СПОСОБ КОМПЛЕКСНОЙ МОРФОМЕТРИЧЕСКОЙ ОЦЕНКИ КАПСУЛЫ ПЕЧЕНИ Российский патент 2000 года по МПК A61B10/00 

Изобретение относится к медицине, в частности к патологической анатомии, гистологии и гепатологии.

По гистологическим срезам количественное морфологическое исследование капсулы печени проводится однотипно, обычно по умолчанию подразумевается, что это промеры профилей капсулы с помощью микроскопа и окуляр-микрометра. Результаты представляются в виде показателя средней (или лимитов) толщины капсулы печени. Так, наиболее капитальный труд по морфологии печени (Pfuhl W. Die Leber. In: Handbuch der mikroskopischen Anatomie des Menschen /herausgeg. von W. v. Mollendorff. - Berlin: Springer, 1932. Bd. V, Teil 2, S. 235 - 425) содержит описание строения и указание, что капсула "у взрослого здорового мужчины толщиной 43-76 мк, у 5-летнего мальчика - 25 мк". Эти же цифры толщины капсулы печени (43-76 мк) тиражируются в справочной литературе (Тер-Григорова Б. Печень. Гистология //БЭМ.- 2-е изд.- М., 1962. -Т. 24. -С.76-92; Человек медико-биологические данные. Доклад рабочей группы комитета П МКРЗ по условному человеку: Пер с англ. Ю.Д. Парфенова -М.: Медицина, 1977. - 496 с.). Это явная демонстрация авторитета работы W.Pfull, хотя автор четко указывает, что капсула исследована только в двух указанных случаях. В отдельных работах проводятся данные изучения возрастной динамики толщины брюшины печени (от поверхности органа до его паренхимы), которая увеличивается с возрастом; у плодов 3-4 месяца - 6-12 мк, 6 месяцев - 13-18 мк, у подростков и взрослых - 50-80 мк (Борисов А.В. Внутриорганные лимфатические капилляры и сосуды брюшины человека. Дис. докт. мед. наук - Л., 1967, - т. 1-2, 929 с.). Результаты морфометрии показывают, что объектом исследования служит одна и таже структура вне зависимости от различий мнений на анатомическую сущность капсулы печени. По мнению ряда авторов фиброзная капсула и брюшинный покров, расположенный поверх капсулы, являются самостоятельными анатомическими образованиями, плотно срощенными между собой. Другие авторы рассматривают капсулу только как висцеральную брюшину. Но эти разночтения в определении капсулы печени приводят к значительной терминологической путанице и препятствуют выработке четких методических подходов морфометрического исследования капсулы. И прежде всего это касается вопроса причисления к капсуле печени поверхностно расположенных ветвей портальных трактов. Например, W. Pfuhl (1932) пишет: "...у людей капсула прилегает ко многим сосудистым пучкам... Между капсулой и паренхимой большое количество кровеносных, лимфатических сосудов и желчных протоков. Капсула через эластические волокна сосудистых пучков плотно соединена с паренхимой, что делает капсулу неподвижной. ... Паренхиматозное углубление на долевой границе соответствует междолевому пространству, в котором находится сосудистый пограничный слой печеночной капсулы. ...Печеночные вены проходят с поверхностными сосудами без прямых соединений...". В редакции Е. Тер-Григоровой (1962) капсула печени... " снаружи покрыта листком брюшины (серозный покров); на внутренней поверхности капсулы имеются лимфатические и кровеносные сосуды (терминальные ветви портальных трактов)". Приведенные цитаты позволяют двойственную трактовку. В перечне официальных терминов по печени указаны структуры, создающие покров свободной поверхности органа: серозная оболочка, подсерозная основа, фиброзная оболочка, капсула упоминается только в применении к понятию околососудистая фиброзная капсула, последняя в комментариях - капсула Глиссона (Международная анатомическая номенклатура /Под ред. С.С. Михайлова. - М.: Медицина, 1980 - 240 с.). В работах, выполненных на плоскостных препаратах анатомическими методами, на поверхности печени обнаруживают однотипные структуры "звездчатой" формы: ветвей печеночной артерии (Кузнецов Б. Г. К анатомии внутриорганных ветвлений кровеносных сосудов и желчных протоков печени человека. Дис. канд. мед. наук. -Горький, 1957, - 371 с.), лимфатических сосудов (Викалюк Ю.В. Патологическая анатомия лимфатической системы печени человека при циррозах. Дисс. канд. мед. наук. -Черновцы, 1963, - 284 с.), нервных волокон (Карупу В.Я. Нервные структуры печени и их изменения в различных экспериментальных условиях. Дис. докт. биол. наук. -Киев, 1962. -514 с.), которые "сливаясь" уходят в глубь органа. Очевидно, описываются элементы одного многокомпонентного анатомического образования - ветвей портальных трактов, их выход на поверхность органа и характер ветвления. При этом авторы применяют формальные термины с явным стремлением придать им анатомически нейтральный смысл. Так, в выше названных работах встречаются термины: "тонкие участки капсулы" и как альтернатива "толстые участки капсулы печени" (Карупу В.Я., 1962), "утолщения брюшины" (Борисов А. В., 1967), "утолщения капсулы" (Викалюк Ю.В., 1963), далее по текстам обычно становится ясным, что речь идет, в частности, о поверхностных ветвях портальных трактов. В официальных номенклатурах нет адекватных терминов для обозначения вышеназванных структур. Признание принадлежности к капсуле портальных трактов и печеночных вен, выходящих на поверхность органа, значительно расширяет ее функциональное значение как интегрирующей системы, увеличивает ее структурное разнообразие и соответственно количество информации, доступной для исследования по профилям в гистологических срезах.

Недостатками традиционного морфометрического исследования профиля капсулы печени в гистологических срезах следует считать: восприятие ее как однородной структуры по протяжению или отсутствие четкого методического указания на отношение к поверхностно расположенным сосудам и, как следствие, представление результатов в виде одного показателя, что снижает информативность и разрешающую способность метода, затрудняет воспроизводимость результатов.

Прототипом к нашему изобретению послужило исследование (Ryoo J.W., Buschmann R. J. Comparison of intralobar non-parenchyma, subcapsular non-parenchyma, and liver capsule thickness. J. Clin. Pathol., 1989, v.42, N 7, p. 740-744. ), в котором с целью оценки толщины капсулы обозначили ее как непаренхиматозное пространство между поверхностью печени и гепатоцитарной паренхимой. Наружный постоянный слой ее представлен плотной соединительной тканью, иногда обнаруживается и нижележащий слой, образованный элементами портального тракта", т.е. прямо утверждается, что поверхностно расположенные ветви портальных трактов являются составной частью капсулы печени. Авторы детально описывают способ забора образцов ткани и технику гистологической обработки. Материалом исследования служила правая доля печени, разрезы производили параллельно висцеральной поверхности (обычно 2 среза). С интервалом 120^o вокруг каждого среза забирали три кусочка (размером 2x5x10 мм) перпендикулярно поверхности печени. Материал фиксировали в 4% формалине, заливали в парафин. Авторы подробно оговаривают способы проведения замеров, разъясняют устройство используемых приспособлений и прочие условия, в частности указывают запрещенные для исследования структуры. Толщина капсулы находилась как расстояние на перпендикуляре от поверхности печени до дольковой и нодулярной паренхимы. Зоны локального внекапсулярного фиброза не учитывались при подсчетах. Для нодулярной паренхимы расстояние измеряется по тангенсу от поверхности печени к узлам конкретного среза. В работе использовали световой микроскоп с увеличением 63 раза со специальным окуляром, имеющим x-y расчерченное стекло, которое проецирует 4 параллельные линии на поле зрения микроскопа (расстояние между линиями 0,4 мм). Линии случайно ориентированы к поверхности капсулы; толщина капсулы измеряется вдоль каждой линии расчерченного окуляра с помощью диодного светоизлучающего курсора, соединенного с микрокомпьютером. Просчитываются срезы трех блоков (случайно выбранных) для каждого конкретного случая. В результате работы обнаружена хорошая корреляционная связь между толщиной капсулы и объемной долей внутридолевой стромы (или степенью фиброза, r = 0,5) и последней с подкапсулярной стромой (r = 0,7) печени человека. По мнению авторов метод оценки печеночной стромы по толщине капсулы со временем будет широко применятся. Работа отличается скрупулезным описанием всех методических деталей и позволяет получать воспроизводимые результаты. Все это повышает научный и практический интерес к работам гистологов и патологоанатомов по капсуле печени.

Недостатками прототипа можно считать следующие. 1) При признании принадлежности к капсуле поверхностных ветвей портальных трактов (т.е. ее естественного разнообразия) использование авторами только одного показателя - толщины капсулы (который методической новизны в себе не несет) за счет обобщения приводит к неизбежной потере информации и снижает возможную разрешающую способность метода. 2) При выявлении методологически важных данных о корреляции толщины капсулы печени и явлений фиброза (или цирроза) печени, но в условиях, где показатели, даже нормы, получены на случаях умерших от опухолей с высокой вероятностью наличия неспецифического реактивного гепатита, что, очевидно, приводит к занижению коэффициента корреляции от реального.

Цель настоящего изобретения - разработка способа, повышающего разрешающие возможности, точность и информативность количественного морфологического исследования капсулы печени.

Практически указанная цель достигается следующим образом: исследуется естественное анатомическое разнообразие капсулы печени на гистологических препаратах, перпендикулярных поверхности органа образцов ткани, раздельно проводятся промеры (с помощью окуляр-микрометра) двух закономерно повторяющихся структур: "тонкой" порции и "утолщений" капсулы (содержащих поверхностные ветви портальных трактов и печеночных вен), в которых измеряется соответственно толщина (h) и глубина (H) по перпендикуляру к поверхности органа и параллельно поверхности - ширина (L) второй порции (в виде проекции на поверхность), длина (l) капсулы изучаемого образца (см. чертеж). При значительном искривлении поверхности замер последней проводить по фрагментам. Необходимое количество замеров и исследуемых случаев определяется общепринятыми в морфометрии и статистике методами. На основе результатов проведенных измерений рассчитывается комплекс из семи взвешенных показателей.

1) Средняя толщина "тонкой" порции капсулы печени (h_ср. мм) в виде отношения суммы показателей толщины к количеству проведенных замеров:

где h_i - величина показателя толщины "тонкой" порции капсулы, n - количество замеров "тонкой" порции капсулы.

2) Средняя глубина "утолщений" капсулы (H_ср., мм), отношение суммы показателей глубины "утолщений" к количеству исследованных "утолщений":

где H_i - величина показателя глубины "утолщения" капсулы, N - количество всех исследованных "утолщений" капсулы.

3) Средняя ширина "утолщений" капсулы (l_ср., мм) - отношение суммы показателей ширины "утолщений" к количеству "утолщений":

где L_i - величина показателя ширины "утолщения" капсулы.

4) Индекс формы "утолщений" капсулы (I_f) в виде отношения средних показателей глубины и ширины "утолщений":

5) Относительная доля ширины "утолщений" (L_ср.) капсулы в виде отношения суммы ширины утолщений" к общей длине исследованной капсулы, выраженная в процентах:

где K - количество всех исследованных образцов, определяет показатели общей длины исследованной капсулы и количество "утолщений".

6) Количество "утолщений" на протяжении стандартной длины капсулы, равной 10 мм, (V_н)> в виде отношения произведения количества обнаруженных "утолщений" на стандартную длину к общей длине исследованной капсулы:

7) Длина поверхности капсулы с одним "утолщением" (T_H, мм) в виде отношения длины исследованной капсулы к количеству "утолщений":

Локализация забора кусочков печени определяется целью конкретного исследования в пределах наиболее представительных и типичных отделов диафрагмальной и висцеральной поверхностей печени. При данном способе исключаются из исследования анатомически особые участки капсулы печени: воротная и пузырная пластинки места прикрепления связок, внебрюшинная поверхность и, возможно, нижний край органа, если планируется изучение случаев с заведомо выраженным фиброзом или формированием так называемого "кожистого" края. Образцы ткани не должны содержать макроскопически видимых сосудов. При морфометрии следует исключать из исследования срезы или их фрагменты (по всем параметрам), где в профилях капсулы обнаруживаются продольно срезанные "утолщения" или участки капсулы, к которым из толщин ткани органа выходят сосудистые структуры, непрерывно прослеживающиеся от поверхности далее чем на 1/2 диаметра прилежащей гексагональной дольки и при обнаружении такового, смежный фрагмент "тонкий" порции профиля до следующего "утолщения" по ходу проведения замеров. При изучении аутопсийного материала из промеров следует исключать высоту мезотелия, так как она может быть значительной при набухании последнего, или напротив, эти клетки часто оказываются десквамированными. При проведении промеров следует регистрировать факты обнаружения слияния "утолщений" (крайне редкие в норме у лиц молодого возраста), так как при нарастании частоты этого явления нужно критично относится к показателям ширины, индекса формы, количества "утолщений" на стандартный отрезок длины капсулы, длины капсулы с одним "утолщением", которые приобретают особые (иные) морфофункциональные трактовки. Возможно использование любых вариантов гистологической обработки: фиксации, заливки и окраски, унифицированных в пределах одной работы.

На чертеже представлен профиль капсулы печени с двумя "утолщениями" и одним полным периодом "тонкой" порции, которая имеет контрастно меньшую толщину (h). "Утолщения" капсулы (H) содержат сосуды и располагаются по границам между печеночными дольками. На чертеже предложенный способ поясняется схемой проведения промеров. На профилях капсулы с помощью окуляр-микрометра нужно провести отдельно замеры толщины "тонкой" порции капсулы (h_{1,2, 3,...i}), глубины (H_1.2...i - перпендикулярно поверхности) и ширины (L_1.2...i) "утолщений"; общей длины капсулы исследуемого образца (l₁ - параллельно поверхности). Глубина "утолщения" в терминологии прототипа - это сумма показателя постоянного верхнего и непостоянного нижележащего слоя, а проекция последнего на поверхность дает его ширину.

Данным способом проведено исследование возрастных изменений капсулы печени человека. Материалом исследования служили образцы печени 77 мужчин, погибших в результате насильственных причин (от механических повреждений) в возрасте 15-89 лет. Сформировано 5 групп возрастной динамики с равномерным интервальным подразделением по 15 лет. В каждом случае исследовалась капсула трех образцов диафрагмальной поверхности правой (8 сегмент по схеме Couinaud), левой доли (3 сегмент) и нижнего края печени (5 сегмент), половина последнего образца вносит в общий показатель на 1/4 представительство висцеральной капсулы и своеобразную зону перехода висцеральной и диафрагмальной поверхности.

Дополнительно в 8 сегменте забирали образец ткани из толщи органа на глубине 4 см от поверхности (см. таблица 2). Материал фиксировали в 10% нейтральном формалине и заливали в парафин, срезы окрашивали гематоксилином и эозином. Промеры проводили при увеличении микроскопа в 180 раз (объектив x 8, окуляр x 15, промежуточное x 1,5). Общая длина исследуемой капсулы составляла не менее 60 мм в каждом случае. При этом проводили по 90 замеров в "тонкой" порции и всех исследуемых "утолщений" на протяжении капсулы. Значимость различий определяли с помощью критерия Стьюдента. При этом учитывали не только различия с вероятностью более 95% как статистически достоверные (P < 0,05), но и более 90%, которые расценивали как тенденцию к достоверности (P < 0,1), так как изучаемые показатели морфофункционально взаимосвязаны. Для выявления возможности экстраполяции результатов исследования капсулы на состояние экстралобулярной стромы толщи органа проведен корреляционный анализ названных возрастных динамик (таблица 3). В приведенном перечне дополнительных показателей (таблица 2), полученных по образцу ткани из толщи органа, кроме таковых экстралобулярной стромы (средних диаметров и объемных долей: печеночных и центральных вен, портальных трактов; всей выше названной стромы и собственно соединительной ткани портальных трактов) даны средние значения массы печени.

Результаты морфометрии капсулы представлены в таблице 1. Средняя толщина "тонкой" порции капсулы (h_ср.) недостоверно увеличивается с возрастом, что совпадает с общераспространенным мнением. Судя по значениям средних показателей различных возрастных периодов можно предположить, что именно по правилам замеров "тонкой" порции капсулы получены данные выше указанных аналогов.

В профилях капсулы "утолщениями" обычно являются сечения ветвей портальных трактов, реже печеночных вен и бессосудистые соединительнотканные образования. Последние могут быть обусловлены особенностями прохождения среза через вышеназванные структуры. Три последующих показателя количественно характеризуют порцию "утолщений" капсулы и ее изменения. Средняя глубина "утолщений" капсулы (H_ср.) уменьшается с тенденцией к достоверности в среднем возрасте по сравнению молодым - 15-29 лет (P < 0,1), недостоверно в пожилом и возрасте 30-44 лет. В старческом возрасте показатель наибольший, но различия с другими группами недостоверны. Средняя ширина "утолщений" (L_ср.) недостоверно последовательно нарастает от молодого (15-29 лет) к пожилому возрасту, а резкое увеличение в старческом возрасте достоверно по сравнению с 1 группой (P < 0,05) и имеет тенденцию к достоверности со 2 и 3 группами (P < 0,1). Характер возрастной динамики ширины "утолщений" капсулы прямо указывает на рост стромы по поверхности (под "тонкой" порцией), т.е. показывает источник формирования субкапсулярного фиброза.

Однонаправленный, но непропорциональный рост толщины "тонкой" порции, глубины и ширины "утолщений" капсулы по максимальной амплитуде абсолютных величин соответственно на 33%, 23% и 71% в старческом возрасте показывает обоснованность применения нижеприведенных показателей.

Индекс формы "утолщений" капсулы (I_f) с возрастом плавно снижается, различия показателя старческого возраста достоверны с 1, 2, 3 группами (P < 0,05), а различия пожилого возраста с 1 и 2 группами достоверны (P < 0,05), с 3 группой имеет тенденцию к достоверности (P < 0,1). Изменения индекса показывают, что в группах молодого возраста глубина "утолщений" несколько преобладает, начиная со среднего возраста "утолщения" увеличиваются в большей мере по ширине (по поверхности). Это подтверждает и количественно характеризует механизм формирования субкапсулярного фиброза в виде разрастания соединительной ткани поверхностных ветвей портальных трактов и печеночных вен под "тонкой" порцией капсулы, а не из последней.

Последующие три показателя характеризуют количественные соотношения и взаимосвязь изменений изучаемых порций капсулы. Относительная доля ширины "утолщений" капсулы (P_L) резко и достоверно увеличивается только в старческом возрасте по отношению ко всем предыдущим группам (P < 0,05). То-есть, в старческом возрасте доля "утолщений" в барьере между паренхимой и брюшинной полостью в 1,5-1,6 раза выше. Можно рассмотреть два варианта объяснения обнаруженных изменений, через механизмы активного и пассивного фиброза. Реальность активного механизма подтверждает показатель средней ширины "утолщений" капсулы. Присутствие механизма пассивного фиброза, в частности, за счет известной убыли паренхимы при уменьшении массы печени в старческом возрасте (табл. 2) можно подтвердить увеличением частоты "утолщений" капсулы по следующему показателю.

Количество "утолщений" на 10 мм длины капсулы (V_н) достоверно снижается по сравнению с 1 и 3 группами в пожилом возрасте (P < 0,05), но показатель старческого возраста значительно выше последнего (P < 0,05), что доказывает реальное участие механизма пассивного фиброза в морфологических изменениях капсулы. В старших возрастах регистрируется слияние отдельных "утолщений", что имеет вид очагов субкапсулярного фиброза. Это объясняет, в частности, снижение количества "утолщений" в пожилом возрасте, отсутствие такового в старческом возрасте связано со сгущением септального рисунка капсулы при уменьшении массы паренхимы. При выборе величины стандартной длины исходили из реальных размеров кусочков ткани печени, обычно забираемых для патогистологического исследования аутопсийного или крупного операционного материала. Информацию этого показателя можно использовать в практической работе патогистологов при изучении поверхностных образцов. Так, обнаружение на 10 мм длины капсулы печени мужчины 4-5 "утолщений", содержащих элементы портального тракта или вены, не свидетельствуют об отклонении от нормы, даже если какая-либо из этих структур окажется достаточно крупной.

Длина капсулы с одним "утолщением" (T_H) недостоверно увеличивается во 2 группе, снижается в 3 группе, вновь повышается в пожилом возрасте, достоверно с 1 группой (P < 0,05) и с тенденцией к достоверности с 3 группой (P < 0,1). В старческом возрасте показатель снижается, различие достоверно по сравнению с 4 группой (P < 0,05). Средняя длина капсулы с одним "утолщением" 2,1 мм в молодом возрасте по величине практически равна известному диаметру классической гексагональной дольки. То-есть, средняя величина периода двух контрастных структур ("тонкой" порции и "утолщения") является косвенным показателем проекции размеров структурно-функциональных единиц печени на поверхность органа. Увеличение показателя в 30-44 года - отражение возрастного роста массы печени, которая, как известно, обусловлена в основном паренхимой. В других условиях возможны и иные причины подобных изменений, например набухание паренхимы при дистрофиях, явления венозного полнокровия в дольках и т.д. Обнаруженное увеличение показателя в пожилом возрасте связано со значительным снижением количества "утолщений" на стандартный отрезок длины капсулы, которое обсуждалось выше, т.е. нарушается указанная логика морфофункциональной трактовки. Уменьшение показателя в старческом возрасте может косвенно свидетельствовать о снижении размеров печеночных долек, что хорошо согласуется со значительной убылью массы паренхимы, а имеющееся слияние "утолщений" в какой-то мере компенсируется сгущением септального рисунка, т. е. показатель регистрирует общую динамику процесса уменьшения размера долек по сравнению с пожилым возрастом, но не отражает размерностей этого явления.

Таким образом, комплекс показателей, характеризующий структуры капсулы в разнообразии своих порций в виде абсолютных и относительных величин, позволяет выявлять на примере нормального онтогенеза минимальные возрастные количественные изменения при качественно различных морфофункциональных характеристиках и контролировать правильность трактовок. Крайне интересную информацию несут в себе изменения показателей с парадоксальной возрастной динамикой. Обычно это различная направленность сдвигов показателей в пожилом и старческом возрасте, что свидетельствует об участии разных механизмов в происходящих изменениях при естественной неоднородности изучаемых групп по генетическому составу, в виде прогрессивного нарастания доли потенциальных долгожителей в старших возрастных периодах.

Результаты корреляционного анализа (таблица 3) подтверждают существенное влияние массы печени на показатели капсулы, обнаруживаются сильные обратные связи со средней толщиной "тонкой" порции, шириной и относительной долей ширины "утолщений" (r = -0,8, -0,9). С остальными показателями капсулы корреляционная связь умеренная: отрицательная - с глубиной (r = -0,58) и количеством "утолщений" на стандартной длине капсулы (r = 0,53), положительная - с индексом формы (r = 0,67) и длиной капсулы с одним "утолщением" (r = 0,69). Наличие сильных или умеренных корреляционных связей между всеми показателями капсулы и массой печени доказывает их неформальный характер, что хорошо согласуется с одной из главных функций капсулы - механическим формообразующим барьером. Это требует, при применении способа и трактовки его результатов, особо учитывать изменения массы печени.

Существуют сильные корреляционные связи: прямые - количества "утолщений" на стандартной длине капсулы (r = 0,91, 0,97), обратные - длины капсулы с одним "утолщением" (r = -0,8, -0,9) с показателями объемной доли всей экстралобулярной стромы печени и портальных трактов; кроме этого, с последней имеется сильная положительная связь глубины "утолщений" (r = 0,8).

Для диагностики фиброза печени по капсуле особо значимо обнаружение сильной положительной корреляционной связи объемной доли собственно соединительной ткани портальных трактов с показателями толщины "тонкой порции" глубины, ширины и объемной доли ширины "утолщений" (r = 0,8 - 0,9).

Объемная доля печеночных вен имеет сильные корреляционные связи: отрицательные - с глубиной, относительной долей ширины и количеством "утолщений" на стандартной длине капсулы (r = -0,77, -0,78, -0,92); положительную - с показателем длины капсулы с одним "утолщением" (r = 0,96).

Показатели центральных вен приводятся по формальным соображениям как составной компонент объемной доли всей стромы и имеют слабые, реже умеренные корреляционные связи с таковыми капсулы.

Средний диаметр портальных трактов имеет сильные корреляционные связи: прямые - с толщиной "тонкой" порции, шириной и относительной долей ширины "утолщений" (r = 0,9), обратную - с показателем индекса формы (r = -0,7). Средний диаметр печеночных вен имеет тот же набор сильных корреляционных связей с показателями капсулы, но с противоположным знаком. В отношении с показателями капсулы корреляционные связи значений средних диаметров и объемных долей портальных трактов и печеночных вен часто отличаются по силе и направленности.

Таким образом, обнаружение большого перечня сильных корреляционных связей показателей капсулы со всеми и с каждой из изучаемых структур экстралобулярной стромы, показывает возможность суждения о состоянии таковой в толще органа, не только регистрации явлений фиброза, но и циркуляторных изменений сосудов портального тракта и печеночных вен. Наличие сильных или умеренных корреляционных связей массы печени со всеми изучаемыми показателями капсулы требует, при применении способа, учета явлений гепатомегалии или атрофии печени и степени их выраженности в трактовке результатов исследования.

Предложенный способ количественной оценки морфологического состояния капсулы имеет ряд преимуществ по сравнению с существующими методами исследования: в отличие от прототипа раздельная морфометрия двух порций капсулы печени показывает морфофункционально значимые количественные характеристики не только по толщине, но и по поверхности органа, позволяет характеризовать их как структуры, обладающие разной морфологической реактивностью, а "утолщения" капсулы как наиболее лабильные. Количественное исследование капсулы печени в естественном анатомическом разнообразии ее структур значительно увеличивает разрешающую способность метода и позволяет выявлять минимальные морфологические изменения капсулы в онтогенезе, а также при различных экзо- и эндогенных воздействиях факторов малой интенсивности. Анатомически обоснованное разнообразие показателей капсулы печени расширяет спектр морфофункциональных трактовок как за счет анализа внутри комплекса, так и изучения корреляционных связей с другими показателями печени. Обнаруженные изменения капсулы могут быть экстраполированы на таковые экстралобулярной стромы, происходящие в толще органа. Возможность регистрации минимальных морфологических изменений в их качественном и количественном разнообразии с привязкой к конкретным структурам может служить изучению закономерностей морфогенеза субкапсулярного фиброза, вынуждающего патологоанатомов с осторожностью относиться к исследованию поверхностно взятых образцов ткани печени в диагностике диффузных процессов. Способ позволяет ликвидировать методологические противоречия исследования капсулы в виде профиля и с поверхности печени, так как показатели ширины, частоты, относительной доли "утолщений" имитируют последние, при сохранении всех преимуществ гистологического исследования по идентификации и оценке характера изменений структур за счет большего уровня увеличения. Вся получаемая количественная информация оказывается в равной мере адекватной двум названным методическим подходам. Используя принципы этого способа, на основе отдельных (или части комплекса) показателей возможно автоматизировать процесс исследования поверхности капсулы путем ее лапароскопического сканирования, так как в нативном виде "септальный рисунок" капсулы имеет контрастное цветовое представление для определения минимальных, начальных изменений печени человека. Принципы и комплекс количественных показателей данного способа могут быть применены в исследовании как висцеральной брюшины других органов, так и париетальной брюшины. Учет структурного разнообразия капсулы печени создает возможность изучения дополнительных визуальных и количественных порциальных характеристик: состояния мезотелия, изменений рельефа поверхности, клеточного состава, сосудов и волокнистых структур фиброзной основы и фиброзной капсулы.

Использование: в медицине, в частности в паталогической анатомии, гистологии, гепатологии. Исследуют капсулу печени по образцам ткани после любого варианта традиционной гистологической обработки. Промеряют профиль капсулы на срезах. Измерения проводят для закономерно повторяющихся анатомических структур порции, содержащей поверхностные ветви портальных трактов или печеночных вен - "утолщений" капсулы. В них промеряют соответственно толщину и глубину по перпендикуляру к поверхности органа, параллельно поверхности - ширину "утолщений" в виде проекции на поверхность и длину капсулы изучаемого образца. Рассчитывают комплекс показателей по формулам, среднюю глубину "утолщений" капсулы где H_i - глубина "утолщения" капсулы, N - количество всех исследованных "утолщений", среднюю ширину "утолщений" капсулы где L_i - ширина утолщения капсулы, индекс формы "утолщения" капсулы Относительную долю ширины "утолщений" капсулы где I_i - длина профиля капсулы одного образца, К - количество всех исследованных образцов, среднее количество "утолщений" на протяжении стандартной длины капсулы 10 мм Увеличение средней глубины, ширины, относительно доли "утолщений" при снижении индекса формы свидетельствует о явлениях фиброза - активного по механизму. Нарастание количества "утолщений" на стандартной длине профиля капсулы - как становление фиброза с участием пассивного механизма в старческом возрасте при убыли массы органа за счет паренхемы. При уменьшении количества "утолщений" - как формирование очагового субкапсулярного фиброза за счет вовлечения в единый конгломерат смежных "утолщений". Способ позволяет повысить точность оценки. 1 ил., 3 табл.

Способ выявления морфологических изменений капсулы печени в онтогенезе путем комплексной морфометрической оценки, включающей: исследование образцов ткани после любого варианта традиционной гистологической обработки и промеры профиля капсулы на срезах, отличающийся тем, что проводят измерения закономерно повторяющихся анатомических структур - порций "утолщений" капсулы, содержащих поверхностные ветви портальных трактов или печеночных вен, в которых промеряют глубину по перпендикуляру к поверхности органа и параллельно поверхности - ширину "утолщений" в виде проекции на поверхность, а также длину капсулы изучаемого образца, рассчитывают комплекс показателей по формулам: а именно, среднюю глубину "утолщений" капсулы

где H_i - глубина "утолщения" капсулы;
N - количество всех исследованных "утолщений",
среднюю ширину "утолщений" капсулы

где L_i - ширина утолщения капсулы,
индекс формы "утолщений" капсулы

относительную долю ширины "утолщений" капсулы

где I_i - длина профиля капсулы одного образца;
К - количество всех исследованных образцов,
среднее количество "утолщений" на протяжении стандартной длины капсулы 10 мм

увеличение средней глубины, ширины, относительной доли "утолщений" при снижении индекса формы свидетельствует о явлениях фиброза - активного по механизму, а нарастание количества "утолщений" на стандартной длине профиля капсулы - как становление фиброза с участием пассивного механизма в старческом возрасте, при убыли массы органа за счет паренхимы, или при уменьшении количества "утолщений" - как формирование очагового субкапсулярного фиброза за счет вовлечения в единый конгломерат смежных "утолщений".