СПОСОБ КОРРЕКЦИИ ПОБОЧНЫХ ЭФФЕКТОВ ХИМИОЛУЧЕВОЙ ТЕРАПИИ Российский патент 1998 года по МПК A61K31/70 

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии и касается способов коррекции побочных эффектов химиолучевой терапии у онкологических больных.

Одним из наиболее опасных осложнений химиолучевой терапии является депрессия кроветворения, возникающая при назначении даже терапевтических доз цитостатиков [6] . Это осложнение не только делает невозможным продолжение адекватного курса химиотерапии, но и повышает риск развития бактериальных инфекций, а иногда приводит и к летальному исходу [2].

Арсенал способов коррекции побочных эффектов химиолучевой терапии достаточно разнообразен. Используют пересадку костного мозга, введение лейкомассы, колонистимулирующих факторов, а также фармакологических препаратов - пентоксила, зимозана, витаминов различных групп [1, 4, 6]. Однако пересадка костного мозга сопряжена с дополнительным травматическим вмешательством, а введение лейкомассы может вызвать иммунный конфликт [7, 8, 9]. В то же время, лекарственная терапия недостаточно эффективна [6].

Известен способ коррекции побочных эффектов химиолучевой терапии, включающий введение нуклеината натрия (соль нуклеиновых кислот, получаемых гидролизом дрожжей) в виде 2-5% раствора по 5-10 мл внутримышечного, 1-2 раза в день в течение 10 и более дней. Однако инъекции нуклеината натрия чрезвычайно болезненны, а эффективность невелика [4]. В то же время, многочисленные исследования в этом направлении дезоксирибонуклеиновой кислоты и ее солей находятся пока на доклиническом уровне [1, 3, 5].

Сущность изобретения состоит в том, что в заявленном способе используют препарат натрия нуклеоспермат в дозах 15-225 мг. Перед введением препарат нагревают до 37^oC, а введение осуществляют подкожно, медленно, причем при "острой" лейкопении препарат вводят со второго дня применения ударной дозы цитостатиков, например, по схеме САМ, и введение осуществляют в течение 1-10 дн.

При "хронической" лейкопении введение препарата осуществляют после курса проведения химиотерапии, однократно, или в течение 3-8 дн.

Препарат натрия нуклеоспермат представляет собой смесь натриевых солей полихлоргидратов дериватов дезоксирибонуклеиновой и рибонуклеиновой кислот из спермы осетровых рыб с содержанием нуклеиновых кислот в пересчете на Na-ДНК от 90 до 105% с отношением азота к фосфору от 1,3 до 1,8 и 1,8 M.M. 66000-400000 Д.

Под "хронической" лейкопенией подразумевается лейкопения, вызванная различными агентами (химиотерапия, лучевая терапия, химиолучевая терапия), существующая у больного в течение 2 - 4 недель без тенденции к спонтанному восстановлению.

Под "острой" лейкопенией подразумевается лейкопения, вызванная введением ударных доз цитостатиков, с заведомо известными сроками развития и восстановления глубокой лейкопении.

Для раскрытия сущности изобретения приведены результаты клинических исследований натрия нуклеоспермата у онкологических больных с побочными эффектами от химиолучевой терапии. Исследования проведены в ОНЦ РАМН, МНИОИ им. Герцена, НИИ ДИХ и других. Всего исследован 71 больной с различной локализацией опухолей (рак легкого, рак молочной железы, мемфосаркома, нейробластома).

1. Исследование натрия нуклеоспермата у больных с хронической лейкопенией.

В исследуемую группу вошли больные с различной локализацией опухолей с развившейся хронической лейкопенией. К моменту планируемого очередного курса лечения, уровень лейкоцитов в крови составил ниже 2000 в 1 мм³ крови. До начала применения натрия нуклеоспермата проводили два повторных анализа крови и, если число лейкоцитов оставалось ниже 2000, в тот же день вводили препарат.

Натрия нуклеоспермат вводили в разовой дозе 75 мг (5 мл 1,5%-ного раствора) или в разовой дозе 150 мг (10 мл 1,5%-ного раствора) однократно или в течение 3-8 дн. Перед введением флакон с препаратом подогревали до 37^oC, после чего содержимое флакона вводили больным подкожно в течение 1 мин.

Эффективность применения препарата оценивали при исследовании крови (лейкоциты) на 1, 3, 5 и 7 дни, а также миелограммы на 6-7 сут после введения препарата.

В период исследования больные не получали дополнительно гемостимуляторов, витаминов, кортикостероидов и гемотрансфузий.

Результаты исследований показали, что при использовании натрия нуклеоспермата удалось восстановить число лейкоцитов периферической крови до 3000 и более у 87% больных. Восстановление числа лейкоцитов отмечалось в среднем на 6,3 сут. Характерно, что подъем числа лейкоцитов в периферической крови сопровождался увеличением содержания миелокариоцитов в пунктате костного мозга в среднем в 3,7 раза. Во всех случаях после введения препарата по заявляемому способу химиотерапия была продолжена в запланированных дозах. Во всех случаях при прохождении химиотерапии дальнейшего снижения числа лейкоцитов не происходило.

Эффективность использования натрия нуклеоспермата у больных с хронической лейкопенией иллюстрирует табл. 1.

Из представленной табл. 1 видно, что введение препарата как однократно, так и в течение 3-8 дн 75-150 мг вызывает значительный лейкостимулирующий эффект у онкологических больных.

2. Исследование натрия нуклеоспермата у больных с острой лейкопенией.

В исследуемую группу вошли больные с "острой" лейкопенией, которые получили комбинированную химиотерапию в инверсивном режиме по схеме САМ по поводу мелкоклеточного рака легкого. До начала лечения больным проводилось полное клиническое обследование (рентгенография легких, КТ печени, надпочечников, мозга, сканирование скелета, биохимическое исследование крови, миелограмма).

Больные с морфологически доказанным локализованным МРЛ в первый день лечения получали: циклофосфан 1,5 г/м² в/в; адриамицин 60 мг/м² в/в; метотрексат 30 мг/м² в/в.

Начиная со второго дня лечения больным вводили натрия нуклеоспермат подкожно в разовой дозе 75 мг (5 мл 1,5%-ного раствора) или 150 мг (10 мл 1,5%-ного раствора). Перед введением флакон с препаратом подогревали до 37^oC, после чего содержимое флакона вводили больным подкожно медленно в течение 1 мин. Введение препарата продолжали в течение 5 или 10 дн.

Анализы крови проводились ежедневно с 2 по 20 дни; на 6 - 10 дни проводилась контрольная миелограмма. В период исследования больные не получали других гемостимуляторов, витамины, кортикостероиды и гемотрансфузии.

В результате проведенных исследований было показано следующее.

Из 14 больных, получавших натрия нуклеоспермат в течение 5 или 10 дней, препарат в разовой дозе 75 мг введен 5 больным (12 курсов химиотерапии), а в разовой дозе 150 мг - 9 больным (22 курса терапии). Результаты представлены в табл. 2. Как следует из таблицы, лейкопения 3-й степени была выявлена у 41 (45%) больных, а 4-й степени - у 58 (27%) больных. Применение препарата позволило провести химиотерапию без лейкопении или с незначительным снижением числа лейкоцитов до 1-2 степени у 20 (36%) больных. Сравнение эффективности натрия нуклеоспермата в зависимости от величины разовой дозы выявило некоторое усиление гемостимулирующего действия при использовании дозы 150 мг (фиг. 1). Глубокая лейкопения (4 степени) наступила при применении дозы 75 мг у 58% больных, а при применении дозы 150 мг только у 27% (различия статистически недостоверны).

Сроки восстановления показателей крови у 14 больных МРЛ представлены в табл. 3. У больных, получивших препарат нуклеоспермат натрия в разовой дозе 75 мг, средние сроки восстановления лейкоцитов, рассчитанные от начала введения препарата, колебались от 17,2 дней на 1 курс до 15,8 - 16 дней на 2 и 3 курсах. У больных, получивших в разовой дозе 150 мг, эти показатели были соответственно 15,8 - 16,3 - 11,0 дней. Средние сроки восстановления лейкоцитов, рассчитанные от окончании курса введения препарата в указанных дозах, составляли 7,3 дней на 1-м курсе до 5,8 - 6,0 на 2 - 3-м курсах. Сокращение сроков восстановления лейкоцитов к 3-му курсу связано, по-видимому, с накоплением препарата или с его кумулятивным действием на костный мозг.

Из 14 больных лейкопения 3 - 4-й степени отмечалась у 12 больных, только у 1 была лейкопения 4-й степени. Длительность лейкопении 3-й степени у больных, получивших натрия нуклеоспермат в разовой дозе 150 мг в течение 10 дней, сокращалась от 6 - 9 дней на 1-м курсе до 3 - 6 дней на 2-м курсе (фиг. 2). Этот же показатель, полученный в группе 19 больных, получавших GM-CSF (данные отделения химиотерапии ОНЦ, 1993), составил 4 - 10 дней.

На фиг. 2 представлено среднее число лейкоцитов и нейтрофилов периферической крови больных МРЛ в полулогарифмической системе координат. Кривые, демонстрирующие показатели кроветворения на фоне применения натрия нуклеоспермата приведены в сравнении с числом нейтрофилов, рассчитанным для больных, не получавших гемостимуляторов после аналогичной интенсивной химиотерапии по поводу МРЛ ("плацебо", n-108, Crowford et al., 1991). Видно, что при использовании натрия нуклеоспермата происходит стимуляция лейкоцитов за счет нейтрофилов, чего не отмечается в группе с "плацебо". Стимуляция выражается в уменьшении глубины лейко- и нейтропении в 2 - 2,5 раза; отсутствии лейкопении 3 - 4-й степени и нейтропении 4-й степени; сокращении сроков нейтропении 3 степени с 7 до 5 дней.

В табл. 4 показана сравнительная характеристика восстановления кроветворения у больных с интенсивной химиотерапией без применения гемостимуляторов (плацебо) с натрия нуклеосперматом и с G-CSF. Как следует из приведенных данных, в группе с "плацебо" нейтропения 3 степени продолжалась от 7 до 11 дней, тогда как при применении нуклеоспермата она сокращалась до 5 - 9 дней, а при применении G-CSF до 3 - 4 дней. Нейтропения 4 степени в группе с "плацебо" длилась 4 - 5 дней, с натрия нуклеосперматом - 1 день, а с G-CSF - 2 дня. Максимальная нейтропения в группе с "плацебо" достигала 100 клеток, с натрия нуклеосперматом - 300 клеток и с G-CSF - 400 клеток. Срок наступления максимальной нейтропении был одинаковым во всех группах сравнения и равнялся 10 дням. Первый день восстановления нейтрофилов до 1000 клеток был, соответственно, 21-14-15, а до 2000 клеток, соответственно 20-15-12.

При анализе эффективности натрия нуклеоспермата у больных после проведения 1-го курса химиотерапии были отмечены следующие результаты (табл. 5). Количество больных, у которых число лейкоцитов достигло 3000 клеток, а нейтрофилов 2000 клеток к 14 - 17 дню, составило 11 человек (85%). Число больных, которым возможно было проведение 2-го курса лечения на 14 - 17 день составило 8 человек (62%).

Изучение миелограмм у 9 больных показало (табл. 6), что показатели костно-мозгового кроветворения у всех больных до начала химиотерапии были в пределах нормы. После химиотерапии на фоне натрия нуклеоспермата у 6 больных отмечалось "уменьшение миелокариоцитов за счет миелоцитов и промиелоцитов на 15 - 40%, а у трех больных 9 - 12 сутки отмечалось значительное увеличение молодых форм гранулоцитопоэза (промиелоцитов и миелоцитов) и соответственное увеличение индекса созревания нейтрофилов от 0,8 до 5,7 - 18,0. Относительное количество лимфоцитов при этом увеличивалось на 10 - 37%, в то же время количество клеток эритроидного ростка оставалось без изменений.

Очевидно, что применение натрия нуклеоспермата у 14 больных МРЛ на фоне интенсивной химиотерапии позволило уменьшить глубину лейко- и нейтропении, сократить их длительность, провести химиотерапию без септических осложнений и у 63% больных начинать повторные курсы химиотерапии с интервалами 14 - 17 дней.

Таким образом, клиническое изучение натрия нуклеоспермата у онкологических больных позволило сделать следующие выводы.

1. Натрия нуклеоспермат у больных с хронической лейкопенией восстанавливает лейкоцитарный состав периферической крови (эффективность 87%).

2. Параллельно отмечается повышение числа миелокариоцитов в пунктате костного мозга (в 3,7 раза).

3. Применение натрия нуклеоспермата позволяет не только восстановить показатели кроветворения, но и продолжить химиотерапию в запланированном режиме.

4. Применение натрия нуклеоспермата у больных с острой лейкопенией на фоне интенсивной химиотерапии оказывает гемостимулирующий эффект и позволяет предотвратить развитие глубокой лейкопении и нейтропении и связанных с этим септических состояний.

Гемостимулирующий эффект натрия нуклеоспермата связан со стимуляцией гранулоцитопоэза (промиелоцитов и миелоцитов), что проявляется в увеличении индекса созревания нейтрофилов более чем в 7 раз.

Пример, иллюстрирующый сущность изобретения.

Больной Быков И.А., 1939 г.р. Амбулаторная карта N 94/5157.

Диагноз: лимфосаркома всех групп периферических лимфоузлов, забрюшинных лимфоузлов печени, селезенки с лейкемизацией по типу пролимфоцитарного лейкоза, IV Аст.

Гистологическое заключение: N 225/94 от 13.01.94 г. Лимфосаркома из клеток типа пролимфоцитов. 16.02 - 01.03.94 - 1-й курс терапии по схеме ХВПП (лейкеран 10 мг. per. os, винбластин 10 мг в/в 1,8 дни, натулан по 150 мг per.os 1 - 14 дни, преднизалон по 60 мг/сутки 1 - 14 дни.

2-й курс х/терапии не начат в связи с лейкопенией 01/IV - 50000, 04/IV - 38000.

04.04.94 г. введен натрия нуклеоспермат, в соответствии с протоколом исследования.

Результаты анализа крови: 06.04 тромбоциты - 48000, 08.04 тромбоциты - 52000.

Таким образом, заявленный способ коррекции побочных эффектов химиотерапии по сравнению с известными обладает следующими преимуществами.

1. Эффективно восстанавливает лейкоцитарный состав периферической крови при острой и хронической лейкопении.

2. Стимулирует костномозговое кроветворение.

3. Позволяет продолжить адекватную химиотерапию в запланированном режиме.

4. Снижает риск и частоту инфекционных осложнений.

5. Не обладает отрицательным воздействием на организм.

Все изложенное свидетельствует о возможности широкого использования заявленного способа в клинической практике.

Литература
1. Белоус А.М. Экзогенные нуклеиновые кислоты и восстановительные процессы.-М.: Медицина, 1974, с. 126 - 140.

2. Гершанович М. Л. Осложнения при химио- и гормонотерапии злокачественных опухолей.-М.: Медицина 1974, с. 126 - 140.

3. Логинов А.С. и др. Репаративное действие препаратов нуклеиновых кислот при экспериментальной язве желудка. Бюлл. эксп. биол. и мед., N 7, 1991.

4. Машковский М.Д. Лекарственные средства.-М.: Медицина, т. 2, 1985.

5. Рычнев В.Е. Нуклеиновые кислоты и их терапевтическое применение. Врачебное дело, N 8, 1981, с. 114 - 118.

6. Слинчак С.М. Онкология. - Киев, Вища школа, 1989, с. 199 - 204.

7. Bregni M, S.Siena Breakthrough in cytokine therapy: an overview of GM-CSF. Royal Society of Medicine Services Int.Congress and Symposium Series 1992, N 170, p. 1 - 6.

8. P. Gupta et al. Bone Marrow Transplantation, 1992, N 9, p. 491 - 492.

9. P. Riikonen, V. Saarinen. Medical and Pediatric Oncology, 1992, N 20, p. 489 - 496.

Изобретение относится к медицине, в частности к онкологии и касается коррекции депрессии кроветворения, обусловленной химиолучевой терапией. Для этого предлагается использовать нуклеоспермат натрия, полученный из молок осетровых рыб, в дозах 15 - 225,0 мг. 2 з.п. ф-лы, 2 ил., 6 табл.

1. Способ коррекции депрессии кровотечения, обусловленной химиолучевой терапией, включающий инъекционное введение производных нуклеиновых кислот, полученных из молок осетровых рыб, отличающийся тем, что используют препарат натрия нуклеоспермат, представляющий собой смесь натриевых солей полихлоргидратов дериватов дезоксирибонуклеиновой и рибонуклеиновой кислот с содержанием нуклеиновых кислот в пересчете на Na-ДНК 90 - 105% с соотношением азота к фосфору от 1,3 до 1,8 и 1,8, М.М. 66000-400000 Д, в дозах 15 - 225,0 мг, причем перед введением препарат нагревают, а введение осуществляют подкожно медленно. 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что при острой лейкопении препарат вводят с второго дня применения цитостатиков по схеме САМ в течение 1 - 10 дней. 3. Способ по п. 2, отличающийся тем, что при хронической лейкопении введение осуществляют после курса проведения химиотерапии однократно или в течение 3 - 8 дней.