СПОСОБ ОЦЕНКИ ТЯЖЕСТИ ОПГ-ГЕСТОЗА Российский патент 1999 года по МПК G01N33/68 G01N33/48 

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике ОПГ-гестоза, и может быть использовано для оценки степени тяжести ОПГ-гестоза.

Известен способ оценки степени тяжести позднего токсикоза, заключающийся в том, что в сыворотке крови определяют содержание мочевины, молекул средней массы, количество тромбоцитов в периферической крови. Степень тяжести определяют путем подсчета интоксикационного индекса токсикоза (ИИТ). ИИТ = (М • МСМ • 1000) : Т, где М - содержание мочевины в сыворотке крови в ммоль/л, МСМ - концентрация молекул средней массы в сыворотке крови при длине волны 280 нм. усл. Е.

Т - содержание тромбоцитов - х 10⁹/л.

При значении ИИТ до 5.5 - физиологическое течение беременности. В пределах 5.5 - 7.0 - компенсированные формы гестоза. Больше 7.0 - декомпенсированные формы гестоза (патент РФ 2021607 G 01 N 33/48//G 01 N 33/68. 1994 г. Левченко В.Г. Дубленников О.Б. Листаков В.И. Михайловичев О.Ю.)
Недостатком способа является низкая специфичность содержания тромбоцитов в периферической крови, концентрации средних молекул и мочевины в сыворотке крови для гестоза, что приводит к низкой точности способа. Также сложность и высокая стоимость метода.

Изобретение направлено на решение задачи повышения точности способа диагностики, его упрощения и удешевления.

Эта задача достигается за счет определения активности катепсина G в гепаринизированной плазме крови.

Способ осуществляют следующим образом:
у беременной из вены в пластмассовую пробирку забирают 5.0 мл крови, предварительно поместив в пробирку 25 мкл гепарина (5000 ед/мл) и 100 - 200 мкл физраствора. Пробирку закрывают, переворачивают несколько раз. Плазму получают центрифугированием.

Необходимые реактивы: 1) трис-HCl буфер; 2) N-benzoyl-l-tyrosine ethyl ester (BTEE); 3) метанол.

Ход определения: при 25 градусах по Цельсию в термостате держат буфер и субстрат. В контрольную кювету вносят два миллилитра буфера и один миллилитр субстрата. В рабочую кювету вносят 0.1 мл разбавленной в 10 раз физраствором гепариновой плазмы крови, добавляют 1.9 мл буфера и 1.0 мл субстрата. Пробу и контроль интенсивно перемешивают.

За приростом оптической плотности следят при 256 нм в течение 4 мин, делая отсчеты через 1 минуту. Активность катепсина G определяют по определенной формуле и выражают в мкмоль гидролизованного субстрата за одну минуту на 1.0 мл плазмы (мкмоль/мл/мин).

Полученные результаты.

При значении активности катепсина G (BTEE) - 12 - 10 мкмоль/мл/мин - физиологическое течение беременности.

При активности катепсина G (BTEE) в пределах 10 - 8 мкмоль/мл/мин - ОПГ-гестоз легкой степени тяжести.

При активности катепсина G (BTEE) в пределах 8 - 6 мкмоль/мл/мин - ОПГ-гестоз средней степени тяжести. При активности катепсина G (BTEE) ниже 6 мкмоль/мл/мин - ОПГ - тяжелый гестоз.

Примеры практического применения:
Пример 1: Беременная А. , 25 лет, поступила в родильное отделение для подготовки к родам. При поступлении жалоб не предъявляет. Артериальное давление 110/70 мм рт.ст., отеков нет, протеинурии нет, ранее при данной беременности признаков ОПГ-гестоза не отмечалось, гипотрофии плода нет. Через пять дней после госпитализации началась родовая деятельность, роды завершились без осложнений рождением живого доношенного плода весом 3700.0 по Апгар 8 - 9 баллов. Послеродовый период протекал без осложнений. Активность катепсина G (BTEE) - 12 мкмоль/мл/мин.

Дз: Роды 1 срочные физиологические.

Пример 2: Беременная Б., 30 лет, поступила в родильное отделение для подготовки к родам. При поступлении жалобы на общую слабость. Других жалоб нет. Артериальное давление 135/90 мм. рт. ст. Отеки на голенях. Протеинурия 0.066 промили. Признаки ОПГ-гестоза появились с 37 нед. Гипотрофии плода нет. Фоновых заболеваний нет. Через 3 дня с момента госпитализации произошли роды живым доношенным плодом весом 3650.0 по Апгар 8 - 9 баллов. Послеродовый период протекал без осложнений. Активность катепсина G (BTEE) - 9.8 мкмоль/мл/мин.

Дз: Роды 2 срочные. ОПГ-гестоз легкой степени тяжести.

Пример 3: Беременная В., 27 лет, поступила в родильное отделение для подготовки к родам. При поступлении жалобы на общую слабость, боли в пояснице. Артериальное давление 140/100 мм. рт. ст. Отеки на голенях и брюшной стенке. Протеинурия 1.66 промили. Признаки гестоза появились с 32 нед. Имеется гипотрофия плода, задержка на 2 недели. Фоновых заболеваний нет. Через 2 дня индуцированная родовая деятельность закончилась рождением живого плода весом 2600.0 по Апгар 6 - 7 баллов. В послеродовом периоде проводилась гипотензивная терапия. Послеродовый период осложнился эндометритом. Активность катепсина G (BTEE) - 7.6 мкмоль/мл/мин.

Дз: Роды 1 срочные. ОПГ-гестоз средней тяжести. Гипотрофия плода. Послеродовый эндометрит.

Пример 4: Беременная Г., 29 лет, доставлена санитарной авиацией в состоянии глубокой медикаментозной седации. При поступлении жалобы на тяжесть в голове, боли в эпигастрии, рвота. Артериальное давление 185/120 мм. рт. ст. Генерализованные отеки. Протеинурия 3.3 промили. Признаки гестоза появились с 28 недель. Имеется гипотрофия плода, отставание на 3 недели. Из фоновых заболеваний имеется хр. пиелонефрит. Беременная родоразрешена экстренно путем кесарева сечения. Извлечен плод весом 1780.0 по Апгар 5 - 6 баллов, в раннем неонатальном периоде проводились реанимационные мероприятия. Родильница в послеродовом периоде получала интенсивную посиндромную терапию, включая противосудорожные препараты. Активность катепсина G (BTEE) - 6.0 мкмоль/мл/мин.

Дз: Роды 1 преждевременные оперативные в 33 нед. Тяжелый гестоз. Преэклампсия. Внутриутробная гипоксия, гипотрофия плода.

Пример 5: Беременная Д, 31 год, доставлена санитарной авиацией с жалобами на чувство удушья, слабость, отсутствие шевеления плода. У беременной генерализованные отеки. Протеинурия 0.033 промили. Артериальное давление 110/70 мм. рт. ст. Признаки гестоза появились с 37 нед. Гипотрофии плода нет. Из фоновых заболеваний имеется нарушение липидного обмена 2-3 ст. Объективно у больной шумное дыхание, одышка до 40 в минуту. Активность катепсина G (BTEE) - 5.9 мкмоль/мл/мин. При наличии активности катепсина G, соответствующей тяжелому гестозу, а также дыхательной недостаточности беременная родоразрешена путем кесарева сечения. Извлечен плод весом 3450.0 по Апгар 3 - 4 балла, в раннем неонатальном периоде проведены реанимационные мероприятия. В послеродовом периоде женщине назначена продленная ИВЛ, в дальнейшем интенсивная посиндромная терапия. Дыхательная недостаточность, развившаяся на фоне беременности, в послеродовом периоде не имела места.

Дз: Роды 2 срочные оперативные. Тяжелый гестоз. Угрожающая асфиксия плода. Нарушение липидного обмена 2-3 ст.

Пример 6: Беременная У, 23 года, поступила для подготовки к родам. На момент поступления жалоб не предъявляет. Отеков нет. Протеинурия 0.099 промили. Артериальное давление 120/90 мм. рт. ст. (при рабочем 90/60 мм. рт. ст. ) Признаки гестоза с 36 недель. Гипотрофия плода есть, отставание на 2 нед. Фоновых заболеваний нет. Допплерометрия выявила критический кровоток в артерии пуповины плода. В течение суток с момента поступления беременная стала отмечать головную боль, появилась мерцательная скатома, рвота и боли в эпигастрии. Активность катепсина G (BTEE) - 5.8 мкмоль/мл/мин. Беременная родоразрешена в экстренном порядке. Извлечен плод весом 2700.0 по Апгар 5 - 7 баллов, в раннем неонатальном периоде проведена интенсивная терапия. В послеродовом периоде родильнице проведена интенсивная посиндромная терапия, включая противосудорожные препараты.

Положительный эффект: преимущества заявляемого способа заключаются в его технической простоте, отсутствии необходимости использования сложной аппаратуры, дорогостоящих реактивов, специально обученного персонала.

Способ обладает высокой специфичностью - 83.4% и информативностью - 98.1%о

Способ используется в медицине, а именное в лабораторной диагностике. У беременной из вены забирают 5,0 мл крови, предварительно поместив в пробирку гепарин и физраствор. При помощи центрифугирования получают плазму и определяют в ней активность катепсина G. При значении активности катепсина G 10,0 - 8,0 мкмоль/мин/мл определяют ОПГ-гестоз легкой степени, 8,0 - 6,0 мкмоль/мин/мл - гестоз средней степени, при величине меньше 6,0 кмоль/мин/мл - тяжелый гестоз. Способ обеспечивает его упрощение и удешевление, повышение точности, специфичности (до 83,4%) и информативности (до 98,1%).

Способ оценки тяжести ОПГ-гестоза путем исследования периферической крови, отличающийся тем, что в гепаринизированной плазме крови определяют активность катепсина G и при его значении 10,0 - 8,0 мкмоль/мин/мл определяют ОПГ-гестоз легкой степени, 8,0 - 6,0 мкмоль/мин/мл - гестоз средней степени, а при значении меньше 6,0 мкмоль/мин/мл - тяжелый гестоз.