СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ХРОНИЧЕСКОГО ПРОСТАТОВЕЗИКУЛИТА Российский патент 2000 года по МПК G01N33/92 

Изобретение относится к медицине, а именно к венерологии и урологии.

Хронические воспалительные поражения семенных пузырьков и предстательной железы представляют собой сложную медико-социальную проблему ввиду их широкой распространенности, возможности нарушения фертильности и трудности лечения.

Раннее их выявление нередко представляет сложную задачу, так как сходная клиническая картина может отмечаться при невоспалительных поражениях предстательной железы и семенных пузырьков, при заболеваниях других органов малого таза (варикозный аноректальный симптомокомплекс, дивертикул мочевого пузыря).

Важным способом диагностики остается ректальное пальцевое исследование, причем для пальпации семенных пузырьков пациенту, находящемуся в коленно-локтевом положении, предлагается поднять торс. При этом врач рассчитывает на выявление увеличенных и болезненных семенных пузырьков, а также изменение размеров, формы и консистенции предстательной железы. (Ильин И.И. Негонококковые уретриты у мужчин. М., 1991, с. 105-114). Однако значительная степень субъективизма может приводить к значительному расхождению в оценке пальпаторных данных.

Основным лабораторным признаком воспаления предстательной железы и семенных пузырьков является обнаружение лейкоцитоза в их секрете, полученном при помощи пальцевого массажа (Рекомендации научной группы ВОЗ -1984 г., с. 12-15). Однако ввиду сложной системы боковых протоков массаж позволяет опорожнить семенные пузырьки лишь на 20%, поэтому изолированно получить содержимое семенных пузырьков при пальцевом трансректальном массаже удается лишь в 10-15% случаев. Кроме того, при массаже предстательной железы, в первую очередь выделяется содержимое непораженных долек из-за нарушения физико-химических свойств секрета и повышения его вязкости, обусловленного воспалительным процессом. Таким образом, отрицательные результаты однократного исследования секрета еще не означают, что в семенных пузырьках и предстательной железе нет патологических изменений.

Известен ультразвуковой способ диагностики хронического простатовезикулита (Молочков В.А. и соавт. Методы диагностики хронического уретрогенного простатита. Российский журнал кожных и венерических болезней. 1998, N 2, с. 57-61). Однако достаточную визуализацию семенных пузырьков удается получить лишь при использовании трансректального ультразвукового исследования, датчики для которого достаточно дороги и к настоящему времени очень ограниченно используются в нашей стране. Кроме того, УЗИ позволяет оценить лишь размеры и структуру органа и не несет сколько либо значимой информации о функциональном состоянии предстательной железы и семенных пузырьков.

Известен рентгенографический способ диагностики хронического везикулита, основанный на контрастировании семенных пузырьков - везикулография, которая может выполняться в двух модификациях ретроградная и пункционная везикулография (Горюнов В.Г., Кузьмин Г.Е. Симптоматика, диагностика и лечение везикулита. Урология и нефрология, 1983, N 6, с. 29-35). Однако при ретроградной везикулографии необходимо проведение уретроскопии и катетеризации семявыбрасывающих протоков, что по нашему мнению является нежелательным в условиях наличия инфекции. Трансректальная пункционная везикулография является инвазивным методом. Кроме того, в любом варианте везикулография сопряжена с определенной лучевой нагрузкой на область половых органов и позволяет оценить лишь структуру семенных пузырьков, но не их функциональное состояние.

Прототипом заявляемого способа является способ диагностики хронического везикулита на основании оценки стандартных показателей спермограмм (Неспецифические простатиты и везикулиты. Руководство по клинической урологии. Под. ред. А.Я. Пытеля., М., Медицина, 1970, с. 193-208). Однако выраженные изменения спермограммы (снижение объема эякулята, пиоспермия) как правило наблюдаются при грубых изменениях в области семенных пузырьков и могут свидетельствовать о необратимых органических изменениях семявыносящих путей, когда терапия будет уже малоэффективной.

Таким образом, известные способы диагностики хронического простатовезикулита имеют существенные недостатки, поскольку в целом ряде случаев не позволяют однозначно определиться в наличии воспалительного поражения предстательной железы и семенных пузырьков.

Авторы предлагают способ диагностики хронического простатовезикулита на основании анализа показателей, отражающих общие закономерности развития воспалительного процесса и позволяющий верифицировать наличие хронического простатовезикулита. С этой точки зрения особого внимания заслуживают представители класса фосфолипидов - фосфоинозитиды (ФИ). Они выполняют в организме роль "вторичных мессенджеров", т.е. соединений, через которые опосредуется регуляторный сигнал в клетку - например воздействие гормона или лекарственного вещества. Существуют единичные зарубежные исследования, указывающие на роль ФИ в регуляции контрактильности гладкой мускулатуры предстательной железы (Eckert-RE et al. Regulation of prostatic smooth muscle contractility by intracellular second messengers: implications for the conservative treatment of benign prostatic hyperplasia., Urol-Int. 1995; 54(1), p. 6-21) и в поддержании антибактериальной функции эпителиальных клеток урогенитального тракта (Mannhardt-W et al. Host defense within the urinary tract. II. Signal transducing events activate the uroepithelial defense. Pediatr-Nephrol. 1996 Oct; 10(5): 573-7). Однако определение содержания этих соединений в эякуляте для диагностики хронического простатовезикулита не проводилось.

Сущность изобретения состоит в том, что способ диагностики хронического простатовезикулита включает исследование эякулята (спермы), и отличается тем, что методом тонкослойной хроматографии в эякуляте определяют содержание фосфоинозитидов (ФИ). При уровне (ФИ) выше 4,0 мг% диагностируют хронический простатовезикулит. При содержании ФИ в эякуляте в пределах 1,5-3,5 мг% судят об отсутствии воспалительного процесса в семенных пузырьках и предстательной железе.

Использование изобретения позволяет получить следующий результат: способ обладает высокой точностью и объективностью и позволяет определять ФИ и при малейших изменениях их концентрации. Точность способа составляет 91,3%.

Способ является неинвазивным и позволяет своевременно диагностировать наличие простатовезикулита, предупреждать прогрессирование заболевания путем назначения адекватной терапии. Высокая информативность способа позволяет проводить дифференциальную диагностику между воспалительными и невоспалительными поражениями семенных пузырьков и предстательной железы.

Способ осуществляется следующим образом. Из 0,8 мл эякулята (спермы) экстрагировали липиды смесью хлороформ-метанол (1:2). Затем фильтровали в мерные пробирки, с притертой пробкой, объемом 20 мл. Осадок на фильтре трижды промывали смесью хлороформ-метанол (2:1), содержащей 0,5% HCl по объему. К фильтрату добавляли 2-3 мл 0,02% раствора хлористого кальция до образования двух фаз: хлороформной и водно-метаноловой, затем 1-2 минуты встряхивали и добавляли 2 мл хлороформа. После четкого расслоения верхнюю фазу отсасывали. Оставшиеся в верхней фазе липиды экстрагировали 2 мл хлороформа. Объединенный хлороформенный экстракт промывали смесью хлороформ-метанол-0,02% хлорида кальция (3:48:47) и затем упаривали досуха в токе азота и растворяли в 20-25 мкл смеси хлорофом-метанол 2:1. Нанесенный методом осаждения слой адсорбента высушивали на воздухе, далее 15 минут активизировали в сушильном шкафу при температуре 120 градусов Цельсия и с помощью специального приспособления разделяли на 14 отдельных дорожек, шириной 4-5 мм. Исследуемый липидный материал в количестве 10-14 мкг наносили на пластинку, помещенную в плоскую стеклянную камеру для проточной хроматографии. Время хроматографирования фосфолипидов в системе хлороформ-метанол-7н.аммиак (13:7:1) составило 60-70 минут, из которых 15 минут был проток. При этом исследуемая фракция фосфоинозитидов (Rf= 0,44) четко отделялась от расположенных рядом фосфатидилсеринов (Rf= 0,59) и фосфатидилхолинов (Rf=0,34). Идентификацию фосфолипидных фракций проводили с помощью цветных тестов, значений Rf и свидетелей фирмы "Sigma" (США). Хроматограммы после высушивания сжигались непосредственно над хромовой смесью в специальном эксикаторе, помещенном в сушильный шкаф при температуре 2000^oC на 30 минут. Уровень содержания ФИ определяли денситометрическим методом. Для этих целей использовали денситометр "БИАН-170", позволяющий анализировать тонкослойные хроматограммы. Перед нанесением исследуемого экстракта слой силикагеля разделяли на 12-15 узких полос по 4-5 мм каждая. При таких условиях распределение анализируемого вещества происходило только по ходу растворителя, исключая возможность продольной сорбции. Распределение липидного материала в пятне практически соответствовало гауссовой кривой и обеспечивало пропорциональность между количеством ФТ и площадью их пиков. При этом имелась возможность в стандартных условиях анализировать на каждой пластинке одновременно до 15 проб. Для построения калибровочной кривой использовался стандартный препарат фосфатидилинозитов фирмы "Sigma" (США), который наносился на отдельные полосы силикагеля так, чтобы концентрация липидного фосфора составляла 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 мкг соответственно. После хроматографии пластинка проявлялась над раствором хромовой смеси при температуре 2000^oC в течение 30 минут, затем денситометрировалась. По данным денситометрии строилась калибровочная кривая. ФИ определяли в диапазоне концентраций от 0,2 до 8,0 мкг. После сжигания исследуемых проб в парах хромовой смеси, обугленное вещество переносили в специальные колбочки с 0,5 мл азотной кислоты. Содержимое колбочек выпаривали в пламени спиртовки, после чего их продолжали прогревать до прекращения выделения бурых паров. В остывшие колбочки помещали 1,0 мл 2% раствора аскорбиновой кислоты на 10% трихлоруксусной кислоты и тщательно встряхивали. Затем приливали 0,5 мл 1% молибдата аммония, через 2 минуты -1,0 мл смеси лимоннокислых мышьяковистых солей, перемешивали и для развития устойчивой окраски оставляли на 1 час. Калориметрирование проводили с помощью калориметра-нефелометра КФК-2-УХЛ 4,2 при длине волны 670 нм. Одновременно с исследуемыми растворами калориметрировались "холостые" пробы, не содержащие фосфора, и стандартные растворы, содержащие 0,1 мг фосфора. Расчет содержания фосфора осуществляли путем сравнения оптических плотностей анализируемых и стандартных растворов. Результаты выражали в мг%. Данный способ применен у 22 больных.

Пример: Больной К. , 35 лет, (амбулаторная карта N 1342) обратился в лечебно-диагностический центр Тверской государственной медицинской академии с жалобами: бесплодный брак, ноющие боли в промежности и прямой кишке, усиливающиеся при наполнении мочевого пузыря, а также болезненные ощущения колющего характера при эякуляции. Кроме того, отмечает снижение полового влечения. Данные симптомы беспокоят около 2 лет. В анамнезе - неоднократно гонорея.

Объективно - наружные половые органы развиты правильно. Губки уретры несколько гиперимированы, свободных выделений нет. Органы мошонки без патологии.

Предстательная железа при пальцевом трансректальном исследовании - диффузно увеличена, консистенция - неоднородная, центральная бороздка сглажена; определяются болезненные увеличенные семенные пузырьки справа.

В соскобах из уретры - лейкоциты 5-7 в п/зрения. Методом полимеразной цепной реакции найдены хламидии. В секрете предстательной железы - лейкоциты до 15-20 в п/зрения, лецитиновые зерна в небольшом количестве. Спермограмма - пиоспермия. Уровень фосфоинозитидов в эякуляте 5,21 мг%.

Диагноз: Хламидиоз. Хронический простатовезикулит.

Назначены два 10-дневных курса антибактериальной пульс-терапии и сеансы трансректального лазерного облучения области семенных пузырьков и предстательной железы на аппарате "Милта". Рекомендована регулярная половая жизнь в презервативе (для дренирования семенных пузырьков). Одновременно проводилась и соответствующая терапия жены больного, у которой также выявлены хламидии.

После окончания лечения пациент отмечает ликвидацию болезненных ощущений и повышение либидо. При трансректальном исследовании - железа не увеличена, слабо-болезненная, центральная бороздка выявляется, консистенция плотно-эластическая; семенные пузырьки не пальпируются. Анализ секрета железы - лейкоциты 2-3 в поле зрения, лецитиновые зерна в значительном количестве. Контрольные микроскопические исследования в установленные сроки не выявили в соскобах из уретры патогенных микроорганизмов. Спермограмма - нормоспермия. Уровень фосфоинозитидов в эякуляте снизился до 3,45 мг%. Через 3 месяца после окончания лечения, в первый же цикл после прекращения использования презерватива, у жены пациента наступила беременность.

Таким образом, предлагаемый метод диагностики хронического простатовезикулита позволяет повысить точность установления диагноза и проводить дифференциальную диагностику между воспалительными и невоспалительными поражениями предстательной железы и семенных пузырьков.

Изобретение может быть использовано в медицине, а именно в венерологии и урологии. Диагностику хронического простатовезикулита проводят путем исследования эякулята (спермы). Методом тонкослойной хроматографии в эякуляте определяют содержание фосфоинозитидов. При уровне фосфоинозитидов выше 4,0 мг% диагностируют хронический простатовезикулит. Изобретение позволяет повысить точность установления диагноза.

Способ диагностики хронического простатовезикулита, включающий исследование эякулята (спермы), отличающийся тем, что методом тонкослойной хроматографии в эякуляте определяют содержание фосфоинозитидов и при уровне фосфоинозитидов выше 4,0 мг% диагностируют хронический простатовезикулит.