СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЛЕКАРСТВЕННОГО ПРЕПАРАТА ХОЛЕСАН Российский патент 2002 года по МПК A61K9/48 

Изобретение относится к медицине и медицинской промышленности, а именно к гастроэнтерологическому средству - препарату, обладающему органоспецифическим действием и предназначенному для лечения заболеваний желудочно-кишечного тракта, печени и желчных путей и способу его получения.

В последние годы широкое распространение получили заболевания желудочно-кишечного тракта, доля которых составляет 40-50%.

Актуальность проблемы подтверждается большим количеством исследований, проведенных в этой области. Как правило, решение этой проблемы сводится либо к созданию целых композиций, включающих экстракты растительного происхождения (RU 2034849, RU 2045956, RU 2087154, RU 2106876), либо к поиску технологий по их очистке и получению (SU 1343597, SU 1343592, RU 2034849), либо к выделению биологически активных средств из животного сырья (US 3956483, RU 2019172, RU 2054947).

В настоящее время известен целый ряд препаратов, обладающих желчегонным, холекинетическим, холелитолитическим действием. Это такие препараты как: олиметин, капсулы (ОАО "Нижфарм", Россия), тыквеол капсулы 450 мг (ЗАО "Европат Биофаарм", Россия), гепабене капсулы ("Merkle GmbH", Австрия), гепатофальк планта капсулы ("Dr. Falk Pharma" GmbH", Германия) - препараты из растительного сырья; уросан капсулы 250 мг ("Pro. Med. CS Pharma", Чешская Республика), одестон таблетки 200 мг ("Polfa", Польша), хенофальк капсулы 250 мг ("Dr. Falk Pharma" GmbH", Германия) - препараты, полученные из химического сырья. Имеющаяся потребность отечественного здравоохранения в доступных гастроэнторологических средствах стимулировала работы по получению отечественных препаратов из сырья животного происхождения, в том числе и за счет разработки новых лекарственных форм.

В качестве лекарственных средств для заместительной терапии при расстройствах пищеварения отечественная фармацевтическая промышленность выпускает лиобил (ФС 42-2523-88), таблетки с лиофилизированной бычьей желчью, панкреатин (ФС 42-1397-83), таблетки полиферментного препарата, содержащие трипсин и амилазу ("Регистр лекарственных средств 2000"). Недостатком этих лекарственных средств является то, что больной вынужден принимать их одновременно.

Известно желчегонное средство аллохол (ФС 42-3229-95), выпускаемое в форме таблеток покрытых оболочкой. Одна таблетка содержит желчи животной 80 мг, экстракта чеснока сухого 40 мг, экстракта крапивы 5 мг, угля активированного 25 мг. Недостатком этого препарата является его низкая терапевтическая активность.

Известно средство, обладающее желчегонным действием, включающее сухую медвежью желчь 0,00003-0,0045 г и сахар 0,015-1,5 г (RU 2003338). Недостатком этого средства является неудобство его применения. Известен препарат холензим (ФС-42-2964-93), выпускаемый отечественной промышленностью, представляющий собой таблетки, покрытые кислотно-лабильной оболочкой.

Состав на одну таблетку, г:
Желчи сухой - 0,1
Поджелудочной железы высушенной - 0,1
Слизистых тонких кишок высушенных - 0,1
Масса таблетки без оболочки 0,3 г.

Недостатком этого лекарственного средства является низкое содержание протеолитических и других ферментов.

Известно лекарственное средство для лечения детей с гастродуоденальной патологией, представляющее собой гранулы пепсина К (куриного) (RU 2054948).

Препарат включает в состав следующие компоненты, мас. ч.:
Пепсин куриный (10%) - 7,0
Сахарная пудра - 88,0-78,0
Сахар в сиропе - 5,0-15,0
Недостатком данного лекарственного средства является узкий диапазон действия, входящее в состав препарата действующее вещество подвергается увлажнению, тепловому воздействию при сушке гранулята и давлению при уплотнении массы.

В последние годы фармацевтическая промышленность за рубежом выпускает значительное количество препаратов перорального применения в виде капсул, которые имеют преимущества по сравнению с другими лекарственными формами: препараты быстрее и равномернее распределяются по слизистой оболочке желудка, быстрее и легче всасываются, не оказывая механического (раздражающего) действия, не содержат вспомогательных и балластных веществ.

Известен способ получения высушенной субстанции, полученной из слизистых оболочек и покровного эпителия мышечного отдела желудка клинически здоровой птицы - прототип (заявка 98101436, патент RU 2144826).

Настоящим изобретением поставлена и решена задача разработки способа получения лекарственного препарата холесан в твердых желатиновых капсулах, обладающего характерным для гастроэнтерологии спектром фармакологического действия и широким спектром терапевтического действия - лечение заболеваний желудочно-кишечного тракта, печени и желчных путей, а также для растворения мягких холестериновых камней.

Сущность изобретения заключается в том, что смешивают высушенную и измельченную до однородного порошка кутикулу (слизистые оболочки и покровный эпителий мышечного отдела желудка клинически здоровой птицы) и сухую птичью желчь в соотношении 4:1, просеивают через сито с диаметром отверстий 0,75 мм и дозируют в твердые желатиновые капсулы по 0,3 г.

При получении лекарственного препарата холесан в капсулах используют типовое оборудование, применяемое на химико-фармацевтических заводах (измельчители, вибросита, автоматы для наполнения капсул, упаковочные машины).

Состав и количественное содержание препарата холесан в твердых желатиновых капсулах установлены в результате проведения исследований.

Использование при получении лекарственной формы препарата холесан высушенной субстанции, полученной из слизистых оболочек и покровного эпителия мышечного отдела желудка клинически здоровой птицы (патент RU 2144826) и субстанции сухой птичьей желчи, способствовало получению препарата с полифункциональными свойствами и широким спектром действия. Введение в состав препарата сухой птичьей желчи дало возможность получить лекарственное средство с комбинированным действием, которое усиливает секрецию желчи и облегчает ее поступление в кишечник, имеет еще и "гепатопротекторный" характер. Облегчая отток желчи и снижая этим нагрузку на паренхиму печени, облегчая кровоток, уменьшая воспалительные явления, препарат холесан способствует улучшению общего функционального состояния печени. Препарат холесан относится также к холелитолическим средствам и способствует растворению мягких холестериновых камней.

Соотношение смешиваемых субстанций 4:1 установлено практическим путем. При данном соотношении порошок обладает хорошими технологическими свойствами - достаточная насыпная масса, хорошая сыпучесть продукта при дозировании.

Исключение из состава лекарственной формы всех вспомогательных веществ дает возможность получить лекарственный препарат, не обладающий повреждающим влиянием на слизистую оболочку желудка.

Предлагаемый способ получения препарата в виде порошкообразной дозируемой формы, при котором исключается контакт композиционной смеси с влагой, температурой, а также отсутствует воздействие давления при уплотнении массы, дает возможность получения лекарственного препарата стабильного при хранении, с более высокой биодоступностью.

Данная лекарственная форма холесан в твердых желатиновых капсулах и способ ее получения не описаны в литературе и эта лекарственная форма ранее не выпускалась.

Способ получения лекарственной формы холесан в твердых желатиновых капсулах заключается в следующем.

1. Высушенные слизистые оболочки и покровный эпителий мышечного отдела желудка клинически здоровой птицы измельчают до получения однородного порошка.

2. Проводят измельчение субстанции сухой куриной желчи.

3. Смешивают измельченные субстанции слизистых оболочек и покровного эпителия мышечного отдела желудка клинически здоровой птицы (кутикулы) и сухой куриной желчи.

Субстанции высушенной кутикулы и сухой куриной желчи смешивают в соотношении 4: 1 в универсальном смесителе для порошков с V-образным контейнером. Получают субстанцию препарата холесан.

4. Просеивают полученную субстанцию препарата холесан.

Порошкообразный препарат холесан просеивают через сито с диаметром отверстий 0,75 мм.

5. Наполняют желатиновые капсулы порошком.

Субстанцию препарата холесан фасуют в твердые желатиновые капсулы по 0,3 г.

Желатиновые капсулы с препаратом упаковывают в пластиковые контейнеры с крышкой, или стеклянные банки типа БДС-30, или в контурную (блистерную) ячейковую или иную упаковку.

Изобретательский уровень предлагаемого изобретения заключается в том, что предложен способ получения и лекарственная форма препарата холесан, содержащая смесь порошков, - порошок, полученный из слизистой оболочки и покровного эпителия мышечного отдела желудка клинически здоровой птицы и порошок птичьей желчи, взятых в соотношении 4:1, без каких-либо вспомогательных веществ, которая дозируется в твердые желатиновые капсулы по 0,3 г, что позволяет получить лекарственное средство с широким спектром терапевтического действия, с хорошими технологическими свойствами - достаточная насыпная масса, хорошая сыпучесть продукта при дозировании.

Полученный согласно изобретению препарат холесан в твердых желатиновых капсулах не обладает повреждающим влиянием на слизистую оболочку желудка, содержит в своем составе кератиноподобные вещества белковой природы, хондроитинсульфаты, гликоамингликаны, муцин и желчные кислоты.

Проведены фармакологические и токсикологические исследования лекарственной формы препарата холесан в капсулах.

Специфическую фармакологическую активность содержимого капсул препарата холесан изучали с использованием стандартных методов оценки полифункционального и побочного действия в сравнении с другими препаратами данной группы, применяемыми в гастроэнтерологии.

В связи с тем, что препарат содержит сульфатированные и карбоксилированные гликозоаминогликаны, глюкопротеиды, желчные кислоты, сиаломуцины и протеолитические ферменты, были исследованы следующие его свойства.

Наличие желчных кислот (холиевая кислота) - 21,6%.

Протеолитическую активность определяли по методу Ансена и она составила 40 ед/г.

Адсорбционные свойства определяли по отношению к метиленовому оранжевому - 16,1 мг/г, метиленовому синему - 15,4 мг/г и CuS0₄ - 7,5 мг/г.

Бактериостатическое действие препарата на грамположительные микроорганизмы изучали методом луночек. Были использованы штаммы микроорганизмов Bac. subtilis, Staph.aureus, Salmonella enteritidis. Установлено, что зоны задержки роста грамположительных бактерий составили 17-20 мм.

Токсикологические исследования препарата холесан проводились в два этапа: сначала изучали острую, а затем субхроническую токсичность с целью выявления возможного подавляющего действия их на организм экспериментальных животных, а также оценки их безопасности.

Для изучения токсичности холесана был подобран широкий диапазон доз (концентраций) лекарственного средства, различные экспериментальные животные и критерии оценки безопасности применяемого препарата (динамика показателей клинического статуса с учетом биохимических показателей крови и патологоморфологических изменений в органах и тканях).

Препарат холесан не оказывал токсического действия на экспериментальных животных в дозах, превышающих максимальную терапевтическую в 100 раз. Существенных отклонений от нормы в опытных группах животных не выявлено.

Таким образом, полученная по предлагаемому способу лекарственная форма препарата холесан в капсулах представляет собой эффективное безопасное средство с высокой относительной степенью биодоступности, не обладает повреждающим влиянием на слизистую оболочку желудка. Лекарственная форма препарата холесан в капсулах стабильна при хранении (не изменяет цвета, влажности, биологической активности).

Изобретение иллюстрируется следующими примерами:
Пример 1
Субстанцию препарата из слизистых оболочек и покровного эпителия и субстанцию из сухой куриной желчи измельчают до получения однородного порошка.

Измельченные субстанции смешивают в соотношении 2:1.

Порошок просеивают через сито с диаметром отверстий 0,75 мм.

Смесь фасуют в твердые желатиновые капсулы 1 по 0,3 г.

Пример 2
Субстанцию препарата из слизистых оболочек и покровного эпителия и субстанцию из сухой куриной желчи измельчают до получения однородного порошка.

Измельченные субстанции смешивают в соотношении 3:1.

Порошок просеивают через сито с диаметром отверстий 0,75 мм.

Смесь фасуют в твердые желатиновые капсулы 1 по 0,3 г.

Пример 3
Субстанцию препарата из слизистых оболочек и покровного эпителия и субстанцию из сухой куриной желчи измельчают до получения однородного порошка.

Измельченные субстанции смешивают в соотношении 4:1.

Порошок просеивают через сито с диаметром отверстий 0,75 мм.

Смесь фасуют в твердые желатиновые капсулы 1 по 0,3 г.

Проведенные исследования показали, что терапевтическая эффективность препарата холесан достигается при смешивании субстанции в соотношении 2:1, 3: 1, 4:1, однако при оценке технологических свойств смеси порошков соотношение 4: 1 наиболее оптимально, так как не требует введения вспомогательных веществ, что дает возможность получать натуральный биопрепарат без химических добавок.

Сведения, подтверждающие протеолитическое, холелитолическое и гепатопротекторное действие.

1. Протеолитическое действие препарата холесан обусловлено наличием собственных протеолитических ферментов, а также стимуляцией экзокринной деятельности поджелудочной железы желчными кислотами, входящими в состав препарата.

Наблюдали группу больных (8 человек) с диагнозом билиарнозависимый хронический панкреатит. У больных наблюдались характерные панкреатические боли, диспептические явления, поносы, похудание, увеличение головки поджелудочной железы, механическая желтуха из-за сдавливания общего желчного протока, ухудшение внешнесекреторной функции, в каловых массах - изобилие непереваренной пищи. Назначен и проведен курс лечения препаратом холесан по 2 капсулы 3 раза в день в течение 20 дней.

На фоне этой терапии интенсивность болей значительно уменьшилась, урчание и вздутие живота исчезли, частота стула с 14 дня терапии 1-2 раза в день кашицеобразной или оформленной консистенции, время карболеновой пробы 18 часов, при бактериологическом исследовании увеличилось количество лакто- и бифидобактерий, резко уменьшилось (до исчезновения некоторых видов) количество условно-патогенной аэробной и анаэробной флоры.

В общем анализе крови и мочи, в биохимическом анализе крови изменений после лечения препаратом холесан обнаружено не было.

Препарат обладает также липолитическим действием.

Клинические наблюдения проведены на 42 больных. Нарушение процессов всасывания липидов в кишечнике сопровождалось стеатореей смешанного типа у большинства больных целиакией (группа из 11 человек: 7 женщин, 4 мужчины) и у трети больных хроническим энтеритом (группа из 17 человек: 12 женщин и 5 мужчин). Потеря общих липидов (жира) с калом за сутки у больных с целиакией составила 25,3±3,6 г (Р<0,05), у больных хроническим энтеритом - 15,5±1,8 г (Р<0,05). У части тяжелобольных стеаторея достигала 68,5±6,4 г в сутки. У большинства больных целиакией (83%) и хроническим энтеритом (77%) отмечено снижение общих липидов сыворотки крови - 3,9±0,8 г/л (Р<0,05) и 5,3±1,1 г/л (Р<0,05) соответственно при норме 7,65±1,8 г/л. Низкий уровень липидов и холестерина (до 3,11±0,32 ммоль (Р<0,05) при целиакии и до 3,89±0,54 ммоль (Р<0,05) при энтерите при норме 4,73±0,56 ммоль), помимо расстройства всасывания в тонком кишечнике, объясняется ускоренным пассажем жира через кишечник и влечет за собой повышенный расход в организме общих липидов как энергетического материала.

В липопротеидном спектре крови выявлено статистически значимое снижение уровня α-липопротеидов у больных целиакией до 21,14±2,54%, хроническим энтеритом до 23,60±2,25% при норме 29,13±1,15%, β-липопротеидов - до 47,40±3,2% и 41,32±2,46% соответственно при норме 52,65±1,11%, при одновременном повышении уровня пре-β-липопротеидов при целиакии до 39,65±3,43%, хроническом энтерите до 34,35±2,35% при норме 26,43±1,5%.

Жирно-кислотный спектр общих липидов крови у всех больных, прошедших курс лечения препаратом холесан, изменялся неоднозначно, но имел явную тенденцию к формированию спектра, соответствующего I и II степени тяжести синдрома малабсорбции. Так, у 22 из 28 больных К_т определялся в пределах 0,67-0,88, у 5 больных - в пределах 0,9-1,0, у одного больного - 0,49, то есть не изменился. Эффективность препарата холесан может быть отнесена к эффективности препаратов, хорошо зарекомендовавших себя в клинике для лечения гастроэнтерологических заболеваний, связанных с нарушением липидного обмена.

2. Холелитолическое действие препарата оценивали у пациентов при ультразвуковом исследовании (УЗИ) по изменению объема желчного пузыря. У 15 больных объем желчного пузыря натощак при УЗИ составлял 18,2-45,2 мл, а через 15 минут после приема препарата холесан отмечался прирост объема пузыря на 12,0%, который через 1 час составлял 7,3-32,7%.

3. Гепатопротекторные свойства препарата холесан изучали при лечении хронического гепатита, цирроза печени.

Клинические наблюдения проведены на 17 больных с циррозом печени и обострением хронического гепатита. 9 человек госпитализированы в клинику в связи с кровотечением из варикозно расширенных вен пищевода и кардиального отдела желудка. Тяжесть клинического течения заболевания у всех больных была обусловлена эндогенной энтоксикацией вследствие печеночной недостаточности. Нарушение со стороны центральной нервной системы проявились заторможенностью (8 больных), неадекватным поведением (4), сопором (5). Кожные покровы были желтушные, склеры иктеричные. На передней брюшной стенке имелась расширенная венозная сеть. Плотная печень выступала из-под реберной дуги на 8-15 см. У больных был выраженный асцит, у больных с состоявшимся кровотечением отмечалась мелена. Кровотечение останавливали постановкой зонда Блэк-Мора и проведением гематостатической терапии.

У всех больных в анализах крови отмечалась гипербилирубинемия и гиперферментемия (таблица 1). Концентрация билирубина общего составляла 126±14,7 мкмоль/л, у двух больных она достигла 424,8 мкмоль/л и 589,1 мкмоль/л (связ. 318,6 мкмоль/л и 428,5 мкмоль/л). На фоне желтухи уровень АЛТ составлял 132,8±14 ME, ACT 120,97±10,9 ME.

Комплексное лечение включало: повторные процедуры плазмафереза и плазмосорбции, гемосорбции, диализы с использованием взвеси гепатоцитов. У 6 больных для удаления из брюшной полости асцитической жидкости был выполнен лапароцентез. Количество выводимой жидкости составляло 6-10 литров, а у 3-х больных - 16-22 литра.

Холесан больные принимали по схеме: 2 капсулы 3 раза в день в течение 3-х недель. У больных с кровотечением из варикозных вен пищевода и желудка лечение препаратом начинали через 2 дня после остановки кровотечения.

Как показали исследования на фоне стабилизации состояния больных и купирования симптомов печеночной недостаточности каких-либо побочных симптомов или осложнений не наблюдалось. Прием препарата не провоцировал повторного эпизода кровотечения. Ни один из больных не предъявлял жалобы на боли в животе или чувство дискомфорта на прием препарата. В процессе комплексного лечения улучшалось клиническое состояние больных, восстанавливался аппетит, постепенно нормализовалась функция желудочно-кишечного тракта. Отмечалась положительная динамика лабораторных данных и инструментальных показателей (таблица 1).

Таким образом, лечение больных с циррозом печени и обострением хронического гепатита препаратом холесан способствовало выходу больных из тяжелого и крайне тяжелого состояния. Исходя из данных экспериментальных исследований, прием больными препарата холесан в составе комплексного лечения способствовал восстановлению функции желудочно-кишечного тракта, улучшению процессов пищеварения, купированию диспепсических проявлений, снижению токсической нагрузки на измененную печень продуктов распада крови после кровотечения из варикозно расширенных вен пищевода и желудка.

Изобретение относится к медицине, а именно к способу получения гастроэнтерологического препарата в желатиновых капсулах. Способ получения лекарственного препарата, обладающего протеолитическим, гепатопротекторным и холелитолическим действием, характеризуется тем, что высушенные слизистые оболочки и покровный эпителий мышечного отдела желудка птицы измельчают до получения однородного порошка, смешивают с сухой измельченной куриной желчью при соотношении 4:1 соответственно, смесь просеивают через сито с диаметром отверстий 0,75 мм и дозируют в твердые желатиновые капсулы по 0,3 г. Технический результат - способ обеспечивает получение препарата с высокой биодоступностью, стабильного при хранении и не обладающего повреждающим действием на слизистую желудка. 1 табл.

Способ получения лекарственного препарата, обладающего протеолитическим, гепатопротекторным и холелитолическим действием, характеризующийся тем, что высушенные слизистые оболочки и покровный эпителий мышечного отдела желудка птицы измельчают до получения однородного порошка, смешивают с сухой измельченной куриной желчью при соотношении 4: 1 соответственно, смесь просеивают через сито с диаметром отверстий 0,75 мм и дозируют в твердые желатиновые капсулы по 0,3 г.