5-ГИДРОКСИНИКОТИНАТ МАГНИЯ, ОБЛАДАЮЩИЙ КОМПЛЕКСНЫМ АНТИДИАБЕТИЧЕСКИМ ДЕЙСТВИЕМ Российский патент 1999 года по МПК C07D213/80 A61K31/455 

Изобретение относится к новым биологически активным соединениям, конкретно - магниевой соли 5-гидроксиникотиновой кислоты формулы

обладающей при пероральном применении комплексной антидиабетической активностью: вещество у диабетированных крыс проявляет не только высокий сахароснижающий и гиполипидемический эффекты, но и обладает биоантиоксидантным действием, нормализуя содержание продуктов перекисного окисления липидов в эритроцитах, а также оказывает протекторный эффект в дебюте экспериментального диабета.

Указанные свойства позволяют предполагать возможность применения этого соединения в качестве лекарственного препарата при инсулинзависимом и инсулиннезависимом сахарном диабете для коррекции метаболических нарушений, профилактики и лечения ангио-нейропатий, а также в качестве протекторного средства в дебюте инсулинзависимого диабета.

Из известных сахароснижающих средств по типу сахароснижающего (антигипергликемического) эффекта и наличию сопутствующего гиполипидемического действия наиболее близок к заявляемому веществу глюкофаг (М.Д. Машковский "Лекарственные средства", т. 1, М., Медицина 1987, с. 563), относящийся к классу бигуанидов, использование которых резко ограничено в большинстве стран мира из-за возможности развития побочных токсических эффектов.

Цель изобретения - поиск и синтез новых соединений, обладающих комплексным антидиабетическим действием и низкой токсичностью.

Поставленная цель достигается получением нового соединения I взаимодействием 5 - гидроксиникотиновой кислоты с оксидом магния в водной среде при нагревании.

Соединение представляет собой белое порошкообразное вещество, малорастворимое в воде и диметилсульфоксиде.

Пример 1. К суспензии 2,08 г (0,015 мол) 5-гидроксиникотиновой кислоты в 11 мл воды добавляют 0,3 г (0,0075 мол) оксида магния, перемешивают при 95-98^oC в течение 5 минут. Реакционную массу фильтруют, охлаждают до 5-7^oC, выпавший осадок отделяют, сушат, получают 1,98 г (выход 71,0% от теоретического) тетрагидрата 5-гидроксиникотината магния. Т.разлож. свыше 300^oC.

Найдено, %: C 38,87; H 4,28; N 7,48; C₁₂H₁₆N₂O₁₀Mg.

Вычислено, %: C 38,70; H 4,30; N 7,54.

ИК-спектр, см^-1: 3500, 3450, 3350, 1660, 1610, 1575, 1295, 1260, 1160.

УФ-спектр, нм: 290.

Пример 2. Исследование антидиабетических свойств 5-гидроксиникотината магния I.

Определение острой токсичности.

В опытах на белых мышах массой 18-20 г изучена острая токсичность в условиях внутрибрюшинного и внутрижелудочного введения, наблюдение за животными проводили в течение 1 недели. Установлено, что ЛД₅₀ I, рассчитанная по методу Личфильда и Уилкоксона, составила при внутрибрюшинном введении 1600 (1471-1739) мг/кг; ЛД₁₆ - 1396 мг/кг, ЛД₈₄ - 1804 мг/кг. ЛД₅₀ при внутрижелудочном введении I превышала 5000 мг/кг. Полученные данные свидетельствуют о низкой токсичности заявляемого соединения.

Методы изучения антидиабетического действия.

Исследование проведено на диабетированных крысах линии Вистар массой 200-300 г. Диабет вызывали однократным внутривенным введением стрептозотоцина (кооп. "Синтез" при ИМВГ АН Украины) в дозе 50 мг/кг. Антидиабетический эффект оценивали по сахароснижающему, гиполипидемическому действию, а также по нормализующему влиянию на содержание продуктов перекисного окисления липидов в эритроцитах. В качестве препарата сравнения использовали глюкофаг.

Сахароснижающую активность изучали по изменению уровня глюкозы в крови, которую определяли о-толуидиновым методом. Гиполипидемическое действие оценивали по влиянию на уровень в сыворотке крови общего холестерина и триглицеридов. Содержание холестерина определяли методом Илька по цветной реакции Либермана-Бурхарда, содержание триглицеридов исследовали ацетил-ацетоновым методом. Состояние процессов перекисного окисления липидов оценивали по содержанию в эритроцитах диеновых конъюгатов, кетодиенов и сопряженных триенов, которые определяли спектрофотометрически.

Во всех опытах вещества вводили крысам внутрижелудочно в крахмальном геле из расчета 1 мл на 200 г массы тела.

1. Сахароснижающий эффект.

Как видно из таблицы 1, сахароснижающее действие I в условиях его однократного применения в дозе 100 мг/кг значительно превосходит эффект эталонного препарата глюкофага. Через 5 часов после внутрижелудочного введения I уровень глюкозы в крови в 2 раза ниже, чем у контрольных диабетированных крыс, глюкофаг в тех же условиях снижал уровень глюкозы примерно на 10%.

Уменьшение дозы I до 50 мг/кг (таблица 2) не сопровождается существенным снижением его сахароснижающего действия, глюкофаг в дозе 50 мг/кг не обладает сахароснижающим эффектом.

В таблице 3 приведены данные по динамике изменений уровня глюкозы в крови диабетированнных крыс при ежедневном внутрижелудочном применении I и глюкофага в течение 2 недель в дебюте экспериментального диабета. Введение препаратов начато через неделю после индукции диабета стрептозотоцином (до стабилизации уровня гипергликемии, которая обычно наблюдается у нелеченных крыс через 2-3 недели после введения стрептозотоцина).

Как видно из таблицы 3, уровень глюкозы в крови у крыс, получавших в течение одной недели I, не увеличился в отличие от контрольных животных и крыс, получавших глюкофаг, содержание глюкозы в крови у которых повысилось примерно в 1,5 раза. После 2-недельного применения препаратов нарастание глюкозы в крови у крыс, получавших I, выражено в значительно меньшей степени, чем у контрольных животных и крыс, получавших глюкофаг. Полученные данные позволяют считать, что I, но не глюкофаг, при повторном применении оказывает защитное действие от повреждающего эффекта стрептозотоцина на функцию β-клеток.

Таким образом, результаты сравнительного изучения сахароснижающей активности I и глюкофага у диабетированных крыс свидетельствуют о том, что I имеет значительные преимущества перед эталонным препаратом глюкофагом: I превосходит глюкофаг по сахароснижающему действию и, в отличие от последнего, тормозит развитие диабета, индуцированного стрептозотоцином, т.е. оказывает протекторный эффект в дебюте экспериментального диабета.

2. Гиполипидемическое действие.

Как видно из таблицы 4, у диабетированных крыс содержание липидов в крови существенно выше, чем у интактных животных. После ежедневного введения I в суточной дозе 100 мг/кг в течение 3 недель диабетированным крысам уровень общего холестерина и триглицеридов в сыворотке крови снижается примерно на 30%. В тех же условиях при действии глюкофага отмечается лишь тенденция к уменьшению указанных показателей.

Полученные данные свидетельствуют о том, что у диабетированных крыс I значительно превосходит глюкофаг по гиполипидемической активности.

3. Нормализующее действие на процессы перекисного окисления липидов (ПОЛ).

Из таблицы 5 следует, что содержание диеновых конъюгатов, кетодиенов и сопряженных триенов в эритроцитах диабетированных крыс в 1,5 раза выше, чем у интактных животных. В условиях повторного ежедневного применения I диабетированным крысам уровень изученных продуктов ПОЛ полностью нормализуется, что позволяет полагать, что I проявляет у диабетированных животных высокое биоантиоксидантное действие. Повидимому, протекторный эффект I обусловлен его антиоксидантной активностью.

Таким образом, заявляемое соединение I при пероральном применении обладает комплексным антидиабетическим действием, превосходит по сахароснижающей и гиполипидемической активности препарат сравнения глюкофаг и, в отличие от последнего, оказывает протекторный эффект в дебюте экспериментального диабета. Кроме того, I обладает высокой биоантиоксидантной активностью, нормализуя содержание продуктов ПОЛ в эритроцитах.

Заявляемое вещество значительно менее токсично, чем глюкофаг: при внутрибрюшинном введении I ЛД₅₀ составляет 1600 мг/кг, глюкофага - 400 мг/кг.

Изобретение относится к новому 5-гидроксиникотинату магния ф-лы (I), C₁₂H₁₆N₂O₁₀Mg, т. разлож. свыше 300^oC. В эксперименте на диабетированных животных соединение (I) проявило комплексное антидиабетическое действие, заключающееся в нормализации уровня сахара и липидов в крови, а также оказывает нормализующее действие на процессы перекисного окисления липидов. LD₅₀ соединения (I) составляет 1600 мг/кг. Соединение (I) получают взаимодействием 5-гидроксиникотиновой кислоты с оксидом магния. 5 табл.

5-Гидроксиникотинат магния формулы

обладающий при пероральном применении комплексным антидиабетическим действием.