ГЕПАТОПРОТЕКТОРНОЕ СРЕДСТВО ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И КОРРЕКЦИИ ТОКСИЧЕСКИХ ПОРАЖЕНИЙ ПЕЧЕНИ Российский патент 2002 года по МПК A61K31/4412 A61P43/00 

Изобретение относится к медицине, а именно к созданию гепатопротекторных средств, и может быть использовано в гепатологии, токсикологии и фтизиатрии.

Известно, что в основе гепатотоксического эффекта ксенобиотиков лежит усиление интенсивности перекисного окисления липидов в мембранах гепатоцитов, где в основном и локализуются процессы метаболической детоксикации чужеродных соединений [1, 2].

Современные подходы к лечению токсических поражений печени включают в себя антиоксидантную терапию [3, 4, 5]. Известны синтетические антиоксиданты (дибунол, бутилоксианизол), которые не нашли широкого применения в лечебной практике, несмотря на имеющийся у них гепатопротекторный эффект [6, 7], что отчасти связано с наличием у них определенной токсичности.

Рядом исследований доказана эффективность эссенциальных фосфолипидов (эссенциале форте, полиен). Однако, опубликованы данные, свидетельствующие о нарастании холестаза и недостаточности противовоспалительной активности данных гепатопротекторных средств. В последнее время нашли применения гептрал, лив 52, силимарин, ЦББ, галстена [8, 9, 10].

Целью настоящего изобретения является создание гепатопротекторного средства на основе синтетического антиоксиданта из класса 3-гидроксипиридина, а именно использование в качестве гепатопротектора сукцината 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина (препарат мексидол).

Сущность изобретения состоит в том, что мембранопротекторное действие на клетки печени, токсически пораженной длительным применением туберкулостатиков (1 эксперименг) и четыреххлористым углеродом (2 эксперимент), достигается введением мексидола в дозе 25 и 50 мг/кг крысам и кроликам.

Фармакологический эффект, проявляемый мексидолом, заключается в профилактике и лечении гепатотоксического действия туберкулостатической химиотерапии (пример 1) и токсического поражения печени (пример 2).

Эффективность современной схемы лечения туберкулеза существенно лимитируется отрицательным побочным влиянием туберкулостатиков на функции печени и почек [11, 12].

Экспериментальные исследования были проведены на базах Ульяновского ГУ и Мордовского ГУ им. Н.П. Огарева (Саранск).

Пример 1.

Способ осуществляется следующим образом. Туберкулостатики при пероральном введении (рифампицин 50 мг/кг + изониазид 50 мг/кг + пиразинамид 150 мг/кг) в течение 14 дней вызывают токсическое поражение печени у беспородных крыс-самок весом 220-250 г. Коррекцию гепатотоксичности осуществляют введением мексидола в дозах 25 и 50 мг/кг подкожно через сутки. Первое введение осуществляют за 2 дня до затравки.

В качестве препарата сравнения выбран гептрал (S-аденазил-L-метионин), вводимый перорально в дозе 200 мг/кг ежедневно. Первое введение осуществляют за 2 дня до затравки. Рядом работ доказана способность гептрала препятствовать цитолизу и холестазу при поражениях печени различного генеза [13, 14].

Пример 2.

Во втором эксперименте 50% масляный раствор четыреххлористого углерода вводили кроликам однократно подкожно из расчета 4 мл на 1 кг массы тела. Изучено гепатопротекторное действие мексидола в дозе 50 мг/кг, вводимого внутривенно однократно в течение трех суток до инъекции ССl₂ и 2 раза в сутки в течение трех суток после инъекции ССl₄.

Препаратом сравнения выбран эссенциале, вводимый внутривенно в дозе 0,5 мл на 1 кг массы тела ежедневно 1 раз в сутки 3 дня до инъекции CCL₄ и 3 дня после инъекции CCL₄.

Эффективность фармакологического действия предложенного средства оценивали по современным общепринятым биохимическим показателям в сыворотке крови: активностям ACT, АЛТ, ЩФ, ГГТП, ЛДГ, ХЭ, ГР, амилазы, содержанию протеина общего, альбумина, билирубина общего, прямого, МДА, креатинина, мочевины, кальция, железа, уровню тимоловой пробы.

Длительное введение туберкулостатиков крысам вызывает развитие лекарственного гепатита, о чем свидетельствует умеренной степени нарастание активности ферментов цитолиза гепатоцитов (табл. 1). Применение гептрала и мексидола 25 мг/кг выявило одинаковый по степени мембранопротекции эффект. Использование мексидола в дозе 50 мг/кг в сутки выявило отсутствие нарастания активности ACT, АЛТ и ЛДГ общей, следовательно, свидетельствует о гепатопротекторном действии препарата повреждению ткани печени средствами туберкулостатической химиотерапии.

Антихолестатическое действие мексидола превзошло аналогичное действие препарата сравнения гепатрала (табл. 2). Дозозависимый эффект мексидола по анализируемым показателям табл. 2 выражен слабее. Однако подтверждается тенденция о первичности повреждений мембран гепатоцитов, нарушении внутрипеченочной гемодинамики и вторичности холестаза. С этих позиций становится понятным, почему коррелируют способности мексидола препятствовать цитолизу гепатоцитов и холестазу.

Повреждение паренхимы печени находит отражение в появлении синдрома гепатоцеллюлярной недостаточности, о чем свидетельствует снижение синтеза общего протеина, альбумина и активности холинэстеразы сыворотки крови (табл. 3). Использование гептрала и мексидола в дозе 25 мг/кг в сутки практически не препятствовало развивающимся патологическим изменениям, хотя они и не были существенными в группе контрольных животных. Использование мексидола в дозе 50 мг/кг позволило предотвратить метаболические сдвиги, тем самым, препятствуя появлению гепатопривного синдрома. Тяжесть гепатодепрессивного синдрома в клинике определяет вероятность возникновения печеночной энцефалопатии. Поэтому отсутствие снижения альбумина сыворотки крови при применении мексидола в дозе 50 мг/кг является положительным предиктором, свидетельствующим о малой вероятности развития печеночной энцефалопатии при сохранности антитоксической функции печени. Это положение подтверждается вторым положительным предиктором - отсутствием падения кальция при применении той же дозы мексидола (табл. 5).

Длительная противотуберкулезная химиотерапия приводит в ряде случаев к повреждению функций почек и поджелудочной железы [15]. Применение гептрала и мексидола в дозе 25 мг/кг выявило уменьшение активности амилазы и содержания креатинина в сыворотке крови по сравнению с контрольными животными. Однако только применение мексидола способно было предотвратить значительный рост содержания мочевины в сыворотке крови (табл. 4). Курсовое введение мексидола в дозе 50 мг/кг в сутки препятствовало появлению патологических изменений функциональных проб почек и поджелудочной железы.

В механизме токсического действия туберкулостатиков на организм человека и животных имеет значение активация перекисного окисления липидов при истощении ресурсов антиоксидантной защиты. Снижение активности ГР и рост МДА сыворотки крови является подтверждением этому положению (табл. 6). Вероятно, рост активности ГР на фоне применения мексидола, сопряженный с отсутствием значительного роста уровня сывороточного железа (табл. 5), коррелирующие с антицитолитическим действием препарата (табл. 1), определяют его гепатопротекторные свойства.

В эксперименте с введением кроликам четыреххлористого углерода мексидол в дозе 50 мг/кг обеспечил гепатопротекторную активность, сопоставимую с активностью эссенциале, а по ряду показателей превосходящую таковую (табл. 7). Так, применение мексидола в большей степени, чем применение эссенциале, сдерживало рост активности в сыворотке крови АЛТ и препятствовало росту активностей ЛДГ и ЩФ. Использование мексидола предупредило повышение уровня билирубина общего и препятствовало падению уровня калия в сыворотке крови. Мексидол по сравнению с эссенциале в наибольшей степени предупредил диспротеинемию, следовательно, мезенхимальное воспаление и коллоидную нестойкость белков плазмы. Об этом свидетельствуют отсутствие увеличения содержания α₁ и α₂-глобилинов и незначительное, по сравнению с контролем и группой сравнения, увеличение содержания γ-глобулинов сыворотки крови (табл. 8).

Таким образом, мексидол оказывает мембранопротекторное действие в эксперименте с гепатотоксичностью, индуцированной введением туберкулостатиков и четыреххлористого углерода. Гепатопротекторный эффект носит дозозависимый характер и в большей степени выражен в суточной дозе 50 мг/кг. Способность мексидола препятствовать прогрессированию синдромов цитолиза и холестаза коррелирует с антиоксидантной активностью препарата.

Список литературы
1. Голиков С.Н., Саноцкий И.В., Тиунов Л.А. Общие механизмы токсического действия. - Л., 1986. - С.157-168.

2. Сорокина И.В., Крысин А.П., Хлебникова Т.Б. и др. Роль фенольных антиоксидантов в повышении устойчивости органических систем к свободно-радикальному окислению. - Новосибирск, РАН, Сибирское отделение, 1997.

3. Пасиешвили Л. М. , Сокруто О.В., Косенко Н.П. и др. Антиоксидантная недостаточность как один из патогенетических механизмов формирования хронического токсического гепатита// Гастробюллетень 1-2, 2000, Приложение 1, Материалы 2-й Объединенной Всероссийской и Всеармейской научной конференции "Санкт-Петербург-Гастро-2000", 20-22 сентября 2000. - 269. - С.70.

4. Зборовская И.А., Банникова М.В. Антиоксидантная система организма, ее значение в метаболизме. Клинические аспекты// Вестник РАМН. - 1995. - 6. - С.53-60.

5. Лукьянчук В. Д. , Савченкова Л.В. Антигипоксанты: состояние и перспективы// Эксперим. и клин. фармакол. - 1998. - 4. С.72-79.

6. Губский Ю.И., Задорина О.В., Парамонова Г.И. и др. Оксигеназные реакции в микросомах печени крыс в условиях антиоксидантной недостаточности// Вопр. мед. хим. - 1988. - 4. - С.81-85.

7. Саприн А. Н. Детоксикация ксенобиотиков в организме// Итоги науки и техники. Общие проблемы физико-химической биологии. - М., 1990. - Т. 22. -С. 31-115.

8. Гриневич В. Б. , Ратников В.А., Смирнов А.Д. и др. "Цитрат Бетаина Упса" в практической гастроэнтерологии// Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии и колопроктологии. - 1999. - Т. IX. - 1, Приложение 6. - Материалы Четвертой Российской конференции "Гепатология сегодня", 29-30 марта 1999, Москва. - С.120.

9. Катикова О.Ю., Тишкин B.C. Сравнительная оценка эффективности и безопасности гепатопротекторов растительного происхождения в лечении хронических гепатитов// "Медицина 2000". - Материалы конкурсных работ фармацевтической компании "Рихард Биттнер ГМбХ". - Москва. - 2000. - С.23-26.

10. Минушкин О.Н., Масловский Л.В. Оценка эффективности и безопасности препарата гептрал в дозе 3200 мг в сутки при хронических заболеваниях печени// Тез. Шестой Российской гастроэнтерологической недели, Москва, 23-27 октября 2000. - 314. - С.84.

11. Полунина Т.Е. Лекарственные гепатиты и их коррекция// Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии и колопроктологии. - 2000. - Т. Х. - 1, Приложение 9. - Материалы Пятой Российской конференции "Гепатология сегодня", 6-7 марта 2000, Москва. - С. 99.

12. Тельных Ю.В. Медикаментозные поражения печени туберкулостатическими препаратами// Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии и колопроктологии. - 1999. - Т. IX. - 1, Приложение 6. - Материалы Четвертой Российской конференции "Гепатология сегодня", 29-30 марта 1999, Москва. - С.131.

13. Барановский А. Ю. , Щукина О. Б., Зарицкий А.Ю. и др. Применение гептрала при проведении химиотерапии онкогематологическим больным// Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии и колопроктологии. - 1999. - Т. IX. - 1, Приложение 6. - Материалы Четвертой Российской конференции "Гепатология сегодня", 29-30 марта 1999, Москва. - С.116.

14. Горбаков В.В., Галик В.П., Кириллов С.М. Опыт применения гептрала в лечении диффузных заболеваний печени// Тер. архив. - 1998. - 10. - С.82-86.

15. Мухтаров Д.З. Гепаторенальные корреляции у больных туберкулезом легких с наличием маркеров вирусного гепатита В и хлорорганических пестицидов по данным радионуклидных исследований// Проблемы туберкулеза. - 2000. - 6. - С.47-48.

Изобретение относится к медицине, в частности к гепатопротекторному средству для профилактики и коррекции токсических поражений печени, и может быть использовано в гепатологии, токсикологии и фтизиатрии. В качестве гепатопротектора используют сукцинат 2-этил-6- метил-3-гидроксипиридина, называемый мексидол. Курсовое применение мексидола оказывает мембранопротекторное действие на клетки печени, токсически пораженной длительным применением туберкулостатиков. Кроме того, введение мексидола препятствует появлению патологических изменений функциональных проб почек и поджелудочной железы. Способность мексидола препятствовать прогрессированию синдромов цитолиза и холестаза коррелирует с антиоксидантной активностью препарата. 8 табл.

Применение сункцината 2-этил-6-метил-3-оксипиридина в качестве гепатопротекторного средства для профилактики и коррекции токсических поражений печени.