СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ МНОЖЕСТВЕННОЙ МИЕЛОМЫ Российский патент 2001 года по МПК G01N33/49 G01N33/50 

Изобретение относится к медицине, а именно к гематологии.

Диагностика множественной миеломы представляет в ряде случаев значительные трудности. Заболевание следует дифференцировать с доброкачественной моноклональной гаммапатией, метастазами рака в кости, заболеваниями почек и другими. Диагноз множественной миеломы устанавливается на основании совокупности данных клинического и биохимического анализа крови, цитологического изучения костного мозга, рентгенографии костей скелета, иммунохимического исследования сыворотки и мочи.

Недостатком перечисленных методов является необходимость из суммарного использования, так как ни один отдельно взятый не дает возможности диагностировать множественную миелому. Комплексное обследование больного требует значительных затрат времени и вовлечения в диагностический процесс многих параклинических подразделений медицинского учреждения.

Авторы предлагают в качестве прототипа диагностики множественной миеломы способ иммунохимического исследования с сыворотки, которое состоит из двух этапов: электрофореза в агаровом геле и радиальной иммунодиффузии [Н.Е.Андреева, Е.В. Чернохвостова. Иммуноглобулинопатии. - М.: Медицина, 1985. - 239 с.].

С целью определения наличия М-градиента, свидетельствующего о наличии моноклонеального белка, проводится электрофорез сыворотки больного в 1,5% агаре при градиенте потенциала 6 V/см. Для количественного определения иммуноглобулинов используется метод радиальной иммунодиффузии. При этом необходимо наличие моноспецифических антисывороток против отдельных классов и типов иммуноглобулинов и стандартную сыворотку с известным их содержанием. Строго определенное количество исследуемой сыворотки вносят в лунки, вырезанные в слое геля, содержащего соответствующую моноспецифическую антисыворотку. При последующей инкубации антиген диффундирует из лунки в гель и образует преципитат в виде кольца. Площадь кольца соответствует объему геля, содержащего антитела в количестве, эквивалентном количеству внесенного антигена. При постоянной концентрации антител в геле и одинаковом объеме вносимой в лунку сыворотки площадь кольца прямо пропорциональна концентрации данного белка в сыворотке. Сравнивая размер колец исследуемых сывороток и стандартной сыворотки, содержащей известное количество данного белка, рассчитывают его концентрацию в исследуемых сыворотках.

Основным недостатком этого метода являются большие временные затраты, а также недостаточная специфичность для диагностики множественной миеломы. Секреция моноклонального иммуноглобулина, за исключением белка Бенс-Джонса, может наблюдаться при ряде заболеваний, не связанных с парапротеинемическим гемобластозом. В то же время далеко не во всех случаях множественной миеломы имеет место секреция моноклональных легких цепей иммуноглобулина (белка Бенс-Джонса).

Авторы предлагают следующий способ диагностики множественной миеломы.

Проводилась инфракрасная спектрометрия сыворотки 26 больных. Основную группу составили 13 пациентов с диагнозом множественной миеломы. В группу сравнения вошли 13 больных с другими заболеваниями, сходными по клиническим и лабораторным данным с множественной миеломой. С помощью спектроанализатора (патент на изобретение N 2137126 от 10.09.99) определялись коэффициенты пропускания в девяти поддиапазонах инфракрасного спектра электромагнитного излучения: 1 - (3500...3200 см^-1), 2 - (3085 ... 2832 см^-1), 3 - (2120... 1800 см^-1), 4 - (1710 ... 1610 см^-1), 5 - (1600 ... 1535 см^-1), 6 - (1543 .. . 1425 см^-1), 7 - (1430 ... 1210 см^-1), 8 - (1127 ... 1057 см^-1), 9 - (1067 ... 930 см^-1).

Цикл измерения по всем каналам не превышал 1 с. Общее время исследования составило 1 мин.

Полученные данные представлены в табл. 1 и 2.

Полученные спектральные характеристики основной группы и группы сравнения сопоставлялись методом дискреминантного анализа с определением критерия Маханалобиса [Сошникова Л.А., Тамашевич В.Н., Многомерный статический анализ. М. : ЮНИТИ-ДАНА, 1999, с. 471, 507 - 516], характеризующего в геометрическом смысле расстояние между многомерными объектами с учетом парных корреляционных связей между поддиапазонами инфракрасного спектра. Экспериментально установлено предельное значение этого расстояния, которое составило 20 усл. ед. Это означает, что если критерий Маханалобиса между спектральными характеристиками исследуемой сыворотки больного с подозрением на множественную миелому и показателями поглощения в группе больных с подтвержденной множественной миеломой (табл. 1) менее 20 усл. ед., то у пациента имеет место это заболевание. Если этот показатель превышает 20 усл. ед., то следует думать о другой патологии.

Эффективность предлагаемого способа представлена на следующих примерах:
Пример 1. Больная Б., 58 лет. История болезни N 109. Диагноз: множественная миелома II A стадия, с секрецией IgG. Компрессионный перелом L1, L2. Жалобы на боль в поясничном отделе позвоночника.

Клинический анализ крови: эр 3,3 х 10, Hb 102 г/л, тромб 128х10, л 3,7х10, б 1%, э 8%, п 12%, с 31,5%, лимф 35%, м 12,5%, СОЭ 61 мм/ч. Биохимический анализ крови: общий белок 78 г/л, альбумины 49,8%, глобулины: альфа 1 3,7%, альфа 2 9,1%, бета 14,4%, гамма 23%, креатинин 96 ммоль/л. Миелограмма: плазматические клетки 12%. Анализ мочи без патологии. Рентгенография костей скелета.

Заключение: диффузный остеопороз. Клиновидная компрессия L1-L2. Иммунохимическое исследование сыворотки: секреция моноклонального иммуноглобулина G_λ.

Показатели инфракрасной спектрометрии представлены в табл. 3.

Критерий Маханалобиса между спектральными характеристиками пробы и установленными показателями поглощения группы больных множественной миеломы составляет 10,06 условных единиц. Эта величина находится ниже порогового значения, соответствующего 20 усл.ед. Это означает, что с вероятностью 96,6% пациент страдает множественной миеломой.

Диагноз подтвержден комплексом рутинных методов исследования.

Пример 2. Больной Т., 74 г. История болезни N 507. Жалобы на боль в поясничном отделе позвоночника.

Клинический анализ крови: эр 3,9х10, Hb 113 г/л, тром 190х10, л 6х10, б 0%, э 1,5%, п 4,5%, с 64%, лимф 22,5%, м 7,5%, СОЭ 42 мм/ч.

Биохимический анализ крови: общий белок 80 г/л, альбумины 51,4%, глобулины: альфа1 4,8%, альфа2 6,4%, бета 12%, гамма 25,4%. Миелограмма: плазматические клетки 9%. Рентгенография костей скелета.

Заключение: остеопороз ребер, костей таза, позвоночника.

Показатели инфракрасной спектрометрии представлены в табл. 4.

Расстояние спектральных характеристик пробы до характеристик множественно миеломы составило 184,54 условных единиц и находится значительно выше порогового значения (20 усл. ед). Это означает, что у больного диагноз множественной миеломы не подтвердился.

При проведенном клинико-инструментальном исследовании был установлен диагноз метастазов рака в кости из невыявленного первичного очага.

Показатели инфракрасной спектрометрии позволяют дать комплексную оценку состояния фундаментальных компонентов крови и особенностей структурирования водного компонента.

Преимуществом описанного метода является возможность быстрой и достоверной диагностики множественной миеломы, что дает возможность его использования как в качестве скриннингового теста, так и в комплексном исследовании в трудных диагностических случаях.

Способ может быть использован в медицине, а именно в гематологии. У больного проводят исследование сыворотки крови, в которой определяют коэффициенты пропускания инфракрасной спектрометрии в девяти поддиапазонах спектра электромагнитного излучения: 3500-3200 см^-1, 3085-2832 см^-1, 2120-1800 см^-1, 1710-1610 см^-1, 1600-1535 см^-1, 1542-1425 см^-1, 1430-1210 см^-1, 1127-1057 см^-1, 1067-930 см^-1 и по данным спектрометральных характеристик этих поддиапазонов исследуемой сыворотки и установленных показателей спектральных характеристик у больных с подтвержденной множественной миеломой определяют предельное пороговое значение критерия Маханолобиса, соответствующее 20 усл. ед. и при значении критерия ниже порогового диагностируют множественную миелому. Способ более точен, достоверен, быстрее выполним. 4 табл.

Способ диагностики множественной миеломы, включающий исследование сыворотки больного, отличающийся тем, что в сыворотке крови определяют коэффициенты пропускания инфракрасной спектрометрии в девяти поддиапазонах спектра электромагнитного излучения: 3500 - 3200 см^-1, 3085 - 2832 см^-1, 2120 - 1800 см^-1, 1710 - 1610 см^-1, 1600 - 1535 см^-1, 1542 - 1425^-1, 1430 - 1210 см^-1, 1127 - 1057 см^-1, 1067 - 930 см^-1, и по данным спектральных характеристик этих поддиапазонов исследуемой сыворотки и установленных показателей спектральных характеристик у больных с подтвержденной множественной миеломой определяют предельное пороговое значение критерия Маханалобиса, соответствующее 20 усл. ед. и при значении критерия ниже порогового диагностируют множественную миелому.