СПОСОБ УСИЛЕНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ ДЕЙСТВИЯ ПРОТИВООПУХОЛЕВОГО ХИМИОПРЕПАРАТА Российский патент 1998 года по МПК G01N33/48 A61K31/00 

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной онкологии, и предназначено для повышения эффективности химиотерапии путем усиления эффективности действия химиопрепарата в опухоли.

Известен способ усиления эффективности действия химиопрепарата путем интра- и паратуморального введения препаратов при первичном и метастатическом опухолевом процессе.

Недостатком данного метода является то, что лекарственные препараты, практически не задерживаясь в зоне опухоли, тут же вымываются в системный кровоток. Из-за высокой гистотоксичности данный метод неприемлем для многих химиопрепаратов. Применение данного метода возможно только при единичных образованиях, в основном наружной локализации. Нарушение целостности кожных покровов, либо эндотелия может приводить к развитию гнойных осложнений.

Так же известен способ усиления эффективности противоопухолевого действия химиопрепарата за счет повышения локальной концентрации химиопрепарата в опухоли путем введения цитостатиков в желудочки мозга спинномозговой канал, плевральную и брюшную полости.

Недостатком данного метода является то, что кроме системной токсичности, внутрибрюшинное введение, например 5-фторурацила, осложняется болями в животе. Другим недостатком является небольшая продолжительность пребывания препарата в брюшной полости, невозможность длительных внутрибрюшных инфузий из-за опасности развития гнойных осложнений и образования спаек вокруг катетера. Местная токсичность ряда препаратов, вызывающая развитие химического перитонита, не позволяет использовать этот метод в широкой клинической практике.

Так же известен способ усиления эффективности противоопухолевого действия химиопрепарата путем эндолимфатического введения, что позволяет создать депо препарата в паховых подвздошных и в меньшей мере парааортальных лимфоузлах. Преимуществом данного метода является возможность введения больших доз цитостатиков.

Недостатком является невозможность использования этого метода после операций, связанных с лимфаденэктомиями, невозможность установки эндолимфатического катетера на продолжительное время.

Так же известен способ усиления эффективности противоопухолевого действия химиопрепарата путем предварительного определения чувствительности опухоли к данному препарату.

При определении чувствительности адекватным методом, способ не имеет недостатков. Однако эффективность определяется не только чувствительностью опухоли к данному препарату, но и концентрацией химиопрепарата в опухоли, а также временем, в течение которого данная концентрация поддерживается.

Задачами настоящего изобретения является усиление эффективности противоопухолевого препарата, целью - снижение системной токсичности, увеличение терапевтической широты химиопрепаратов, уменьшение трудоемкости и количества осложнений, присущих аналогам.

Поставленная цель достигается тем, что в период, когда концентрация в крови химиопрепарата, введенного традиционным способом, чувствительность опухоли, к которому определена предварительно, максимальна, производится стимуляция процесса лимфообразование в физиологическом режиме одним из возможных способов с использованием биофизических (электромагнитное поле, гипербарическая оксигенация и др.), фармакологических (глюкоза, реополиглюкин, манитол, аскорбиновая кислота, прозерин и др.) и биомолекулярных (группа эндогенных морфинов и др.) факторов.

Пример 1. Усиление действия противоопухолевого химиопрепарата методом гипербарической оксигенации (ГБО).

В эксперименте использованы крысы самцы и самки породы Vistar разводки питомника "Столбовая" массой 180 г с перевитой под кожу живота карциномой PC-1 и карциносаркомы Уокера (КСУ). На 14 сутки после перевивки PC-1 и на 7 сутки после перевивки КСУ по достижению опухолями 5 мм в диаметре, животные 1 группы получили химиопрепарат в комбинации с сеансом гипербарической оксигенации при 2 ата в течение 60 мин. Контроль составили группы, в которых животные получили препарат без дополнительных воздействий (2 группа), сеанс гипербарической оксигенации (3 группа) и группа, в которой животные никаким воздействиям не подвергались (4 группа).

Из химиопрепаратов в работе использованы эмоксил в дозе 20 мг/м², 5-фторурацил в дозе 500 мг/м²и блеомицин в дозе 15 мг/м².

Об эффективности действия химиопрепарата судили по изменению темпа роста опухолей, продолжительности жизни экспериментальных животных, наличию метастатического поражения.

Для определения достоверности различий использовали вариационный и дискриминативный методы.

Результаты представлены в табл. 1-4
Как видно из представленных результатов в 3 группе, где животные получили сеанс гипероксии без дополнительных воздействий, а в качестве модели опухолевого процесса использовалась PC-1, отмечается значительное увеличение темпов роста опухолей. Так на 14 сутки эксперимента средний диаметр опухолей составил 21,9 ± 3,0 мм, в контрольной группе 13,6 ± 1,8 мм. К 21 суткам разница увеличилась еще больше: 30,0 ± 1,7 мм и 16,4 ± 1,8 мм соответственно. Средняя продолжительность жизни экспериментальных животных составила 12,7 дня, в то время, как в контрольной группе, где животные дополнительным воздействием не подвергались - 28,2 дня. В результате дискриминативного анализа установлено, что различие в темпах роста и продолжительностью жизни существенно (P > 99%)/
У животных с подкожно перевитой КСУ в результате сеанса гипероксии так же отмечено увеличение темпов роста опухолей. Так на 6 сутки средний диаметр опухолей в 3 группе составил 42,0 ± 1,9 мм, в то время, как в контрольной группе, где животные дополнительным воздействиям не подвергались 28,3 ± 2,9 мм. Полученная разница статически достоверна (P > 95%). При дальнейшем наблюдении указанная разница сохранилась. Средняя продолжительность жизни экспериментальных животных составила 11,3 дня, в то время, как в контрольной группе - 18,7 дней. При вскрытии павших животных установлено, что у трех из шести животных 3 группы отмечены множественные метастазы в легкие, и у двух - единичные. В контрольной группе у трех животных из шести отмечены единичные метастазы.

Полученные данные свидетельствуют о том, что гипероксия в указанном режиме приводит к увеличению темпов роста опухолей, сокращению жизни экспериментальных животных, а так же к усилению процессов метастазирования.

В группах, в которых животные с подкожно перевитой карциномой PC-1 получили эмоксил (табл. 1), отмечено значительное торможение темпов роста опухолей и увеличение продолжительности жизни в первой группе, где введение препарата сочеталось с сеансом гипероксии. Так на 14 сутки эксперимента средний диаметр опухолей в этой группе составил 6,9 ± 0,6 мм. В группе, где животные получили эмоксил без дополнительных воздействий средний диаметр опухолей составил 10,3 ± 1,8 мм. В дальнейшем указанная разница сохранилась и к 28 суткам средний диаметр опухолей в первой группе составил 10,0 ± 0,9 мм , а во второй 15,3 ± 2,4 мм. Средняя продолжительность жизни животных в этих группах составила 48,3 дней и 33,3 для соответственно. При дискриминативном анализе выявлено существенное различие между этими группами (P > 95-99%).

При моделировании опухолевого процесса КСУ (табл. 2), комбинированное введение эмоксила с гипероксией дало более выраженный эффект. Так на 6 сутки в первой группе средний диаметр составил 7,2 ± 0,8 мм, в то время как во второй группе 19,2 ± 1,9 мм, к 18 суткам 20,0 ± 1,9 мм и 36,9 ± 3,4 мм соответственно. Указанная разница достоверна (P > 95%, критерий t). Средняя продолжительность жизни в первой группе составила - 32,3 дня, во второй - 26,2 дня. При вскрытии павших животных метастазов в легкие не выявлено ни у одного животного, как в первой, так и во второй группе.

В группах, в которых животные с подкожно привитой карциномой PC-1, получили 5-фторурацил (табл. 3) введение препарата в сочетании с сеансом гипероксии так же привело к значительному торможению темпов роста опухолей и увеличению средней продолжительности жизни. На 14 сутки средний диаметр опухолей в первой группе, где животные получили 5-фторурацил в комбинации с сеансом гипероксии, составил 6,9 ± 1,5 мм. В группе, где животные получили 5-фторурацил без дополнительных воздействий средний диаметр опухолей составил 11,1 ± 2,7 мм. В дальнейшем указанная разница сохранилась. К 28 суткам средний диаметр опухолей в первой группе составил 11,1 ± 1,2 мм, а во второй 16,1 ± 3,7 мм. Средняя продолжительность жизни животных в первой группе составила 34,5 дня, во второй - 29,0 дней. При дискриминативном анализе выявлено существенное различие между этими группами (P > 95-99%), при этом различия между группой, в которой животные получили 5-фторурацил и группой в которой животные дополнительным воздействием не подвергались, оказались несущественными.

В группе, где животные получили 5-фторурацил, а в качестве модели опухолевого процесса использовалась КСУ (табл. 4) различия между средними диаметрами опухолей у животных первой и второй группы еще более выраженное (P > 95%, критерий t). При вскрытии павших животных метастазов в легкие не выявлено.

Исследование токсичности эмоксила в условиях гипероксии приведено в 2-х сериях.

В первой серии определена LD 50 эмоксила в условиях гипероксии на 20 интактных крысах-самцах. Животных разделами на 4 группы по 5 крыс в каждой. Эмоксил вводился внутрибрюшинно однократно в дозе: 1 группа - 4 мг/кг; 2 группа - 16 мг/кг; 3 группа - 64 мг/кг; 4 группа - 256 мг/кг. Статистическая обработка проводилась по методу Рида и Менча.

Анализ результатов показал, что LD 50 для эмоксила в условиях гипероксии составила 95 мг/кг.

Для сравнения во второй серии определена LD 50 эмоксила в условиях нормоксии на 20 интактных крысах-самцах. Животных разделили на 4 группы по 5 крыс в каждой. Эмоксил вводился внутрибрюшинно однократно в дозе: 1 группа - 4 мг/кг; 2 группа - 16 мг/кг; 3 группа - 64 мг/кг; 4 группа - 256 мг/кг. Статистическая обработка проводилась по методу Рида и Менча.

Анализ результатов показал, что LD составляет 53,3 мг/кг.

Исследование токсичности 5-фторурацила в условиях гипероксии показали следующее:
В первой серии определена LD 50 5-фторурацила в условиях гипероксии на 20 интактных крысах-самцах. Животных разделили на 4 группы по 5 крыс в каждой 5-фторурацил вводился внутрибрюшинно однократно в дозе: 3 группа - 6 мг/кг, 2 группа - 36 мг/кг; 3 группа - 216 мг/кг; 4 группа - 1296 мг/кг. Статистическая обработка проводилась по методу Рида и Менча.

Анализ результатов показал, что LD 50 для 5-фторурацила в комбинации с сеансом гипероксии составила 360,6 мг/кг.

Для сравнения во второй серии определена LD 50 5-фторурацила в условиях нормоксии на 20 интактных крысах-самцах. Животных разделили на 4 группы по 5 крыс в каждой 5-фторурацил вводился внутрибрюшинно однократно в дозе: 3 группа - 6 мг/кг; 2 группа - 36 мг/кг; 3 группа - 216 мг/кг; 4 группа - 3296 мг/кг. Статистическая обработка проводилась по методу Рида и Менча.

Анализ результатов показал, что LD 50 для 5-фторурацила составила 292,9 мг на кг.

Проводилось исследование влияния различных условий кислородного гомеостаза на фармакокинетику эмоксила.

В первой серии эксперимента изучена концентрация эмоксила в свободной брюшной полости после внутрибрюшинного введения. Исследование проведено на 54 беспородных крысах-самцах с подкожно перевитой какрциномой PC-1. Животных разделили на 3 группы по 38 в каждой. После введения эмоксила в дозе 20 мг/кг на 1,0 физраствора:
- животные первой группы получили сеанс гипероксии в течение 60 мин при одной избыточной атмосфере кислорода;
- животные второй группы получили сеанс гипоксии в течение 60 мин при содержании кислорода до вдыхаемой смеси - 8%;
- животные третьей группы дополнительным воздействиям не подвергались.

Забой производили ежечасно по 3 животных в каждой группе. Перед забоем в брюшную полость вводилось дополнительно 5,0 физиологического раствора. После забоя содержимое брюшной полости собиралось. Концентрация химиопрепарата определялась фотокалориметрированием. Шкала концентрации эмоксила была получена при растворении определенной массы химиопрепарата в известных объемах физиологического раствора.

В результате проведенного эксперимента установлено, что в первой группе, где животные получили эмоксил в комбинации с сеансом гипероксии химиопрепарат в брюшной полости не определялся уже после первого часа.

Во второй группе, где введение препарата сопровождалось сеансом гипоксии, в брюшной полости после первого часа оставалось около 70% химиопрепарата, после второго часа - около 20% препарата. После третьего часа собранная из свободной брюшной полости жидкость сохраняла слабо розовое окрашивание.

В третьей группе после первого часа в брюшной полости сохранялось около 40% препарата, к истечению второго часа химиопрепарат в брюшной полости не определялся.

Во второй серии эксперимента изучена концентрация эмоксила в месте введения при внутримышечном введении. Исследование проведено на 93 беспородных крысах-самцах с подкожно перевитой карциномой PC-1. Деление животных на группы и воздействие аналогично первой серии эксперимента, за исключением того, что препарат водился в бедренную мышцу.

Забой производился ежечасно по 3 животных в каждой группе. Бедренная мышца, в которую вводился препарат измельчалась, после чего растиралась в ступке с песком. Эмоксил извлекался 3,0 метанола. Шкала, по которой определялась концентрация химиопрепарата, была получена следующим образом. В контрольной группе первый забой был осуществлен непосредственно после введения препарата. Извлечение препарата было произведено по описанной выше методике. Таким образом, полученный раствор имел концентрацию соответствующую исходному количеству химиопрепарата. разведение данного раствора известным объемом метанола позволило создать остальные компоненты шкалы.

В результате проведенного эксперимента установлено, что в первой группе, где животные получили эмоксил в комбинации с сеансом гипероксии, после первого часа в месте введения оставалось около 50% исходного количества химиопрепарата. В дальнейшем отмечалось постепенное снижение концентрации. К 6 часу препарат практически не определялся.

Во второй группе, где введение препарата сопровождалось сеансом, гипоксии исходная концентрация химиопрепарата сохранялась около 3 ч, после чего отмечено постепенное снижение концентрации эмоксила. После десяти часов в вытяжке еще сохранялись следы препарата.

В третьей группе отмечено постепенное уменьшение концентрации химиопрепарата. К 9 часу препарат в вытяжке практически не определялся.

В третьей серии эксперимента изучена концентрация эмоксила в сердце, печени, почках, опухоли после внутрибрюшинного введения. Исследование проведено на 320 беспородных крысах самцах с подкожно перевитой карциномой PC-1. Деление животных на группы и воздействие соответствует первой серии эксперимента.

Забой производился ежечасно в первые шесть часов, в последующем каждые 12 ч по 3 животных в каждой группе. Органы для исследования извлекались и замораживались. Вытяжки приготовлены из 1 мг ткани, которая после предварительного измельчения, растиралась с песком. Эмоксил экстрагировался 1,0 метанола. Сложность определения концентрации химиопрепарата таким способом состояла в том, что в процессе извлечения эмоксила происходило его окисление, что явилось препятствием для определения концентраций эмоксила с помощью ВЭЖХ. Спектр продуктов окисления эмоксила соответствовал фону. О концентрации эмоксила косвенно можно судить по разнице в оптической плотности между вытяжкой из ткани, полученной от животного подвергнутого тому или иному воздействию и вытяжной из ткани, полученной от животных, которые никаким воздействиям не подвергались. Поскольку изменения оптической плотности при подобной постановке эксперимента могут быть обусловлены только наличием химиопрепарата и его метаболитов.

Результаты в единицах плотности представлены в табл. 5.

Так как интерес вызывает не столько сама концентрация химиопрепарата, сколько ее изменения в том или ином режиме, полученных данных вполне достаточно, чтобы составить представление об изменениях, происходящих в результате гипероксии, либо гипоксии. Следует также отметить, что в настоящее время ни один из используемых методов детекции эпоксила (радиоизотопные метод, метод парамагнитного ядерного резонанса) не позволяет отдифференцировать препарат от метаболитов. В табл. 6 представлены значения концентрации эмоксила (мг/мл), которые были получены при сравнении полученных данных со шкалой концентраций. Шкала может быть получена следующим образом: радиоизотопным методом и методом парамагнитного ядерного резонанса было установлено, что ко второму часу после внутривенного введения эмоксила в дозе 60 мг/кг здоровым животным концентрация химиопрепарата в сердце составила 0,005 мг/мл. Следовательно разница между оптической плотностью вытяжки, приготовленной из сердца крысы, забитой через 2 ч после введения эмоксила в дозе 60 мг/кг и оптической плотностью вытяжки, полученной из ткани сердца животных, которые дополнительным воздействиям не подвергались, будет соответствовать 0,005 мг/мл. Разведение вытяжки из тканей сердца, приготовленной по данной методике, известными объемами метанола позволило создать остальные компоненты шкалы концентрации.

Таким образом, в условиях гипероксии отмечена максимальная концентрация химиопрепарата в опухоли, при этом максимальная концентрация препарата в сердце, печени, почках отмечена только в течение первого часа с последующим снижением. К четвертому часу препарат практически не определяется, что готовит в пользу проведения сеанса ГБО в течение 60 мин для усиления действия химопрепарата.

Таким образом, гипероксия без химиотерапия достоверно увеличивает темпы роста опухолей, снижает продолжительность жизни экспериментальных животных. Комбинация гипероксии с химиотерапией позволяет достоверно снизить темпы роста опухолей и увеличить продолжительность жизни экспериментальных животных. Как показывают проведенные исследования, гипероксия в комбинации с химиопрепаратами, активность которых не увеличивается при повышенном pO₂, приводит к увеличению LD₅₀.

Пример 2. Исследование проводилось подобно примеру 1, но для усиления лимфообразования использовался препарат даларгин.

Результаты представлены в табл. 7 и табл. 12.

Как видно из представленных результатов в 3 группе, в которой животные получили даларгин без химиопрепарата, а в качестве модели опухолевого процесса использовалась PC-1, достоверного увеличения темпов роста опухолей не отмечено. Так на 7 сутки эксперимента средний диаметр опухолей составил 16,7 ± 3,7 мм, в контрольной группе 14,4 ± 2,1 мм. К 21 суткам средние диаметры составляли: 29,6 ± 2,2 мм и 26,7 ± 2,0 мм соответственно. Средняя продолжительность жизни экспериментальных животных в третьей группе составила 24,5 дня в контрольной группе, где животные дополнительным воздействиям не подвергались - 26,2 дня.

У животных с подкожно перевитой КСУ даларгин так же не вызвал увеличения темпов роста опухолей. Так на 6 сутки средней диаметр опухолей в 3 группе составил 21,4 ± 3,4 мм, в контрольной группе, где животные дополнительным воздействиям не подвергались 22,5 ± 2,8 мм. Средняя продолжительность жизни экспериментальных животных составила 15,5 дней, а в контрольной группе - 20,2 дней. При вскрытии павших животных установлено, что в двух из шести животных 3 группы отмечены множественные метастазы в легкие, и у одного - единичные. В контрольной группе у трех животных из шести отмечены единичные метастазы.

Полученные данные свидетельствуют о том, что даларгин в указанной дозе не приводит к увеличению темпов роста опухолей, однако может вызвать усиление процессов метастазирования. Вместе с тем продолжительность жизни экспериментальных животных может сокращаться.

В группах, в которых животные с подкожно перевитой PC-1 получили эмоксил (табл. 7), более выраженное торможение темпов роста опухолей отмечено в первой группе, где введение химиопрепарата сочеталось с введением даларгина. К 7 суткам средний диаметр опухолей в первой группе, где животные получили эмоксил в комбинации даларгином, составил 5,6 ± 0,8 мм. В группе, где животные получили эмоксил без дополнительных воздействий, средний диаметр опухолей составил 8,1 ± 1,5 мм. В дальнейшем указанная разница сохранялась до 21 суток, к которым средний диаметр опухолей в первой группе составил 12,8 ± 3,9 мм, а во второй 19,7 ± 2,2 мм. Средняя продолжительность жизни животных в первой группе составила 35,3 дня, во второй - 34,2 дня. При дискриминативном анализе выявлено существенное различие между этими группами (P > 95%).

При моделировании опухолевого процесса КСУ (табл. 8), введение эмоксила вместе с даларгином так же привело к более выраженному торможению темпов роста опухолей. Так на 6 сутки в первой группе средний диаметр составил 8,6 ± 2,0 мм в то время как во второй группе 14,0 ± 1,6 мм. Средняя продолжительность жизни составила 26,8 дней в первой и 25,3 во второй группах. В дальнейшем указанная разница сохранилась. О различиях между этими группами по результатам дискриминативного анализа можно готовить с вероятностью более 99%. При вскрытии павших животных метастазов в легкие не выявлено ни у одного животного, как в первый, так и во второй группе. можно говорить только между первой группой и группой, в которой животные дополнительным воздействиям не подвергались. Средняя продолжительность жизни животных в первой группе составила 29,3 дней, во второй - 23,2 дней.

При моделировании опухолевого процесса КСУ (табл. 12), комбинированное введение блеомицина с даларгином дало более выраженный эффект. Так вероятность различий между первой и второй группами составила более 95% при дискриминативном анализе. При вскрытии павших животных метастазов в легкие не выявлено.

Полученные результаты могут быть объяснены тем, что усиление процессов лимфообразования способствует повышению локальной концентрации химиопрепаратов, не увеличивая их активности. Наибольший эффект получен при использовании эмоксила, активность которого наибольшая, блеомицин же - наименее эффективный препарат из использованных, ниже и эффект от комбинации его с даларгином.

Таким образом, даларгин без химиотерапии не влияет на темпы роста опухолей, однако может приводит к усилению процессов метастазирования и некоторому сокращению продолжительности жизни экспериментальных животных. Комбинация даларгина с химиотерапией позволяет достоверно снизить темпы роста опухолей.

Пример 3. Исследование проводилось подобно примеру 1, но для усиления процессов лимфообразования использовался реополиглюкин, который вводился в течение 3 дней, вводили 10,0 реополиглюкина внутрибрюшинно.

Результаты представлены в табл. 13 и табл. 18.

Как видно из представленных результатов в 3 группе, где животные получили 10,0 реополиглюкина в течение 4 дней (включая эксперимент) без химиопрепарата, не отмечено ни достоверного увеличения, ни достоверного замедления темпов роста опухолей. Так на 7 сутки эксперимента средний диаметр опухолей составил 15,3 ± 3,0 мм, в контрольной группе 14,4 ± 2,1 мм. К 21 суткам средние диаметры составляли: 28,8 ± 2,7 мм и 26,7 ± 2,0 мм.

В группах, в которых животные получили 5-фторурацил (табл. 9) в качестве модели опухолевого процесса, использовалась PC-1 к 7 суткам средний диаметр опухолей в первой группе (в которой животные получили 5-фторурацил с даларгином), составил 9,2 ± 2,7 мм. В группе, в которой животные получили 5-фторурацил без дополнительных воздействий средний диаметр опухолей составил 12,2 ± 2,3 мм. Указанная разница не достоверна однако, недостоверна разница между второй группой и группой, в которой животные дополнительным воздействиям не подвергались. При сравнении первой группы и группы, в которой животные дополнительным воздействием не подвергались, вероятность различия между этими группами по данным дискриминативного анализа составила 95%. Начиная с 14 суток можно говорить о различии между первой и второй группами с вероятностью более 95%. Средний диаметр опухолей в первой группе составил 11,9 ± 2,4 мм, а во второй 17,5 ± 2,5 мм. В дальнейшем указанная разница сохранилась. Средняя продолжительность жизни животных в первой группе составила 30,3 дня, во второй - 28,0 дней.

В группах, в которой животные с перевитой подкожно КСУ получили 5-фторурацил (табл. 10), различие между первой и второй группой отмечается с 6 суток (P > 95%). При вскрытии павших животных метастазов в легкие не выявлено.

В группах, в которых животные получили блеомицин (табл. 11) в качестве модели опухолевого процесса, использовалась PC-1, к 14 суткам средний диаметр средний диаметр опухолей в первой группе (в которой животные получили 5-фторурацил с деларгином), составил 13,6 ± 1,8 мм. В группе, в которой животные получили блеомицин без дополнительных воздействий, средний диаметр опухолей составил 18,3 ± 3,6 мм. И в этом случае речь идет о существенности различий можно только при сравнении первой группы и группы, в которой животные дополнительным воздействиям не подвергались (по данным дискриминативного анализа P > 95%). Только на 21 сутки появляются различия между первой и второй группами. Средний диаметр опухолей в первой группе составил 17,7 ± 2,3 мм, а во второй 25,8 ± 2,8 мм. В дальнейшем о достоверности различий соответственно. Средняя продолжительность жизни экспериментальных животных в третьей группе составила 26,8 дня, в контрольной группе, где животные дополнительным воздействиям не подвергались - 26,2 дня.

У животных с подкожно перевитой КСУ реополиглюкин так же не вызывал увеличения темпов роста опухолей. Так на 6 сутки средний диаметр опухолей в 3 группе составил 23,9 ± 3,3 мм, в контрольной группе, где животные дополнительным воздействиям не подвергались 22,5 ± 2,8 мм. Средняя продолжительность жизни экспериментальных животных составила 19,7 дней, а в контрольной группе - 20,2 дней. При вскрытии павших животных установлено, что у двух из шести животных 3 группы отмечены единичные метастазы в легкие. В контрольной группе у трех животных из шести отмечены так же единичные метастазы.

Полученные данные свидетельствуют о том, что реополиглюкин не приводит к увеличению темпов роста опухолей, сокращению жизни экспериментальных животных, усилению процессов метастазирования.

В группах, в которой животные с подкожно перевитой карциномой PC-1 получили эмоксил (табл. 13) отмечено торможение темпов роста опухолей в первой группе, где введение химиопрепарата сочеталось с введением 10,0 реополиглюкина. На 7 сутки средний диаметр опухолей в первой группе, где животные получили эмоксил в комбинации с 10,0 реополиглюкина, составил 5,8 ± 0,8 мм. В группе, где животные получили эмоксил без дополнительных воздействий средний диаметр опухолей составил 8,1 ± 1,5 мм. Средняя продолжительность жизни животных в первой группе составила 34,7 дня, во второй - 34,2 дня. При дискриминативном анализе выявлено существенное различие между этими группами (P > 95%). В дальнейшем указанная разница сохранялась до 21 суток.

При моделировании опухолевого процесса КСУ (табл. 14) так же отмечены различия между средними диаметрами опухолей у животных первой и второй группы. Так на 6 сутки в первой группе средний диаметр 9,2 ± 3,3 мм, в то время как во второй группе 14,4 ± 1,6 мм. Средняя продолжительность жизни составила 26,0 дней в первой и 25,3 во второй группах. О достоверности различий можно готовить по дискриминативного анализа с вероятностью 95%. В дальнейшем указанная разница сохранялась до 14 суток. При вскрытии павших животных метастазов в легкие не выявлено ни у одного животного, как в первой, так и во второй группе.

В группе, где животные получили 5-фторурацил, а в качестве модели опухолевого процесса использовалась PC-1 (табл. 15) к 14 суткам средний диаметр опухолей в первой группе (где животные получили 5-фторурацил с 10,0 реополиглюкина), составил 13,1 ± 2,6 мм. В группе, где животные получили 5-фторурацил без дополнительных воздействий средний диаметр опухолей составил 17,5 ± 2,5 мм. Указанная разница не достоверна, однако недостоверна разница второй группой и группой, в которой животные дополнительным воздействиям не подвергались. При сравнении первой группы и группы, в которой животные дополнительным воздействиям не подвергались, вероятность различия между этими группами по данным дискриминативного анализа составила 95%. О различии между первой и второй группами можно готовить только на 21 сутки эксперимента, когда средний диаметр опухолей в первой группе составил 16,4 ± 3,1 мм, а во второй 19,3 ± 3,1 мм. Средняя продолжительность жизни животных в первой группе составила 29,5 дня, во второй - 28,0 дней.

В группах, в которой животные с подкожно перевитой карциносаркомой Уокера получили 5-фторурацил (табл. 16) различие между первой и второй группами более выражены (P > 95%). При вскрытии павших животных метастазов в легкие не выявлено.

В группах, животные получили блеомицин в качестве модели опухолевого процесса использовалась PC-1 (табл. 17) к 14 суткам средний диаметр опухолей в первой группе (где животные получили 5-фторурацил с 10,0 реополиглюкина), составил 14,4 ± 1,8 мм. В группе, где животные получили блеомицин без дополнительных воздействий средний диаметр опухолей составил 18,3 ± 3,6 мм. Указанная разница не достоверна, так же недостоверна разница между второй группой и группой, в которой животные дополнительным воздействиям не подвергались. Однако при сравнении первой группы и группы, в которой животные дополнительным воздействиям не подвергались по t критерию, вероятность различия между этими группами составила 95%. Только на 21 сутки появляются различия между первой и второй группами. Средний диаметр опухолей в первой группе составил 17,9 ± 2,5 мм, а во второй 25,8 ± 2,8 мм. В дальнейшем опять речь идет о различиях только между первой группой и группой, в которой животные дополнительным воздействиям не подвергались. Средняя продолжительность жизни животных в первой группе составила 27,2 дней, во второй - 23,2 дней.

В группах, в которой животные с подкожно перевитой карциносаркомой Уокера получили блеомицин (табл. 18), различия между первой и второй группами отмечены при дискриминативном анализе (P > 95%) только на 12 сутки. Так средний диаметр составил 23,3 ± 2,2 мм в первой группе и 29,4 ± 3,3 во второй. Средняя продолжительность жизни составила 18,7 и 17,5 соответственно. В дальнейшем различия между этими группами сохранились. При вскрытии павших животных метастазов в легкие не выявлено.

Таким образом, реополиглюкин не влияет ни на темпы роста опухолей, ни на продолжительность жизни экспериментальных животных, ни на процессы метастазирования. Комбинация реополиглюкина с химиотерапией позволяет снизить темпы роста.

Таким образом, стимуляция процессов лимфообразования без химиотерапии может приводит к увеличению темпа роста опухолей, снижению продолжительности жизни экспериментальных животных, а также к усилению процессов метастазирования. Комбинация стимуляции процессов лимфообразования и лимфооттока с химиотерапией позволяет достоверно снизить темпы роста опухолей и увеличить продолжительность жизни экспериментальных животных. Основным механизмом действия эффекта лимфостимуляции, независимо от способа, может быть только изменения микроциркуляции, приводящее к увеличению локальной концентрации химиопрепарата. Повышение эффективности химиотерапии не может быть объяснено ни свободно-радиальным действием т.к. изменениями вызванными данным действием при указанной интенсивности и экспозиции можно пренебречь, ни увеличение активности химиопрепаратов (в условиях гипероксии активность 5-фторурациа и эмоксила не увеличивается; даларгин и реополиглюкин не влияют на активность использованных в работе химиопрепаратов; реополиглюкин и даларгин не влияют на активность использованных в работе препаратов).

Преимуществом данного изобретения является сочетание снижения общей токсичности, со стимулированием процессов лимфообразования, что приводит к увеличению локальной концентрации химиопрепарата.

Противопоказания сходны с противопоказаниями аналогов - нечувствительность опухоли к химиотерапии.

Изобретение позволяет расширить показания к лекарственному лечению, снизить трудоемкость, избежать ряда осложнений, понизить системную токсичность, увеличить эффективность лекарственной терапии.

Способ, заключается в том, что в период, когда в крови сохраняется максимальная концентрация введенного традиционным способом химиопрепарата, к которому чувствительна опухоль осуществляют воздействие на организм фактора лимфостимуляции с использованием биофизических (электромагнитное поле, гипербарическая оксигенация и др.), фармакологических(глюкоза, реополиглюкин манитол, аскорбиновая кислота, прозерин и др.) и биомолекулярных факторов (группа эндогенных морфинов и др.). Преимуществом данного метода является сочетание повышенной эффективности химиопрепарата на фоне снижения общей токсичности, т.к. стимулирование процессов лимфообразования приводит к дезинтоксикации. Противопоказания сходны с противопоказаниями аналогов - нечувствительность опухоли к химиотерапии. Изобретение позволяет расширить показания к данному методу, снизить трудоемкость, избежать ряда осложнений; понизить системную токсичность 4 з.п.ф-лы, 18 табл. .

1. Способ усиления эффективности действия противоопухолевого препарата, к которому чувствительна данная опухоль, путем повышения локальной концентрации в опухоли, отличающийся тем, что определяют время достижения максимальной концентрации препарата в крови при введении его в организм и с учетом этого времени воздействуют на организм фактором лимфостимуляции. 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве фактора лимфостимуляции используют гипероксию. 3. Способ по пп.1 и 2, отличающийся тем, что воздействуют сеансом гипербарической оксигенации в течение 60 мин. 4. Способ по п.1, отличающийся тем, что воздействие осуществляют введением даларгина. 5. Способ по п.1, отличающийся тем, что воздействие осуществляют введением реополиглюкина.