ПРОТИВОЯЗВЕННОЕ СРЕДСТВО И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ Российский патент 1999 года по МПК A61K35/78 

Изобретение относится к области медицины, конкретно к гастроэнтерологии, и может быть использовано для лечения больных с язвенной болезнью.

Известен противоязвенный препарат природного происхождения бефунгин - экстракт чаги [1].

Наиболее близким к предлагаемому изобретению - прототипом является препарат плантаглюцид - экстракт листьев подорожника [2].

Однако в настоящее время вопрос расширения арсенала средств, обладающих противоязвенным действием, из природного сырья является чрезвычайно актуальным.

Задачей, решаемой изобретением, является расширение арсенала средств с противоязвенной активностью из природного сырья, обладающих высокой специфической активностью.

Поставленная задача достигается тем, что противоязвенное средство содержит вытяжку из листьев лопуха при следующем соотношении компонентов в %: листья лопуха - 5, этиловый спирт 40% - 95.

Предлагаемое средство отличается тем, что оно содержит вытяжку из листьев лопуха в следующем соотношении компонентов в %:
листья лопуха - 5
этиловый спирт 40% - 95
Данное средство (настойка листьев лопуха) представляет собой прозрачную коричневую жидкость с приятным терпким запахом и сладковатым вкусом.

Авторы не нашли в проанализированной ими литературе данных отличительных признаков. Данная совокупность отличительных признаков явным образом не следует для специалиста. Предлагаемое средство можно использовать в медицинской практике.

Таким образом, предлагаемое решение соответствует критериям изобретения - "новизна", "изобретательский уровень", "промышленно применимо".

Известен способ получения противоязвенного средства плантаглюцида путем экстракции измельченного листа подорожника большого водой, нагретой до 90 - 95^oC в соотношении 1:10, кипячения в течение 20 - 25 мин, настаивания в течении 3 - 4 часов, фильтрации водного экстракта и его упаривания при температуре 65 - 75^oC до 1/10 первоначального объема, осаждения комплекса водорастворимых веществ из упаренного экстракта 3-кратным количеством этанола, высушивания при температуре 50 - 60^oC до содержания влаги не более 10% [3].

Однако данный способ обладает рядом недостатков: многостадийность, сложность в исполнении.

Задачей, решаемой изобретением, является упрощение способа.

Поставленная задача достигается тем, что согласно способу получения противоязвенного средства, листья лопуха измельчают, экстрагируют их 40% этиловым спиртом при соотношении сырье : экстрагент - 1:20, настаивают в течение 7 - 10 дней при комнатной температуре, фильтруют и доводят извлечение до первоначального объема.

Новым является то, что в качестве растительного сырья используют измельченные листья лопуха, экстракцию проводят 40% этиловым спиртом при соотношении сырье : экстрагент - 1:20, настаивают в течение 7 - 10 дней при комнатной температуре, фильтруют и доводят извлечение до первоначального объема.

Авторы не нашли в проанализированной ими литературе данной совокупности отличительных признаков и из уровня техники она не следует явным образом для специалиста. Предлагаемый способ может быть использован для получения противоязвенного средства из листьев лопуха.

Таким образом, данное техническое решение соответствует критериям изобретения: "новизна", "изобретательский уровень", "промышленно применимо".

Предлагаемое противоязвенное средство получают следующим образом: собранные и высушенные листья лопуха измельчают до 3 мм, измельченные листья лопуха экстрагируют 40% этиловым спиртом в соотношении сырье : экстрагент - 1: 20, настаивают при комнатной температуре в течение 7 - 10 дней при периодическом помешивании, затем вытяжку фильтруют, сырье хорошо отжимают, измеряют объем полученного извлечения, шрот еще раз промывают экстрагентом в количестве, равном недостающему объему извлечения, и обе порции объединяют.

Использование листьев лопуха и новых приемов технологии позволило снизить трудоемкость способа, упростить технический процесс получения предлагаемого противоязвенного средства.

Измельченное сырье настаивают в течение 7 - 10 дней, т.к. в этот промежуток времени достигается максимальное извлечение действующих веществ. Менее 7 дней этого не происходит, более 10 - не целесообразно, т.к. концентрация действующих веществ не изменяется. Для получения предлагаемого средства использовали 40% этиловый спирт, т.к. эта концентрация обеспечивает большую микробиологическую устойчивость препаратов в процессе настаивания по сравнению с 20% этанолом и меньший расход этилового спирта по сравнению с 60% и 80%. Соотношение сырье : экстрагент - 1:20, т.е. 5% концентрация была выбрана экспериментально и является оптимальной. Данное соотношение обеспечивает высокую противоязвенную активность при рациональном расходе сырья.

Конкретный пример выполнения способа.

Собранные и высушенные листья лопуха измельчают до 3 мм, 50 г измельченных листьев лопуха заливают до 1000 мл 40% этиловым спиртом и настаивают в течение 7 дней при комнатной температуре, периодически помешивая, затем фильтруют через фильтровальную бумагу и измеряют объем извлечения. Он был равен 867 мл. Сырье хорошо отжимают, заливают шрот недостающим количеством экстрагента (133 мл) и еще раз отжимают, доводят извлечение до первоначального объема (1000 мл) 40% этиловым спиртом. Настойку хранят в прохладном темном месте. Противоязвенные свойства предлагаемого средства подтверждено экспериментально.

В качестве препаратов сравнения использовали плантаглюцид (прототип) - 250 мг/кг, бефунгин - 1,0 мл/кг, экстракт левзеи жидкий - 10 мл/кг [4].

Полученные результаты обрабатывали статистически, методами непараметрической и параметрической статистики. Для количественных характеристик использовали метод Вилкоксона-Манна-Уитни и метод Стьюдента, для качественных - метод углового преобразования Фишера [5].

Предлагаемое нами средство и препараты сравнения вводились в течение 5 дней однократно, последнее введение - за 1 ч до ульцерогенного воздействия. Через сутки животных забивали методом дислокации шейного отдела позвоночника, извлекали желудок, разрезали его по большой кривизне и с помощью лупы подсчитывали количество крупных (> 1 мм), точечных (< 1 мм), полосовидных язв, геморрагий и определяли степень гиперемии слизистой желудка по 3-балльной системе. Язвы нейрогенного происхождения получали путем стресс-подвешивания мышей за шейную складку на 18 - 22 ч по методу Добрякова [6]. Основные критерии эффективности: процент погибших животных, процент животных с язвами, степень изъязвления (число язв на одно животное в группе), индекс Паулса (степень изъязвления • процент животных с язвами / 100%), противоязвенная активность (индекс Паулса в контроле/ на индекс Паулса в группе). Острое повреждение желудка вызывали методом резерпинизации животных [7]. После курсового введения исследуемых препаратов мышам внутрибрюшинно вводили 2,5 мг/кг резерпина в водном растворе с последующим охлаждением до 7 градусов по Цельсию в течение 2 часов. Повреждение желудка по Shay et al. заключается в полной перевязке лигатурой пилорической части желудка крыс на 24 часа до момента вскрытия [8]. Субхроническое повреждение слизистой оболочки желудка вызывали внутримышечным введением белым крысам 300 мг/кг бутадиона в виде 15% взвеси на ацетоне через час после последнего введения фитопрепарата [9] ; введением кислоты ацетилсалициловой по 128 мг/кг белым крысам внутрижелудочно в течение суток дважды с интервалом в четыре часа [10]. За один час до второго введения аспирина животные получали исследуемые препараты и растительное средство. Хроническую ацетатную язву моделировали на крысах линии Wistar с исходной массой 200 - 250 г. Под эфирным наркозом в подсерозный слой передней стенки желудка вводили 0,05 мл 10% раствора уксусной кислоты [11] . Растительное средство и препарат сравнения вводили внутрижелудочно ежедневно, начиная с первого дня после индуцирования язвы, в течение 14 дней. Животных выводили из эксперимента на 7, 14, 21 сутки от начала опыта. Эффективность терапии оценивали по количеству выживших животных, площади язв и индексу заживления PR [12] : PR - 100 • (C - S), где C - площадь язв в предыдущей контрольной точке, S - площадь язв в последней контрольной точке.

При остром стрессе язвы желудка являются одним из ведущих показателей. Нейрогенный характер язвообразования по своим патофизиологическим параметрам и происхождению наиболее близок к язвенной болезни желудка человека. В этих условиях экстракт левзеи практически не проявил активности, отмечалась лишь тенденция к уменьшению степени изъязвления и индекса Паулса под действием препарата (табл. 1). Предлагаемое нами средство из листа лопуха в дозах 1,5; 1,0 мл/кг достоверно снижало общее количество язв в 2,1; 2,4 раза соответственно. Ленточные язвы отсутствовали у мышей, которым вводилась настойка в дозах 1,0; 1,5; 2,5 мл/кг.

На модели острой язвы желудка, вызванной резерпином у мышей, под действием растительного средства из листьев лопуха наблюдали незначительный противоязвенный эффект от 1,2 до 1,9 (табл. 2).

На модели повреждения желудка с перевязанным привратником по Shey выявлено, что бефунгин проявляет слабую противоязвенную активность, хотя число крупных и ленточных деструкций уменьшалось в 2,5 - 7,5 раза (табл. 3). Предлагаемое растительное средство - настойка листьев лопуха снижала среднюю степень изъязвления желудка на 64% за счет сокращения в 2,8 раза количества мелких язв, противоязвенная активность составила 2,8.

Сравнительная оценка защитного действия растительного средства с известным препаратом сравнения плантаглюцидом на модели "аспириновой" язвы показало, что гастропротективное действие настойки листьев лопуха не уступает по эффективности последнему. Фармакологический эффект предлагаемого нами средства реализовался в плане ограничения числа мелких и крупных язв при его введении во всех исследуемых дозах (табл. 4).

Препарат сравнения бефунгин на модели бутадионового повреждения слизистой оболочки желудка проявил умеренную антиульцерогенную активность (табл. 5). Среднее число деструкций под действием бефунгина снизилась на 24%, при этом менее выражена тяжесть язвенного повреждения: в 1,9 раза снизилось количество крупных язв и на 45,6% сократилась площадь язвенного дефекта. Предлагаемое нами растительное средство - настойка из листьев лопуха во всех исследуемых дозах оказывало защитное действие на слизистую оболочку желудка, предотвращая развитие мелких и крупных язв в 1,6 - 2,6 раза, в результате чего снижалась общая степень изъязвления на 37 - 57% и общая площадь язвенных деструкций - на 42 - 72% в зависимости от дозы по сравнению с контрольной группой. Гастрозащитный эффект составил 1,6 (1,0 мл/кг), 2,3 (2,5 мл/кг).

Противоязвенное действие растительного средства настойки из листьев лопуха на моделях острых и субхронических повреждений желудка не вызывает сомнений. Наиболее адекватная информация о действительной эффективности исследуемых препаратов может быть получена на модели хронического патологического процесса. Одной из таких моделей является ацетатная язва желудка. Под влиянием препарата сравнения плантаглюцида на 7 сутки крупные язвы зафиксированы у 50% животных, общая площадь их имела тенденцию к снижению - 40,3% по сравнению с контролем (табл. 6). Нарушение гладкой мускулатуры происходило у 33% крыс. На 14 сутки достоверно в 9,8 раз снижалась площадь язв, на 21 день - лишь тенденция. Под влиянием предлагаемого растительного средства из листьев лопуха на 7 сутки не зарегистрированы животные с нарушенным тонусом кишечника, достоверно этот показатель был ниже на 14 и 21 сутки (табл. 7). На 14 сутки в 4,2 раза было меньше животных с крупными язвами, площадь язв сокращалась в 31,2 раза, индекс заживления - 94,3%. На 21 сутки под действием предлагаемого растительного средства настойки из листьев лопуха у животных язвы отсутствовали, индекс заживления - 100%.

Таким образом, предлагаемое нами средство обладает выраженной противоязвенной активностью. При сравнении с известным препаратом плантаглюцидом (прототип) и бефунгином, а также с психостимулирующим препаратом - экстрактом левзеи жидким, предлагаемое нами средство из семянок лопуха не уступает по эффективности, а в ряде случаев и превосходит их.

Использование спиртовой настойки из листьев лопуха позволит расширить арсенал противоязвенных средств природного происхождения, повысить эффективность лечения путем снижения степени изъязвления слизистой желудка.

Список литературы
1. Муравьев И.А. Технология лекарств. Т. 1. - М.: Медицина, 1980. - 704 с.

2. Машковский М.Д. Лекарственные средства: Т. 1. - М.: Медицина, 1986. - 624 с.

3. Технология лекарственных форм. Т. 2/Р.В. Бобылев, Г.П. Грядунова, Л. А. Иванова и др.; Под редакцией Л.А. Ивановой. - М.: Медицина, 1991. - 544 с.

4. Государственная Фармакопея СССР. Вып. 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье /МЗ СССР. - XI издания: Медицина, 1989. - 400 с.

5. Гублер Е.В. Вычислительные методы анализа и распознавания патологических процессов. - М.: Медицина, 1978. - 293 с.

6. Добряков Ю. И. Скрининговый метод оценки антистрессорного действия препаратов // Стресс и адаптация: Тез. Всесоюз. симпозиума. - Кишинев, 1978. - с. 172.

7. Барнаулов О.Д. и др. Сравнительная оценка влияния некоторых флаваноидов на альтерацию стенки желудка у резерпинизированных или иммобилизированных мышей/ О.Д. Барнаулов, О.А. Маничева, Н.Ф. Комиссаренко. - Хим.-фарм. журнал, 1983. - N 8. - С. 946 - 951.

8. A. single metod for the uniform production of gastic ulceration in the rat /Chay Y., Komarov S.A., Fels S.S. et al// Gastroenterologie. - 1945. - Vol. 5, N 1. - P. 43 - 61
9. Барнаулов О. Д., Денисенко Т.П. Противоязвенное действие отваров из цветков лабазника вязолистного /Фармакол. и токсикол. - 1980. - С. 700 - 704.

10. Оболенцева Г.В., Хаджай Я.И. О влиянии некоторых природных полисахаридов на дистрофические процессы в желудке //Фармакологическая регуляция обменных процессов: Тез.докл.республ.конфер. - Л., 1972 - С. 121 - 122
11. Буданцева С. И. Сравнительная оценка терапевтической эффективности некоторых лекарственных веществ при экспериментальных длительно незаживающих язвах желудка: Автореф,дисс...канд.мед.наук - Рязань, 1973. - 15 с.

12. Antigastric ulcer chalkone ethers /K.Kyogoky, K.Hatayama, B. Yokomori et al.// Патент 1445779. - Великобритания, 1976. - МКН: C 07 C 49184, A 61 K 31/12С

Изобретение относится к области медицины. Средство содержит вытяжку из листьев лопуха в следующих соотношениях компонентов, %: вытяжка листьев лопуха 5, этиловый спирт 40% - 95. Измельчают собранные и высушенные листья лопуха до 3 мм, экстрагируют 40%-ным этиловым спиртом в соотношении сырье : экстрагент = 1:20, настаивают при комнатной температуре в течение 7-10 дней при периодическом помешивании. Затем вытяжку фильтруют, сырье хорошо отжимают, измеряют объем полученного извлечения. Шрот еще раз промывают экстрагентом в количестве, равном недостающему объему извлечения, и обе порции объединяют. Изобретение позволяет расширить арсенал противоязвенных средств и упростить процесс получения. 2 с.п.ф-лы, 7 табл.

1. Противоязвенное средство, содержащее вытяжку из растительного сырья, отличающееся тем, что оно содержит вытяжку из листьев лопуха при следующем соотношении компонентов, %:
Вытяжка из листьев лопуха - 5
Этиловый спирт 40%-ный - 95
2. Способ получения противоязвенного средства путем экстракции тонкоизмельченного растительного сырья, настаивания, фильтрации, отличающийся тем, что экстрагируют листья лопуха 40%-ным этиловым спиртом при соотношении сырье : экстрагент, равным 1 : 20 в течение 7 - 10 дней при комнатной температуре и доводят извлечение до первоначального объема.