СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ГНОЙНО-НЕКРОТИЧЕСКИХ ОСЛОЖНЕНИЙ ПРИ ПАНКРЕОНЕКРОЗЕ Российский патент 2003 года по МПК G01N33/50 G01N33/92 

Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии, к разделу оценки тяжести деструктивного процесса при панкреонекрозе, и может быть использовано для диагностики гнойно-некротических осложнений при данном заболевании.

Известно, что острый деструктивный панкреатит (ОДП) является одной из актуальных проблем ургентной хирургии. Несмотря на большое количество исследований, посвященных диагностике, прогнозированию и лечению ОДП летальность при данной патологии остается очень высокой.

Прогноз при ОДП всегда серьезен и во многом обусловлен распространенностью гнойно-некротического процесса в ткани поджелудочной железы (ПЖ), парапанкреатическом пространстве, что говорит о необходимости ранней диагностики гнойных осложнений и, соответственно, интенсификации лечебных мероприятий при панкреонекрозе.

В изученной литературе работы по диагностике гнойных осложнений базируются на применении ультразвуковых исследований, компьютерной томографии (В. С.Савельев, В.А.Кубышкин, Г.Б.Казанцев, Хирургия, 1988, 9, с. 72-79; В.С.Савельев, В. А. Кубышкин, Хирургия, 1993, 6, с. 22-28, С.А.Шуляк, дисс. канд. мед. наук, Челябинск, 1997), прогностического индекса тяжести (Ш.Н. Каримов, Вестник хирургии, 1993 г., 3-4, с. 46-47), определении уровня лейкоцитарного индекса интоксикации, парамецийного времени, концентрации среднемолекулярных токсинов (Б.К.Шуркалин, В.А.Горский, Хирургия, 1988, 9, с. 83-87).

В качестве прототипа нами взят способ диагностики гнойно-некротических осложнений, описанный Б. К. Шуркалиным, В.А.Горским (Хирургия, 1988, 9, с. 83-87). Сущность способа заключается в определении уровня молекул средней массы (МСМ) в сыворотке крови (Н.И.Габриэлян, 1981) у больных на стадиях панкреонекроза. Возникновение гнойных осложнений приводит к увеличению эндогенной интоксикации, что сопровождается достоверным увеличением уровня МСМ (до 0,72±0,04 усл. ед. ) по сравнению с первым и вторым периодами (0,46±0,01 и 0,48±0,02 усл. ед. соответственно).

Вышеописанный метод базируется на анализе маркера синдрома эндогенной интоксикации, который косвенно отражает развитие гнойных осложнений, и его величина зависит еще от других причин (нарушения микроциркуляции, недостаточность паренхиматозных органов и т.д.).

Новизной предложения является определение концентрации одного из конечных продуктов ПОЛ - малонового диальдегида (МДА) в сыворотке крови больного панкреонекрозом на 10 сутки послеоперационного периода.

Существенным отличием является то, что на 10 сутки послеоперационного периода у больного определяется уровень малонового диальдегида в сыворотке крови, и при показателях его выше 4,64±0,21 нмоль/мл диагностируют развитие гнойного процесса в зоне поджелудочной железы.

Нарушение механизмов регуляции свободно-радикального окисления является основной причиной повреждения биологических мембран при экстремальных воздействиях (гипоксия, стресс), приводящих к развитию цепной реакции, способной вызвать окисление различных субстратов и тем самым повреждать белки и липиды биомембран, инактивировать ферменты, изменять структуру макромолекул, целостность клетки и внутриклеточных органелл, приводя к развитию деструкции ткани в очаге воспаления. Известна важная роль процессов липопероксидации в патогенезе панкреонекроза. Кроме этого, доказано, что активация нейтрофильного пула лейкоцитов при гнойном процессе сопровождается прогрессированием свободно-радикального окисления. (Ю. А.Владимиров, А.И.Арчаков. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. М.: Наука, - 1972. - 525 с., Ю. А.Владимиров//Вестн. Рос. АМН. - 1998. - 7. - с. 43-51).

Методика предлагаемого способа заключается в том, что на 10 сутки послеоперационного периода проводился забор у больного 10,0 мл периферической венозной крови, которая центрифугировалась для получения сыворотки. Концентрацию МДА определяли по реакции с тиобарбитуровой кислотой (ТБК) по методике R. Mc. Knight, F.E. Hunter (1966). Для этого к 0,5 мл исследуемой сыворотки крови добавляли 1,0 мл 10% раствора трихлоруксусной кислоты, 1,0 мл 0,5% раствора ТБК, 0,5 мл 0,1 Н раствора НСl. Смесь перемешивали и помещали в водяную баню при 60^oС на 30 минут. Белки осаждали центрифугированием в течение 15 минут при 3000 оборотов в минуту. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры и определяли оптическую плотность супернатанта при длине волны 532 нм на спектрофотометре СФ-46. Контрольная проба вместо сыворотки содержала 0,5 мл дистиллированной воды.

Расчет содержания МДА в сыворотке крови проводили по формуле:

где С - концентрация МДА;
Е - разность оптической плотности контрольной и опытной пробы;
Р - разведение сыворотки крови;
- молярная экстинция МДА, которая при длине волны 532 нм равна 1,56•10⁵ м^-1 см (R. Sinnhuber, 1958), 1 см³ - емкость кюветы в спектрофотометре СФ-46. Результаты выражали в нмоль/мл сыворотки крови.

Проведено исследование уровня МДА до операции и в динамике послеоперационного периода (1, 3, 5, 7, 10, 14 сутки) у 92 больных панкреонекрозом, которые были ретроспективно разделены на две группы: I - больные без гнойных осложнений (36 человек); II - больные, у которых развились гнойные осложнения в зоне поджелудочной железы (56 человек, из них 22 умерли в сроки свыше 14 суток после операции). Все больные были подвергнуты стандартному оперативному вмешательству (лапаротомия, абдоминизация ПЖ, марсупиализация и дренирование сальниковой сумки, дренирование внепеченочных желчных путей). В послеоперационном периоде все больные получали одинаковую многокомпонентную интенсивную терапию, включающую активную инфузионно-трансфузионную терапию, применение ингибиторов протеаз, цитостатиков, антибиотиков, экстракорпоральных методов детоксикации.

Полученные данные представлены в таблице и на чертеже.

Анализ результатов свидетельствует о достоверном повышении уровня МДА выше нормы во всех случаях, причем до 7 суток концентрация данного показателя практически одинакова в обеих группах. Однако на 10 сутки после операции содержание МДА во II группе достоверно более высокое, чем в I группе, с еще более выраженной тенденцией на 14 сутки.

В послеоперационном периоде в комплексный лабораторный мониторинг, помимо общепринятых методик обследования больных ОДП, входило определение лейкоцитарного индекса интоксикации (ЛИИ) (Я.Я.Кальф-Калиф, 1941), (МСМ). Выявлена сильная прямая корреляционная связь между уровнем МДА и данными маркерами эндотоксикоза.

Клинический пример 1.

Больная О., 39 лет. Диагноз: острый тотальный геморрагический панкреонекроз, разлитой серозно-геморрагический перитонит. Оперирована в экстренном порядке при поступлении после предоперационной подготовки. Выполнена операция - лапаротомия, холецистостомия, абдоминизация поджелудочной железы, марсупиализация, дренирование сальниковой сумки, санация, дренирование брюшной полости. Уровень МДА в сыворотке крови на 10 сутки 7,33 нмоль/мл. Релапаротомия на 13 сутки - абсцедирование сальниковой сумки, парапанкреатическая флегмона.

Клинический пример 2.

Больной С. , 46 года. Диагноз: острый тотальный геморрагический панкреонекроз, разлитой серозно-геморрагический перитонит. Оперирован в экстренном порядке при поступлении после предоперационной подготовки. Выполнена операция - лапаротомия, холецистостомия, абдоминизация поджелудочной железы, марсупиализация, дренирование сальниковой сумки, санация, дренирование брюшной полости. Уровень МДА в сыворотке крови на 10 сутки 4,23 нмоль/мл. В послеоперационном периоде гнойных осложнений не было.

Таким образом, предлагаемый способ эффективен, прост, доступен, позволяет достаточно точно диагностировать присоединение гнойных осложнений при панкреонекрозе, что ускоряет повторное хирургическое вмешательство у данной группы больных.

Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии, к разделу оценки тяжести деструктивного процесса при панкреонекрозе, и может быть использовано для диагностики гнойно-некротических осложнений при данном заболевании. При этом определяют концентрацию одного из конечных продуктов ПОЛ-малонового диальдегида (МДА) в сыворотке крови больного панкреонекрозом на 10 сутки послеоперационного периода и при показателях его выше 4,64±0,21 нмоль/мл диагностируют развитие гнойного процесса в зоне поджелудочной железы. Изобретение позволяет эффективно и просто осуществлять диагностику. 1 табл., 1 ил.

Способ диагностики гнойно-некротических осложнений при панкреонекрозе путем биохимических исследований, отличающийся тем, что на 10 сутки после операции определяют концентрацию малонового диальдегида в сыворотке крови больного и при содержании его выше 4,64±0,21 нмоль/мл диагностируют развитие гнойного осложнения.