной ингибирующей выработку IgE антител активностью и, следовательно, могут применяться в противоаллергической композиции для местного глазного применения.

Фармацевтическая композиция настоящего изобретения может быть получена, например, путем смешивания ингибитора выработки IgE антител (например, суплатаст тозилата) с известными фармацевтически приемлемыми носителями, наполнителями, растворителями и им подобными веществами и применяется в виде композиции для парентерального применения, например, в виде глазных капель (офтальмологические растворы и суспензии), глазных мазей и т.п. в соответствии со стандартными методиками.

В случае использования в виде глазных капель, противоаллергическая фармацевтическая композиция настоящего изобретения может содержать вспомогательные вещества, такие как буферы, изотонические вещества, консерванты, pH-корригенты, агенты, повышающие плотность, хелатобразующие агенты и им подобные вещества, которые обычно применяются в глазных каплях, если они являются подходящими для конкретных целей настоящего изобретения.

Буферы включают фосфатные буферы, боратные буферы, цитратные буферы, тартратные буферы, ацетатные буферы, аминокислоты и т.п.

Изотонические агенты включают сахара, такие как сорбитол, глюкоза, маннитол и т. п.; многоатомные спирты, такие как глицерин, полиэтиленгликоль, пропиленгликоль и т.п.; соли, такие как хлорид натрия и т.п.

Консерванты включают бензалкониум хлорид, бензетониум хлорид, парагидроксибензоаты (например, меттлпарагидроксибензоат, этилпарагидроксибензоат и т. д. ), бензиловый спирт, этоксифениловый спирт, сорбиновую кислоту или ее соли, тимерозал, хлорбутанол и т.п.

pH-корригенты включают хлористоводородную кислоту, уксусную кислоту, фосфорную кислоту, гидроксид натрия, гидроксид аммония и т.п.

Увеличивающие плотность агенты включают гидроксиэтилцеллюлозу, гидроксипропилцеллюлозу, метилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу и их соли и т.п.

Хелатобразующие агенты включают цитрат натрия, конденсированный фосфат натрия и т.п.

Если противоаллергическая фармацевтическая композиция настоящего изобретения применяется в виде глазной мази, в качестве основы глазной мази используют очищенный ланолин, вазелин, жидкий парафин и т.п.

Противоаллергическая фармацевтическая композиция настоящего изобретения может содержать один или более других противоаллергических агентов, если они являются приемлемыми для конкретных целей настоящего изобретения.

Дополнительно противоаллергическая композиция настоящего изобретения может содержать другие ингредиенты, обладающие другой фармакологической активностью, в добавление к ингибитору выработки IgE антител, применяемому в настоящем изобретении. Фармацевтическая композиция настоящего изобретения может вводиться местно в глаза млекопитающих (например, людей, кроликов, собак, кошек, крупного рогатого скота, лошадей, обезьян и т.д.) при аллергических заболеваниях таких как аллергический конъюнктивит, кератоконъюнктивит, поллиноз и т.п.

Дозу противоаллергической фармацевтической композиции настоящего изобретения можно адекватно подобрать в зависимости от способа применения, симптомов, возраста и веса пациента и т.п. Например, если фармацевтическую композицию применяют для лечения взрослого человека, страдающего аллергическим заболеванием, предпочтительно применять одну или несколько капель композиции в виде глазных капель, содержащих суплатаст тозилата в качестве активного ингредиента в количестве от 0,01 до 10,0 мас./об.%, предпочтительно от 0,05 до 5,0 мас./об.%, более предпочтительно от 0,2 до 2,0 мас./об.%, от 1 до 6 раз в день в зависимости от симптомов. В случае, если фармацевтическая композиция применяются в виде глазной мази, композицию, содержащую суплатаст тозилата в качестве активного ингредиента в количестве от 0,01 до 10 мас. /об.%, предпочтительно от 0,1 до 5 мас./об.%, предпочтительно применяют от 1 до 6 раз в день в зависимости от симптомов.

Следующие примеры дополнительно подробно иллюстрируют настоящее изобретение и следующие эксперименты демонстрируют эффекты настоящего изобретения, однако они не должны истолковываться, как ограничивающие настоящее изобретение.

Пример 1. Глазные капли (офтальмологический раствор).

Был приготовлен офтальмологический раствор согласно стандартной методике:
Ингредиенты - Количество, г
Суплатаст тозилата - 2,0
Хлорид натрия - 0,9
Дигидрофосфат натрия - 0,1
Бензалкония хлорид - 0,005
Гидроксид натрия - Подходящее количество (pH 6,0)
Добавили стерильную очищенную воду до общего объема 100 мл.

Пример 2. Глазные капли (офтальмологический раствор).

Был приготовлен офтальмологический раствор согласно стандартной методике:
Ингредиенты - Количество, г
Суплатаст тозилата - 0,5
Конц. глицерин - 2,6
Ацетат натрия - 0,1
Бензалкония хлорид - 0,005
Разведенная хлористоводородная кислота - Подходящее количество (pH 5,0)
Добавили стерильную очищенную воду до общего объема 100 мл.

Пример 3. Глазные капли (офтальмологический раствор).

Был приготовлен офтальмологический раствор согласно стандартной методике:
Ингредиенты - Количество, г
Суплатаст тозилат - 0,5
Маннитол - 5,0
Ацетат натрия - 0,1
Хлорбутанол - 0,2
Бензетония хлорид - 0,005
Разбавленная хлористоводородная кислота - Подходящее количество (pH 4,0)
Добавили стерильную очищенную воду до общего объема 100 мл.

Пример 4. Глазные капли (офтальмологический раствор).

Был приготовлен офтальмологический раствор согласно стандартной методике:
Ингредиенты - Количество, г
Суплатаст тозилат - 1,0
Конц. глицерин - 2,6
Ацетат натрия - 0,05
Гидроксипропилметилцеллюлоза - 0,1
Метилпарагидроксибензоат - 0,02
Пропилпарагидроксибензоат - 0,01
Разбавленная хлористоводородная кислота - Подходящее количество (pH 5,5)
Добавили стерильную очищенную воду до общего объема 100 мл.

Пример 5. Глазные капли (офтальмологический раствор).

Был приготовлен офтальмологический раствор согласно стандартной методике, следующей рецептуры:
Ингредиенты - Количество, г
Суплатаст тозилат - 0,3
Хлорид натрия - 0,9
Цитрат натрия - 0,02
Метилпарагидроксибензоат - 0,02
Хлорбутанол - 0,1
Уксусная кислота - Подходящее количество (pH 4,5)
Добавили стерильную очищенную воду до общего объема 100 мл.

Пример 6. Глазная мазь.

Была приготовлена офтальмологическая мазь согласно стандартной методике:
Ингредиенты - Количество, г
Суплатаст тозилат - 1,0
Жидкий парафин - 1,0
Белый мягкий парафин - Подходящее количество - Общее количество 100 г
Пример 7. Глазные капли (офтальмологический раствор).

Был приготовлен офтальмологический раствор согласно стандартной методике:
Ингредиенты - Количество, г
Суплатаст тозилат - 2,0
Конц. глицерин - 2,6
Дигидрофосфат натрия - 0,1
Бензалкония хлорид - 0,005
Гидроксид натрия - подходящее количество (pH 6,0)
Добавили стерильную очищенную воду до общего объема 100 мл.

Пример 8. Глазные капли (офтальмологический раствор).

Был приготовлен офтальмологический раствор согласно стандартной методике:
Ингредиенты - Количество, г
Суплатаст тозилат - 0,5
Хлорид натрия - 0,9
Ацетат натрия - 0,1
Бензалкониум хлорид - 0,005
Хлористоводородная кислота - Подходящее количество (pH 4,5)
Добавили стерильную очищенную воду до общего количества 100 мл.

Эксперимент 1. Изменения выработки IgE антител в околоушном лимфатическом узле с течением времени после конъюнктивальной иммунизации мыши.

Для иммунизации инъецировали в субконъюнктивальную часть века правого глаза мыши-самки линии BAZB/c с помощью иглы 27G физиологический раствор (10 мкл), содержащий динитрофенилированный экстракт аскарид (далее упоминается как ДНФ-Ас) (4 мкг) и гидроксид алюминия (далее упоминается как Алюм) (60 мкг). Затем удаляли околоушный лимфатический узел, селезенку и брыжеечный лимфатический узел. Клетки (2 • 10⁶) этих органов инкубировали в среде RPMI 1640 (Roswell Park Memorial Institute) (0,2 мл) в течение 4 дней. Секретируемые анти-динитрофенил Ig E определяли как анти-тринитрофенил, здесь упоминаются как анти-ТНФ, посредством твердофазного иммуноферментного анализа (EZISA). Результаты приведены на фиг. 1. Определяли также изменения во времени количества IgE в сыворотке. Результаты приведены на фиг. 2. Помимо этого, определяли количество IgE антител, которые вырабатывались в различных органах лимфатической системы (околоушном лимфатическом узле, селезенке, брыжеечных лимфатических узлах). Результаты приведены на фиг. 3.

Из упомянутых выше результатов следует, что выработка IgE антител в ответ на местную глазную иммунизацию наблюдается только в околоушном лимфатическом узле (см. фиг. 3) и выработка этих антител внезапно начинает возрастать примерно на 8-й день (см. фиг. 1 и 2). Это означает, что для того, чтобы отбирать лекарства, обладающие ингибирующим эффектом на выработку IgE антител при местной глазной иммунизации, нам нужно было только определять количество IgE антител, выработанных клетками соседнего лимфатического узла. Это также означает, что IgE антитела предпочтительно определять, по меньшей мере, на 8-й день после иммунизации.

Эксперимент 2. Воздействие суплатаст тозилата на выработку IgE антител у мышей.

Животные: мыши-самки линии BAZB/c (111 мышей, вес тела около 15 г).

Испытуемые лекарства и группы мышей - вышеупомянутые 111 мышей разделили на следующие 6 групп:
20 мышей, которые получали физиологический раствор (глазные капли); 18 мышей, которые получали 0,05 мас./об.% суплатаст тозилата (глазные капли); 19 мышей, которые получали 0,2 мас./об.% суплатаст тозилата (глазные капли); 19 мышей, которые получали 0,5 мас./об.% суплатаст тозилата (глазные капли); 19 мышей, которые получали 2,0 мас./об.% суплатаст тозилата (глазные капли) и 16 мышей, которые получали суплатаст толуолсульфонил орально (5 мг/кг).

Введение испытуемых лекарств. В группах, в которых применялись глазные капли, животным закапывали в правый глаз в течение 20 дней, начиная за 5 дней до иммунизации 4 раза в день дозу в 4 мкл на одно введение. В группе, в которой применяли оральное введение лекарства, препарат вводили орально каждой мыши один раз в день в дозе 100 мкл на введение.

Иммунизация. Физиологический раствор (10 мкл), содержащий ДНФ-Ас (4 мкг) и Алюм (60 мкг), инъецировали в субъконъюнктивальную часть века правого глаза каждой мыши с помощью иглы 27G.

Исследование. Животных убивали спустя 14 дней после иммунизации. Правый околоушный лимфатический узел удаляли и брали кровь (200 мкл). В каждой группе околоушной лимфатический узел от каждой мыши культивировали отдельно, пропускали через сито, тщательно отмывая его при этом минимальной поддерживающей средой (МПС), и центрифугировали на 1500 об./мин в течение 5 мин. К полученному осадку прибавляли 450 мкл среды RPMI 1640, 200 мкл этой смеси помещали в лунки и культивировали в течение 4 дней. IgE антитела определяли с помощью метода гранул в двух повторностях. После отделения сыворотки кровь хранили замороженной и исследовали на содержание IgE антител одновременно с другими образцами.

Результаты представлены в табл. 1 для околоушного лимфатического узла и в табл. 2 для сыворотки.

Как следует из результатов, приведенных в табл. 1, суплатаст тозилат (глазные капли) продемонстрировал значительную ингибирующую выработку IgE антител активность в околоушных лимфатических узлах в таких низких концентрациях как 0,2 - 0,5 мас./об.%. С другой стороны, при оральном введении суплатаст тозилат не проявил значительной ингибирующей выработки IgE антител активности, даже в дозе 5 мг/кг, что соответствует концентрации 0,5 мас./об. % в глазных каплях. Более того, как следует из результатов, приведенных в табл. 2, на уровни IgE антител в сыворотке ни одна из испытанных концентраций суплатаст тозилата не повлияла. Эти результаты показывают, что при локальной иммунизации глаза выработка IgE антител наблюдается в околоушном лимфатическом узле (см. эксперимент 1), и суплатаст тозилата демонстрирует отличную ингибирующую выработку IgE антител активность только при местном применении для глаз.

Эксперимент 3. Острый опыт на токсичность суплатаст тозилата.

Использовали мышей-самцов ddy весом около 20 г. Раствор суплатаст толуолсульфонила (в физиологическом растворе) вводили интраперитонеально. Определяли 50% летальную дозу (LD₅₀: мг/кг) методом "вверх и вниз". Результаты показали, что LD₅₀ суплатаст тозилата фонила составила 254 мг/кг.

Изобретение относится к противоаллергической фармацевтической композиции для местного глазного применения, которая включает в качестве активного ингредиента ингибитор выработки IgЕ антител. Настоящее изобретение обеспечивает также способ получения противоаллергической фармацевтической композиции для местного глазного применения, который включает смешивание ингибитора выработки IgЕ антител с фармацевтически приемлемым носителем, наполнителем или растворителем. 2 с. и 8 з.п. ф-лы, 3 ил., 2 табл.

1. Противоаллергическая фармацевтическая композиция для местного глазного применения, включающая ингибитор выработки IgE антител в качестве активного вещества и фармацевтически приемлемые ингредиенты, отличающаяся тем, что активным веществом является ингибитор выработки IgE антител (±)-{2-[4-(3-этокси-2-гидроксипропокси) фенилкарбамоил]этил}-диметилсульфония п-толуолсульфонат формулы I

2. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что она находится в форме глазных капель. 3. Композиция по п.2, отличающаяся тем, что содержит соединение формулы I в количестве от 0,01 до 10,0 мас./об.%. 4. Композиция по п.2, отличающаяся тем, что содержит соединение формулы I в количестве от 0,05 до 5,0 мас./об.%. 5. Композиция по п.2, отличающаяся тем, что содержит соединение формулы (1) в количестве от 0,2 до 2,0 мас./об.%. 6. Способ получения противоаллергической фармацевтической композиции для местного глазного применения, включающий смешивание активного вещества и фармацевтически приемлемых ингредиентов, отличающийся тем, что активным веществом является ингибитор выработки IgE антител (±)-{2-[4-(3- этокси-2-гидроксипропокси) фенилкарбамоил] этил}- диметилсульфония п-толуолсульфонат формулы I

7. Способ по п. 6, отличающийся тем, что композицию получают в форме глазных капель. 8. Способ по п.7, отличающийся тем, что соединения формулы I смешивают в количестве от 0,01 до 10,0 мас./об.%. 9. Способ по п.7, отличающийся тем, что соединения формулы I смешивают в количестве от 0,05 до 5,0 мас./об.%. 10. Способ по п.7, отличающийся тем, что соединения формулы I смешивают в количестве от 0,02 до 2,0 мас./об.%.