СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ КАНДИДОЗНОЙ СЕПТИЦЕМИИ Российский патент 2001 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторному исследованию.

Установлено, что поверхностные формы кандидоза (кандидоз кожи и слизистых) в результате попадания гриба в кровяное русло могут обусловить развитие генерализованного процесса - кандидозную септицемию, поскольку прорастание псевдомицелием гриба стенок сосудов и наличие его элементов в просвете наблюдается при самых различных локализациях кандидозных поражений. Гематогенное распространение гриба Candida, как правило, приводит к морфологическим изменениям в различных тканях и органах (О.К. Хмельницкий, Р.А. Аравийский, О.Н. Экземпляров. Кандидоз. Ленинград, Медицина, 1984, стр. 45-69).

Известны лабораторные способы выявления генерализованных форм кандидоза, в частности микробиологический, осуществляемый посредством посева крови на жидкие питательные среды серологический - для выявления специфических антител в сыворотке крови (В.М. Лещенко "Лабораторная диагностика грибковых заболеваний", М., Медицина, 1977 г., с. 107-111).

Недостатком этих методов является то, что они не позволяют точно диагностировать раннюю стадию генерализации кандидоза. Кроме того, при серологическом исследовании может быть получен ложноположительный результат за счет присутствующих антител к патогенным грибам.

Наиболее близким к заявляемому способу является патоморфологическое исследование гнойно-некротических очагов различных биологических тканей для выявления кандидоза, осуществляемое с помощью оптической микроскопии. Помимо специфического для кандидозного сепсиса некробиотического поражения тканей, в ряде случаев, при кандидозной септицемии, определяются фрагменты псевдомицелия гриба, а также почкующиеся клетки Candida (О.К. Хмельницкий, Р.А. Аравийский, О.Н. Экземпляров. Кандидоз, Ленинград, Медицина, 1984, стр. 45 - 69).

Однако патоморфологическое исследование проводится на удаленных органах или тканях, секционном материале, т.е. слишком поздно, когда процесс гематогенной диссеминации осложняется формированием метастатических очагов размножения патогенных грибов со всеми вытекающими отсюда последствиями.

Поставленной задачей было устранение указанного недостатка и создание такого способа диагностики, который позволил бы достоверно выявлять кандидозную септицемию у обследуемых до стадии формирования метастатических гнойно-некротических очагов в тканях организма.

Это достигается тем, что в способе диагностики кандидозной септицемии при исследовании биологической ткани с помощью оптической микроскопии исследуют сыворотку крови, которую наносят в объеме 0,01 - 0,02 мл в форме капли на поверхность предметного стекла, высушивают при температуре 18-30^oC в течение 18-24 часов, просматривают образец при скрещенных поляризаторах и при выявлении анизотропных образований в виде фрагментов псевдомицелия и очаговых скоплений, диагностируют кандидозную септицемию.

На чертеже изображен фрагмент высушенного образца сыворотки крови с наличием желто-коричневых образований, видимых при обычной микроскопии (фиг. 1), при скрещенных поляризаторах (фиг. 2) и при увеличении при скрещенных поляризаторах (фиг. 3, Х45) (пример 1).

Способ осуществляется следующим образом.

В стерильных условиях берут 0,02 мл сыворотки крови, наносят на поверхность предметного стекла в форме капли, высушивают при температуре 20 - 30^oC в течение 18 - 24 часов, просматривают образцы при оптической микроскопии при наличии анизотропных включений в виде фрагментов псевдомицелия гриба, мелких образований круглой формы в виде очаговых скоплений, иногда остатков опоры диагностируют кандидемию.

Пример 1.

Больная С. , 32 неделя беременности. Обострение хронического пиелонефрита. Сахарный диабет. Внутриутробная смерть плода. Исследование сыворотки крови предложенным способом: выявлены анизотропные фрагменты мицелия и очаговые скопления мелких, круглой формы, образований (пример 1). Заключение: кандидемия. Микробиологическое исследование спустя 72 часа подтвердило данное заключение: рост грибов рода Candida.

Проведено данным способом обследование 64 беременных женщин, страдающих сахарным диабетом. У 2 пациенток выявлена кандидозная септицемия. Проведен курс лечения амфотерицином. Беременность в обоих случаях сохранена, в дальнейшем протекала без осложнений, роды закончились благополучно. Дети по шкале Апгара 8 - 9 баллов.

Метод технически прост, быстро осуществим, исключает ложноположительный результат и дает возможность ликвидации перехода в септикопиемическую форму кандидоза.

Изобретение относится к медицине а именно к лабораторному исследованию. Исследуют биологическую ткань с помощью оптической микроскопии. При этом исследуют сыворотку крови, которую наносят в объеме 0,01 - 0,02 мл в форме капли на поверхность предметного стекла, высушивают при 18 - 30°С в течение 28 - 24 ч, просматривают образец при скрещенных поляризаторах и при выявлении анизотропных образований в виде фрагментов псевдомицелия и очаговых скоплений, диагностируют кандидозную септицемию. Метод технически прост, быстро осуществим, исключает возможность ложноположительного результата и дает возможность ликвидации перехода в септикопиемическую форму кандидоза. 3 ил.

Способ диагностики кандидозной септицемии при исследовании биологической ткани с помощью оптической микроскопии, отличающийся тем, что исследуют сыворотку крови, которую наносят в объеме 0,01 - 0,02 мл в форме капли на поверхность предметного стекла, высушивают при 18 - 30°С в течение 28 - 24 ч, просматривают образец при скрещенных поляризаторах и при выявлении анизотропных образований в виде фрагментов псевдомицелия и очаговых скоплений, диагностируют кандидозную септицемию.