СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ НАРУШЕНИЙ МЕНСТРУАЛЬНОЙ ФУНКЦИИ У ДЕВОЧЕК-ПОДРОСТКОВ Российский патент 2003 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии.

Становление репродуктивной системы женщины определяется ее морфофункциональным созреванием в подростковом периоде жизни. Менструальная функция у девочек-подростков является индикатором формирования репродуктивного здоровья. В связи с этим вопрос поиска возможностей для прогнозирования и ранней диагностики нарушений менструальной функции на данном этапе развития организма становится весьма актуальным.

В качестве аналога был использован метод ультразвукового исследования матки и яичников с применением двух методик: трансабдоминальной и дополнительно к ней трансвагинальной (у девушек, живущих половой жизнью). Сканирование осуществлялось на аппарате Sonoace 4800 (Южная Корея), оснащенном трансабдоминальным (3,5 МГц) и трансвагинальным (6,5 МГц) датчиками.

Недостатком данного метода является диагностика уже выраженной, т.е. органической, патологии.

В качестве прототипа авторы предлагают использовать определение белковых и стероидных гормонов (ПРЛ, ФСГ, ЛГ, Е2, тестостерон) сыворотки крови из локтевой вены методом иммуноферментного анализа (ИФА). Методика проведения ИФА гонадотропных (белковых) гормонов заключалась в следующем: в пробирки вносят по 20 мкл исследуемой сыворотки, стандартных растворов и контрольной сыворотки. В каждую пробирку добавляют по 200 мкл конъюгата и по 1 шарику, покрытому антителами к ФСГ. Инкубируют 30 минут в инкубаторе при постоянном встряхивании. С помощью промывателя отмывают шарики от реактивов. Добавляют по 250 мкл рабочего раствора субстрата. Инкубируют в темноте при постоянном встряхивании в течение 15 минут, после чего добавляют по 1 мл серной кислоты. Фотометрируют при длине волны 450 нм с использованием фотометра Роше. Методика определения стероидных гормонов (эстрадиола и тестостерона) проводилась следующим образом: в лунки планшета вносят по 25 мкл (при определении эстрадиола) и по 50 мкл (при определении тестостерона) стандартных растворов, контролей и исследуемой сыворотки. Добавляют по 200 мкл конъюгата и инкубируют 120 минут при 37^oС, не закрывая планшет пленкой. Проводят трехкратную промывку планшета промывным буфером, тщательно удаляя буфер после каждой промывки. Добавляют по 100 мкл рабочего раствора субстрата в каждую лунку. Инкубируют 15 минут при 25^oС, после чего добавляют по 100 мкл останавливающего раствора. Снимают показания с помощью планшетного ридера при длине волны 450 нм.

Недостатками данного метода являются его дороговизна, трудоемкость, инвазивность, необходимость многократного проведения и недостаточная информативность исследования вследствие крайней нестабильности гормональных показателей у данной возрастной группы.

Авторы предлагают прогнозирование нарушений менструальной функции осуществлять по результатам анализа среднего показателя степени пропускания инфракрасного излучения слюной, основанного на изучении функционального состояния организма на молекулярном уровне. Для осуществления поставленной задачи была использована аппаратно-программная система ИКАР (Патент на изобретение 2137126 от 10.09.1999 "Способ исследования биологических жидкостей и устройство для его осуществления"; Сертификат об утверждении типа средств измерений "анализаторов инфракрасных ИКАР-9/1" RU.C.010 5745 от 20.11.1998).

Выявление особенностей ИК-спектра слюны девочек-подростков проводилось путем 10-кратного исследования слюны циклическим (длительность цикла около 1 секунды) измерением показателя степени пропускания инфракрасного излучения в девяти поддиапазонах: 1-(3500-3200 см^-1), 2-(3085-2832 см^-1), 3-(2120-1880 см^-1), 4-(1710-1610 см^-1), 5-(1600-1535 см^-1), 6-(1543-1425 см^-1), 7-(1430-1210 см^-1), 8-(1127-1057 см^-1), 9-(1067-930 см^-1) и усреднением полученных значений по каждому каналу.

Объектом исследования явилась слюна 114 девочек-подростков, из которых 84 девочки имели нарушения менструальной функции (основная группа), проявляющиеся гипо-, гиперменструальным синдромом, нерегулярным циклом и альгоменореей, и 30 девочек-подростков были с нормальными показателями менструальной функции (контрольная группа).

Было установлено, что наиболее информативным для диагностики нарушений менструальной функции у девочек-подростков является 6 канал с диапазоном длин волн, равным 1543-1425 см^-1, где обнаруживаются наибольшие различия в показателях степени пропускания инфракрасного излучения.

В соответствии со средним показателем степени пропускания инфракрасного излучения в диапазоне длин волн, равном 1543-1425 см^-1, девочки-подростки разделились на три группы. В первую группу со средним показателем от 47,8 до 56,3% вошли девочки с нормальным менструальным циклом. Они характеризовались отсутствием функциональных и органических нарушений в становлении репродуктивной системы. Ко второй группе были отнесены пациентки с показателем степени пропускания инфракрасного излучения, равным 23,9-38,6%. У данного контингента обследованных были диагностированы выраженные нарушения менструальной функции, характеризующиеся наличием не только функциональных, но и органических нарушений в становлении репродуктивной системы. Третья группа по показателям степени пропускания инфракрасного излучения (38,7-47,7%) приближалась к патологии, но клинически все еще характеризовалась нормальными показателями менструальной функции, а нарушения в становлении репродуктивной системы носили эпизодический, не четко выраженный характер.

Клинический пример 1
Пациентка А., 15 лет. Жалоб не предъявляет.

Анамнез: наследственность не отягощена. Перенесенные заболевания: ветряная оспа, эпидемический паротит. Менструальная функция с 12 лет, по 3-4 дня, через 28 дней. Половую жизнь отрицает. Последняя менструация - 5/V.

Объективное исследование: общее состояние удовлетворительное. Кожные покровы розовые, чистые. Удовлетворительного питания. Формула полового развития: Ма3Рb3Ах3Ме3. По органам без особенностей. PS - 65 уд. в минуту. АД - 120/80 мм рт. ст. Физиологические отправления в норме.

P.R.: оволосение на лобке по женскому типу. Наружные половые органы развиты правильно. Девственная плева не нарушена. Тело матки плотное, нормальных размеров, безболезненное, подвижное, в правильном положении. Придатки с обеих сторон не определяются.

При углубленном обследовании гормональные показатели (концентрация в сыворотке крови ФСГ, ЛГ, ПРЛ, Е2, ТС) и данные ультразвукового исследования матки и яичников соответствовали возрастной норме.

Девочке была проведена ИК-спектроскопия смешанной слюны. По результатам анализа среднего показателя степени пропускания инфракрасного излучения, равного 54,3%, она была отнесена в группу с нормальными показателями менструальной функции.

При повторном наблюдении через 10 месяцев пациентка жалоб не предъявляла, и менструальная формула ее соответствовала нормативным показателям.

Клинический пример 2
Пациентка А., 16 лет. Жалоб не предъявляет.

Анамнез: наследственность не отягощена. Перенесенные заболевания: корь, скарлатина, эпидемический паротит. Менструальная функция с 13 лет, по 3-4 дня, через 30 дней. Половую жизнь отрицает. Последняя менструация - 15/IV.

Объективное исследование: общее состояние удовлетворительное. Кожные покровы розовые, чистые. Пониженного питания. Формула полового развития: Ma2Pb3Ax3Me3. По органам без особенностей. PS - 75 уд. в минуту. АД - 110/70 мм рт. ст. Физиологические отправления в норме.

P. R. : оволосение на лобке по женскому типу. Наружные половые органы развиты правильно. Девственная плева не нарушена. Тело матки плотное, нормальных размеров, безболезненное, подвижное, в правильном положении. Придатки с обеих сторон не определяются.

При углубленном обследовании гормональные показатели (концентрация в сыворотке крови ФСГ, ЛГ, ПРЛ, Е2, ТС) и данные ультразвукового исследования матки и яичников соответствовали возрастной норме.

Девочке проведена ИК-спектроскопия смешанной слюны. По результатам анализа среднего показателя степени пропускания инфракрасного излучения, соответствующего 41,2%, она была отнесена к группе риска по развитию нарушений менструальной функции.

В ходе наблюдения через 10 месяцев у пациентки развились нарушения по типу опсоменореи, что позволяет авторам говорить о возможности прогнозирования.

Клинический пример 3
Пациентка С., 17 лет. Предъявляет жалобы на отсутствие менструальной функции.

Анамнез: наследственность отягощена гипертонической болезнью по материнской линии. Перенесенные заболевания: частые ОРВИ, грипп, ангина. Менструальная функция отсутствует. Половую жизнь отрицает. Объективное исследование: общее состояние удовлетворительное. Кожные покровы розовые, чистые. Пониженного питания. Формула полового развития: Ма2Рb3Ах3Ме0. По органам без особенностей. PS - 79 уд. в минуту. АД - 110/70 мм рт. ст. Физиологические отправления в норме.

P. R. : оволосение на лобке по женскому типу. Наружные половые органы развиты правильно. Девственная плева не нарушена. Тело матки плотное, меньше нормы, безболезненное, подвижное, в правильном положении. Придатки с обеих сторон не определяются.

При углубленном обследовании по данным УЗИ была диагностирована гипоплазия матки и яичников, показатели гормональных исследований свидетельствовали о снижении уровня эстрадиола и гонадотропинов в крови.

Результаты анализа среднего показателя степени пропускания инфракрасного излучения (в данном случае равного 24,1%) характеризовали состояние гомеостаза девочки как измененное и констатировали факт нарушения менструальной функции как показателя формирования репродуктивной системы.

Изобретение относится к области медицины, в частности к гинекологии. Способ позволяет повысить информативность при прогнозе нарушений менструальной функции у девочек-подростков, неинвазивен и прост в исполнении. Методом инфракрасной спектроскопии в диапазоне длин волн, равном 1543-1425 см^-1, исследуют слюну, определяют средний показатель степени пропускания инфракрасного излучения в норме (от 47,8 до 56,3%) и при значении среднего показателя степени пропускания инфракрасного излучения от 38,7 до 47,7% прогнозируют нарушения менструальной функции, выраженные же нарушения определяют при значении среднего показателя степени пропускания от 23,9 до 38,6%.

Способ прогнозирования нарушений менструальной функции у девочек-подростков, отличающийся тем, что методом инфракрасной спектроскопии в диапазоне длин волн, равном 1543-1425 см^-1, исследуют слюну, определяют средний показатель степени пропускания инфракрасного излучения в норме (от 47,8 до 56,3%) и при значении среднего показателя степени пропускания инфракрасного излучения от 38,7 до 47,7% прогнозируют нарушения менструальной функции, выраженные же нарушения определяют при значении среднего показателя степени пропускания от 23,9 до 38,6%.