ПРОИЗВОДНОЕ БЕНЗОКСАЗОЛА, ЛЕКАРСТВЕННОЕ СРЕДСТВО НА ЕГО ОСНОВЕ И СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ СОСТОЯНИЯ СИНДРОМА РАЗДРАЖЕННОГО КИШЕЧНИКА ИЛИ ФУНКЦИОНАЛЬНОГО РАССТРОЙСТВА ПИЩЕВАРИТЕЛЬНОГО ТРАКТА Российский патент 2003 года по МПК C07D413/04 A61K31/5513 A61P1/00 A61P1/08 A61P1/12 C07D413/04 C07D263/00 C07D243/00 

Область техники
Настоящее изобретение относится к производным бензоксазола и их солям, которые обладают антагонистической активностью в отношении серотонинового рецептора 5-НТ₃ и частичным активирующим действием в отношении серотонинового рецептора 5-НТ₃. Изобретение также относится к лекарственным препаратам, которые включают вышеуказанные производные бензоксазола или их фармацевтически приемлемые соли и являются полезными для предотвращения и/или терапевтического лечения состояний синдрома раздраженного кишечника, функционального расстройства пищеварительного тракта или диареи и в качестве противорвотных средств.

Предшествующий уровень техники
Серотонин [5-гидрокситриптамин (далее называемый иногда сокращенно "5-НТ"] является нейротрансмиттером в живом организме, и до настоящего времени было известно, что существует семь видов его подтипов (5-HT₁ до 5-НТ₇). Сообщалось, что из них рецептор 5-НТ₃ вовлечен в побочные эффекты, такие как тошнота и рвота, канцеростатических средств, таких как цисплатин и радиотерапия, и антагонисты рецептора 5-НТ₃ использовались клинически как противорвотные средства. Конкретно, примеры включают Гранисетрон [Sanger, G.J. et al. , Eur. J. Pharmacol. , 159, 113-124 (1989)], Ондансетрон (GR 38032F) [Butler, A. et al. , Br. J. Pharmacol., 94, 387-412 (1988)] и Трописетрон [Richardson, В.Р. et al., Nature, 316, 136-131 (1985)]. Недавно сообщалось, что соединения, обладающие антагонистической активностью в отношении рецептора 5-НТ₃, являются эффективными для профилактического и/или терапевтического лечения синдрома раздраженного кишечника и т.п. [Greenshaw, A.J. et al. Drugs, 53, 20-39 (1997), and Greenshaw, A.J. et al. Trends Pharmacol. Sci. , 14, 265-270 (1993)] , в настоящее время делают попытку разработать Алостерон (Japanese Patent Publication (KOKAI) No. 1-151578/1989).

Однако, когда соединение, обладающее только антагонистической активностью в отношении 5-НТ₃ рецептора, вводят в пищеварительный тракт в качестве профилактического и/или терапевтического средства от синдрома раздраженного кишечника или функционального расстройства пищеварительного тракта, такое введение весьма вероятно может вызвать в качестве побочного эффекта проблему запора, хотя диарея при этом ингибируется. Как одно из средств решения данной проблемы авторы настоящего изобретения предоставили производные бензоксазола, которые обладают действием активирования рецептора 5-НТ₃ в дополнение к антагонистической активности в отношении 5-НТ₃ рецептора (Японская патентная публикация (KOKAI) 10-29987/1998). В качестве соединений, которые сходным образом обладают и антагонистической активностью в отношении 5-НТ₃ рецептора, и активирующим 5-НТ₃ рецептор действием, также раскрываются соединения МКС-733 (Японская патентная публикация (KOKAI) 5-310747/1993) и RS-056812-198 [J.A. VanHooft et al., Eur. J. Pharmacol., 322, 229-233 (1997)].

Нет сообщений ни об одном соединении, которое проявляет сильное ингибирующее действие против диареи, не вызывая таких побочных действий, как запор, и которое не является легко метаболизируемым в живом организме при его использовании в качестве средства для профилактики и/или лечения синдрома раздраженного кишечника или функционального расстройства пищеварительного тракта. Поэтому было желательно разработать соединения, обладающие такими отличительными особенностями.

Описание изобретения
Целью настоящего изобретения является предоставление соединения, полезного в качестве активного ингредиента лекарственных средств, таких как средства для профилактики и/или лечения состояний, являющихся результатом синдрома раздраженного кишечника и функционального расстройства пищеварительного тракта (в частности, нарушений опорожнения кишечника, болей в животе, ощущения дискомфорта в области живота, урчания в животе, отрыжки, изжоги и т.д.), и состояний диареи, а также противорвотные средства. Более конкретно, целью настоящего изобретения является предоставление соединения, полезного в качестве активного ингредиента лекарственных средств, которое обладает действием по активированию рецептора 5-НТ₃ в дополнение к антагонистическому действию в отношении 5-НТ₃ рецептора, и едва ли метаболизируется в живом организме, в целях избежания запора, вызываемого в качестве побочного эффекта введением соединения, которое обладает только антагонистической активностью в отношении 5-НТ₃ рецептора, в качестве агента регулирования функции пищеварительного органа.

Авторы настоящего изобретения уже обнаружили производные бензоксазола, обладающие действием активирования рецептора 5-НТ₃ в дополнение к антагонистической активности в отношении 5-НТ₃ рецептора (Японская патентная публикация (KOKAI) 10-29987/1998). Они продолжили тщательные исследования и обнаружили, что соединения указанной ниже формулы (1) обладают вышеуказанными характеристиками. Таким образом, было достигнуто настоящее изобретение.

Авторы настоящего изобретения провели различные испытания бензоксазолов, представленных указанной ниже формулой (1), включая метаболическое испытание in vitro на печени человека и испытание на безопасность (тест обратной мутации), а также эксперименты по оценке действия по сжатию экстрагированной подвздошной кишки морских свинок, которое служит в качестве показателя действия по активированию 5-НТ₃ рецептора, ингибиторного действия в отношении диареи у крыс, вызванной стрессовой нагрузкой, которое служит показателем терапевтического лечения диареи, и определению действия на дефекацию у нормальных мышей (способность толстой кишки транспортировать), которое служит показателем избавления от запора как побочного эффекта. В результате было обнаружено, что эти соединения обладают значительно более высокой антагонистической активностью в отношении 5-НТ₃ рецептора и активирующим 5-НТ₃ рецептор действием в сравнении с соединениями, уже раскрытыми в Японской патентной публикации (KOKAI) 6-345744/1994, и показывают еще более лучшие результаты в испытаниях in vitro, а именно ингибиторное действие против диареи и действие на дефекацию у нормальных мышей (способность толстой кишки к транспортированию) в сравнении с соединениями, уже раскрытыми в Японской патентной публикации (KOKAI) 10-29987/1998, а также гораздо более превосходную метаболическую стабильность.

Таким образом, настоящее изобретение предоставляет соединения, представленные общей формулой (1), или их соли

в которых R¹ представляет атом галогена, R² представляет атом водорода или низшую алкильную группу и R³ представляет атом водорода, низшую алкильную группу, низшую алкоксильную группу, гидрокси (низшую алкильную) группу, атом галогена или замещенную или незамещенную аминогруппу, в которой указанный(е) заместитель(и) на аминогруппе выбран (выбраны) из группы, состоящей из низшей алкильной группы, низшей алкенильной группы, низшей алкилкарбонильной группы и аминозащитной группы.

В соответствии с предпочтительными вариантами воплощения настоящего изобретения предоставляются соединения, представленные общей формулой (1), или их соли, в которых R¹ является атомом хлора; соединения, представленные общей формулой (1), или их соли, в которых R² является атомом водорода или метильной группой, предпочтительно атомом водорода; и соединения, представленные общей формулой (1), или их соли, в которых R³ является атомом водорода, низшей алкильной группой, низшей акоксильной группой, атомом галогена или замещенной аминогруппой, более предпочтительно атомом водорода, метильной группой, этильной группой, метоксигруппой, атомом хлора или ацетаминогруппой, еще более предпочтительно низшей алкильной группой и наиболее предпочтительно метильной группой.

В соответствии с другим предпочтительным вариантом воплощения настоящего изобретения предоставляются соединения, представленные общей формулой (1), или их соли, в которых R¹ представляет атом галогена, R² представляет атом водорода или низшую алкильную группу и R³ представляет атом водорода, низшую алкильную группу, низшую алкоксильную группу, атом галогена или замещенную аминогруппу. В качестве более предпочтительного варианта настоящим изобретением предоставляются соединения, представленные общей формулой (1), или их соли, в которых R¹ представляет атом хлора, R² представляет атом водорода или метильную группу, и R³ представляет атом водорода, метильную группу, этильную группу, метоксигруппу, атом хлора или ацетаминогруппу.

В качестве еще более предпочтительных вариантов воплощения настоящего изобретения предоставляются следующие соединения и их соли:
5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)-7-метилбензоксазол;
5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)-7-метоксибензоксазол;
5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)-6-метилбензоксазол;
5-хлор-7-этил-2-(1-гомопиперазинил)бензоксазол;
5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)-7-гидроксиметилбензоксазол;
7-ацетамидо-5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)-7-бензоксазол;
7-(трет-бутилоксикарбониламино)-5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)-бензоксазол;
7-амино-5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)бензоксазол;
5,7-дихлор-2-(1-гомопиперазинил)бензоксазол;
5,7-дихлор-2-(1-гомопиперазинил)-6-метилбензоксазол;
5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)-6,7-диметилбензоксазол;
7-(бензиламино)-5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)бензоксазол;
5-хлор-7-этиламино-2-(1-гомопиперазинил)бензоксазол;
5-хлор-7-метансульфониламино-2-(1-гомопиперазинил)-бензоксазол;
7-бензоиламино-5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)бензоксазол; и
5-хлор-7-изобутириламино-2-(1-гомопиперазинил)бензоксазол.

В качестве особенно предпочтительного варианта воплощения изобретения предоставляется 5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)-7-метилбензоксазол или его соль.

В качестве еще одного аспекта настоящего изобретения предоставляются лекарственные средства, которые включают в качестве активного ингредиента вещество, выбранное из группы, состоящей из указанных выше соединений общей формулы (1), их фармацевтически приемлемых солей и их гидратов и сольватов. Эти лекарственные средства являются полезными для профилактики и/или лечения состояний, являющихся результатом синдрома раздраженного кишечника и функционального расстройства пищеварительного тракта (в частности, нарушения опорожнения кишечника, болей в животе, ощущения дискомфорта в области живота, урчания в животе, отрыжки, изжоги и т.д.) и состояния диареи, а также как противорвотные средства и т.п. В соответствии с предпочтительными воплощениями этих лекарственных средств указанные выше лекарственные средства предоставляются в форме фармацевтических композиций, включающих указанное выше соединение в качестве активного ингредиента вместе с одной или более фармацевтическими добавками.

В качестве следующего аспекта настоящего изобретения предоставляется применение вещества, выбранного из группы, состоящей из соединений, представленных вышеуказанной формулой (1), и их фармацевтически приемлемых солей и их гидратов и сольватов для производства вышеуказанных лекарственных средств. В соответствии с изобретением предоставляются, кроме того, способы профилактического и/или терапевтического лечения состояний, являющихся результатом синдрома раздраженного кишечника и функционального расстройства пищеварительного тракта или состояний диареи, которые включают стадию введения профилактически и/или терапевтически эффективного количества вещества, выбранного из группы, состоящей из соединений, представленных указанной выше формулой (1), и их фармацевтически приемлемых солей и их гидратов и сольватов, млекопитающему, включая человека, предпочтительно человеку.

И в качестве еще одного аспекта настоящего изобретения предоставляются антагонистические средства серотонинового рецептора 5-НТ₃, которые включают вещество, выбранное из группы, состоящей из соединений, представленных указанной выше формулой (1), и их фармацевтически приемлемых солей и их гидратов и сольватов, и частичные активаторы серотонинового рецептора 5-НТ₃, которые включают вещество, выбранное из группы, состоящей из соединений, представленных указанной выше формулой (1), и их фармацевтически приемлемых солей и их гидратов и сольватов.

Лучший способ осуществления изобретения
В настоящем описании алкильная группа или алкильный фрагмент заместителя, содержащего алкильный фрагмент, может быть линейной, разветвленной, циклической или комбинацией указанных групп и предпочтительно означает линейную или разветвленную алкильную группу. Термин "низший", как он использован в данном описании, означает, что заместитель имеет примерно от 1 до 4 атомов углерода (2-4 атома углерода для алкенильных групп и т.д.). Примеры низшей алкильной группы или алкильных фрагментов заместителей, содержащих их, включают метильную, этильную, н-пропильную, изопропильную, циклопропильную, н-бутильную, втор-бутильную, изобутильную, трет-бутильную, циклопропилметильную группы и т.д. Термин "атом галогена", как он использован в данном описании, означает атом фтора, хлора, брома и йода.

В качестве заместителя(ей) аминогруппы, представленной символом R³, можно предпочтительно использовать группу, выбранную из групп, состоящих из линейной или разветвленной C₁-C₄ алкильной группы, линейной или разветвленной C₂-C₄ алкенильной группы, линейной или разветвленной C₂-C₄ алкинильной группы, линейной или разветвленной C₁-C₄ карбонильной группы, и групп, описанных в T.W. Green, "Protective Group in Organic Synthesis", John Wiley and Sons, 1991, в качестве защитных групп для аминогруппы.

R¹ предпочтительно является атомом хлора. R² предпочтительно является атомом водорода или метильной группой и более предпочтительно атомом водорода. R³ предпочтительно является низшей алкильной группой и более предпочтительно метильной группой.

Примеры соединений настоящего изобретения включают следующие соединения:
5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)-7-метилбензоксазол;
5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)-7-метоксибензоксазол;
5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)-6-метилбензоксазол;
5-хлор-7-этил-2-(1-гомопиперазинил)бензоксазол;
5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)-7-гидроксиметилбензоксазол;
7-ацетамидо-5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)-7-бензоксазол;
7-(трет-бутилкарбониламино)-5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)-бензоксазол;
7-амино-5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)бензоксазол;
5,7-дихлор-2-(1-гомопиперазинил)бензоксазол;
5,7-дихлор-2-(1-гомопиперазинил)-6-метилбензоксазол;
5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)-6,7-диметилбензоксазол;
7-(бензиламино)-5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)бензоксазол;
5-хлор-7-этиламино-2-(1-гомопиперазинил)бензоксазол;
5-хлор-7-метансульфониламино-2-(1-гомопиперазинил)-бензоксазол;
7-бензоиламино-5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)бензоксазол и
5-хлор-7-изобутириламино-2-(1-гомопиперазинил)бензоксазол.

Однако соединения настоящего изобретения не ограничены этими примерами.

Предпочтительные соединения включают
5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)-7-метилбензоксазол;
5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)-7-метоксибензоксазол;
5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)-6-метилбензоксазол;
5-хлор-7-этил-2-(1-гомопиперазинил)бензоксазол;
5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)-7-гидроксиметилбензоксазол и
7-ацетамидо-5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)-7-бензоксазол и наиболее предпочтительным соединением является 5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)-7-метоксибензоксазол.

Соединения настоящего изобретения, представленные формулой (1), могут существовать в форме свободного основания или в форме кислотно-аддитивной соли. Примеры солей включают соли с галогенводородной кислотой, такой как фтористоводородная кислота, хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота и йодистоводородная кислота; неорганической кислотой, такой как серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота, перекисноводородная кислота, угольная кислота; органическими карбоновыми кислотами, такими как уксусная кислота, трихлоруксусная кислота, трифторуксусная кислота, гидроксиуксусная кислота, молочная кислота, лимонная кислота, винная кислота, щавелевая кислота, бензойная кислота, миндальная кислота, масляная кислота, малеиновая кислота, пропионовая кислота, муравьиная кислота и яблочная кислота; кислыми аминокислотами, такими как аспарагиновая кислота и глутаминовая кислота; алкил-сульфокислотами или арилсульфокислотами, такими как метансульфокислота и п-толуолсульфокислота и т.п.

Соединения настоящего изобретения могут иметь один или более асимметрических атомов углерода, в зависимости от типов заместителей. Оптически активные вещества и диастереоизомеры, основанные на присутствии одного или нескольких асимметрических атомов углерода, любые их смеси, их рацематы и т. п. охватываются объемом настоящего изобретения. Соединения настоящего изобретения или их соли также могут существовать в форме гидратов или сольватов. Кроме того, объем настоящего изобретения также охватывает любые вещества в любой кристаллической форме.

Соединения настоящего изобретения можно получать различными способами. Например, их получают указанными ниже двумя типичными способами (Способ А и Способ В).

На приведенной схеме R¹, R² и R³ имеют указанные выше значения, Y представляет удаляемую группу, такую как атом галогена, тиольная группа, п-толуолсульфонильная группа или трифторметансульфонильная группа, и R⁴ представляет защитную группу для аминогруппы.

Способ А
Соединение формулы (1) можно получить по реакции соединения формулы (2) с гомопиперазином формулы (3) в растворителе. Растворителем может быть дихлорметан, хлороформ, бензол, толуол, ксилол, тетрагидрофуран, диэтиловый эфир, диметоксиэтан, N, N-диметилформамид, диметилсульфоксид и т.д. Температуру реакции можно выбирать в диапазоне от -50 до 200^oС, предпочтительно от 0 до 150^oС, и реакцию осуществляют в течение времени от 5 минут до 48 часов, предпочтительно от 30 минут до 20 часов. Для ускорения реакции или для осуществления реакции в мягких условиях к реакционной системе могут быть добавлены вспомогательные добавки (например, триэтиламин).

Способ В
Соединение формулы (5) можно получить по реакции соединения формулы (2) в растворителе с гомопиперазином формулы (4), в которой одна из аминогрупп защищена. Защитную группу для аминогруппы можно выбрать, например, из групп, описанных в T.W. Green, "Protective Group in Organic Synthesis", John Wiley and Sons, 1991. Растворитель, температура реакции, время реакции и добавки могут быть такими, как указаны для Способа А. Затем получают соединение формулы (1) путем удаления R⁴ в качестве защитной группы подходящим способом.

Соединения формул (1)-(5), полученные Способом А или Способом В, могут быть подвергнуты преобразованию функциональной группы на заместителе R¹, R² или R³ для получения других соединений, охватываемых объемом настоящего изобретения.

Соединения, представленные указанной выше формулой (1), обладают преимуществами в том, что они демонстрируют антагонистическую активность в отношении 5-НТ₃ рецептора и активирующее действие по отношению к 5-НТз рецептору, и они трудно метаболизируются в печени человека. Поэтому соединения, представленные формулой (1), могут использоваться в качестве активного ингредиента лекарственных средств в качестве антагониста 5-НТ₃ рецептора и активатора 5-НТ₃ рецептора для профилактики и/или терапевтического лечения заболеваний, в которых участвует 5-НТ₃. Заболевания, в которых участвует 5-НТ₃, включают синдром раздраженного кишечника, функциональное расстройство пищеварительного тракта, головную боль, невралгию, беспокойство, депрессию, умственные расстройства или рвоту, вызванную канцеростатическими средствами, такими как цисплатин или радиотерапия. Поскольку соединения, представленные формулой (1), обладают частичным активирующим действием на 5-НТ₃ рецептор, проявляющимся ими как действие по активированию 5-НТ₃ рецептора в дополнение к антагонистическому действию в отношении 5-НТ₃ рецептора, они также полезны как профилактические лекарственные средства или терапевтические лекарственные средства, не вызывающие побочных эффектов, таких как запор, для улучшения состояний синдрома раздраженного кишечника, функционального расстройства пищеварительного тракта или диареи, или как противорвотные средства.

В качестве активного ингредиента лекарственных средств согласно настоящему изобретению можно использовать вещество, выбранное из группы, состоящей из указанных выше соединений в свободной форме, в форме их фармацевтически приемлемых нетоксичных солей и их гидратов и сольватов. Лекарственные средства согласно настоящему изобретению можно вводить человеку, а также млекопитающим, отличным от человека. Настоящее изобретение также предоставляет фармацевтические композиции, которые включают один или более видов веществ, выбранных из группы, состоящей из указанных выше соединений в свободной форме, их фармацевтически приемлемых нетоксичных солей и их гидратов и сольватов, вместе с одним или более видами фармацевтических добавок, и являются подходящими или для перорального, или для парентерального введения.

Более конкретно, примеры фармацевтических композиций, подходящих для перорального введения, включают, например, таблетки, капсулы, пилюли, порошки, гранулы, разжиженные гранулы, сиропы, эмульсии, суспензии, растворы, водные растворы и т.д. Примеры фармацевтических композиций, подходящих для парентерального введения, включают, например, инъекции, такие как внутривенная, внутримышечная или подкожная инъекции, имплантаты, суппозитории для ректального введения, мази, пластыри, лейкопластыри для трансдермальной абсорбции и т. д. К инъекциям можно добавлять буферные вещества (например, ацетат, цитрат, фосфат), модификаторы рН (например, гидрокарбонат натрия, гидроксид натрия, хлористоводородную кислоту), стабилизаторы, такие как антиоксиданты (например, аскорбиновая кислота, сульфит натрия, пиросульфит натрия), консерванты (например, бензиловый спирт, хлорбутанол, сложный метиловый эфир п-гидроксибензойной кислоты) и тому подобные, если это необходимо. Данные фармацевтические препараты можно получать традиционными способами с использованием обычно используемых фармацевтических добавок, таких как наполнители, разрыхлители, связующие вещества, смазывающие вещества, окрашивающие агенты и т.п.

Примеры подходящих нетоксичных эксципиентов или наполнителей включают, например, лактозу, глюкозу, кукурузный крахмал, сорбит, кристаллическую целлюлозу и т.п. Примеры разрыхлителей включают, например, крахмал, альгинат натрия, желатин, карбонат кальция, декстрин и т.п. Примеры связующих веществ включают, например, диметилцеллюлозу, поливиниловый спирт, поливиниловый эфир, метилцеллюлозу, этилцеллюлозу, аравийскую камедь, гидроксипропилцеллюлозу, поливинилпирролидон и т.п. Примеры смазывающих веществ включают, например, тальк, стеарат магния, полиэтиленгликоль, затвердевшее масло и т.п. Примеры подкрашивающих агентов включают, например, бриллиантовый голубой, эритросин, тартразин и т.п.

Соединения, представленные формулой (1) в соответствии с настоящим изобретением, можно также вводить в сочетании с другим терапевтическим средством. Например, при применении для лечения синдрома раздраженного кишечника соединения настоящего изобретения можно использовать в сочетании с опиоидными средствами (лоперамидом, тримебутином и т.п.), антихолиновыми средствами (прифинийбромидом, тиквизийбромидом и т.п.), допаминовыми антагонистами (домперидоном, сулпиридом и т. п. ), ветрогонными средствами, средствами против беспокойства (бензодиазепиновыми лекарственными средствами и т.п.), антидепрессантами (дезипрамином, амитриптилином, трипрамином и т.п.) и тому подобными. Для регулирования функций пищеварительных органов или лечения расстройств перистальтики желудочно-кишечного тракта, тошноты и рвоты соединения, представленные формулой (1) в соответствии с настоящим изобретением, можно подходящим образом применять в сочетании с антагонистами гистаминового рецептора H₂ (циметидином, ранитидином, фамотидином, сульфотидином, низатидином, роксатидином и т.п.), противосекреционными средствами (ингибиторами Н⁺K⁺ АТФазы, такими как омепразол) и т.п.

Содержание соединений настоящего изобретения в фармацевтических композициях может варьировать в зависимости от дозированной формы и обычно составляет от 0,05 до 50 маc.%, предпочтительно от 0,1 до 20 маc.% от массы композиции.

Дозу можно соответственно выбирать индивидуально с учетом возраста, веса тела, пола пациента, природы заболевания, тяжести состояния и т.д. Однако, когда соединения используют в качестве профилактических или терапевтических средств для лечения синдрома раздраженного кишечника или функционального расстройства пищеварительного тракта, их обычно вводят в количестве от 0,001 до 100 мг, предпочтительно от 0,01 до 50 мг/единичную дозу в качестве активного ингредиента в сутки для взрослого, один раз в сутки или раздельными дозами несколько раз в сутки.

Примеры
Настоящее изобретение далее будет пояснено подробно со ссылками на приведенные ниже примеры. Однако описания их приведены только как примеры и не предназначены для ограничения настоящего изобретения. Следует понимать, что возможны различные изменения и модификации без отклонения от объема настоящего изобретения.

Приводимые в примерах данные ЯМР получены с помощью ЯМР спектрометра 400 МГц, и данные представлены как d величины с использованием в качестве стандарта TMS. Способы получения исходных материалов, используемых в примерах, и контрольных соединений для оценки представлены в Ссылочных Примерах.

Ссылочный Пример
5-хлор-2-меркапто-7-метоксибензоксазол
(a) 4-хлор-2-метоксифенол
2-метоксифенол (5,0 г), 2-аминопиридин (0,3 г) и тионилхлорид (3,24 мл) перемешивают в толуоле (100 мл) при 70^oС в течение 19 часов. Реакционную смесь затем охлаждают до комнатной температуры и затем выпаривают растворитель при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения в виде масла (6,6 г).

¹H ЯМР (CDCl₃) δ: 3,86 (3Н, с), 5,20 (1Н, ушир.), 6,83 (3Н, м).

МС (EI): m/z 158 (М⁺).

(b) 4-хлор-2-нитро-6-метоксифенол
4-хлор-2-метоксифенол (1,77 г) растворяют в уксусной кислоте (18 мл). К этому раствору добавляют при перемешивании при охлаждении льдом отдельно приготовленный раствор азотной кислоты (смесь 70% азотной кислоты (1,88 мл) и уксусной кислоты (5 мл)). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа, разбавляют этилацетатом и промывают водой. Этилацетатный слой сушат над безводным сульфатом магния, и затем растворитель выпаривают при пониженном давлении с получением неочищенного продукта. Данный продукт очищают хроматографией с использованием силикагеля (этилацетат:н-гексан = 4: 1 об/об) с получением указанного в заголовке соединения (1,8 г).

¹H ЯМР (CDCl₃) δ: 3,95 (3Н, с), 7,10 (1Н, д, J = 3,0 Гц), 7,70 (1Н, д, J = 3,0 Гц).

МС (TPS): m/z 203 (М⁺).

(с) 5-хлор-2-меркапто-7-метоксибензоксазол
Под током аргона платину на сульфиде углерода (0,18 г) суспендируют в растворе 4-хлор-2-нитро-6-метоксифенола (1,77 г) в этилацетате (17 мл). Внутреннюю часть реакционной системы заменяют газообразным водородом и суспензию интенсивно перемешивают в течение 24 часов. Платину на сульфиде углерода удаляют фильтрованием с использованием целита, и затем растворитель выпаривают при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт растворяют в этаноле (30 мл) и в смесь добавляют дисульфид углерода (15 мл) и гидроксид калия (0,58 г), и смесь перемешивают при 60^oС в течение 3 часов. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, добавляют воду (30 мл) и доводят рН до 4 с помощью концентрированной хлористоводородной кислоты. Осажденное твердое вещество собирают фильтрованием и сушат при 40^oС при пониженном давлении в течение 5 часов с получением указанного в заголовке соединения (1,87 г).

¹H ЯМР (СD₃ОD) δ: 3,88 (3Н, с), 6,72 (1Н, д, J = 2,0 Гц), 6,82 (1Н, д, J = 2,0 Гц).

MC (TPS): m/z 216 (M⁺+l).

Ссылочный Пример 2
5-хлор-7-гидроксиметил-2-меркаптобензоксазол
(а) этиловый эфир 5-хлор-3-нитросалициловой кислоты
К раствору 5-хлорсалициловой кислоты (5,0 г) в этаноле (50 мл) добавляют концентрированную серную кислоту (2,0 мл) и кипятят с обратным холодильником в течение 24 часов. После выпаривания этанола при пониженном давлении полученное масло растворяют в этилацетате, и раствор промывают насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Этилацетатный слой последовательно промывают водой и насыщенным солевым раствором и сушат над безводным сульфатом магния. Затем растворитель выпаривают при пониженном давлении с получением грубо очищенного этилового эфира 5-хлорсалициловой кислоты (5,3 г). Данный продукт обрабатывают 70% азотной кислотой (7,2 мл, d = 1,42) в уксусном ангидриде (40 мл) при охлаждении льдом. Реакционную смесь перемешивают при той же температуре в течение 6 часов и выливают в ледяную воду, и осажденные кристаллы собирают фильтрованием. Кристаллы промывают водой и сушат при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (1,48 г).

¹H ЯМР (СDС1₃) δ: 1,39 (3Н, т, J = 7,1 Гц), 4,42 (2Н, кв, J = 7,1 Гц), 8,03 (1Н, д, J = 2,7 Гц), 8,07 (1Н, д, J = 2,7 Гц), 11,93 (1Н, с).

(b) 5-хлор-7-этоксикарбонил-2-меркаптобензоксазол
Этиловый эфир 5-хлор-3-нитросалициловой кислоты (1,0 г) растворяют в смеси этилацетата (10 мл) и этанола (10 мл), и в смесь добавляют платину на сульфиде углерода (100 мг). Смесь интенсивно перемешивают в атмосфере водорода в течение 20 часов. Платину на сульфиде углерода удаляют фильтрованием с использованием целита, и растворитель выпаривают при пониженном давлении. В раствор полученного продукта в дисульфиде углерода (30 мл) добавляют раствор гидроксида калия (338 мг) в этаноле (30 мл), и смесь нагревают при 70^oС в течение 5 часов. Растворитель выпаривают при пониженном давлении и к остатку добавляют диэтиловый эфир, рН доводят до 9,0 0,5 н. водным раствором гидроксида калия и затем экстрагируют. Отделенный водный слой снова промывают диэтиловым эфиром, доводят рН до 5,0 1,0 н. хлористоводородной кислотой и экстрагируют 3 раза этилацетатом. Этилацетатный слой сушат над безводным сульфатом магния, и растворитель выпаривают при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (982 мг).

¹H ЯМР (СDС1₃) δ: 1,41 (3Н, т, J = 7,0 Гц), 3,40 (1Н, ушир.), 4,45 (2Н, кв, J = 7,0 Гц), 7,60 (1Н, д, J = 2,2 Гц), 7,71 (1Н, д, J = 2,2 Гц).

MC (El): m/z 257 (М⁺).

(c) 5-хлор-7-этоксикарбонил-2-меркаптобензоксазол
5-хлор-7-этоксикарбонил-2-меркаптобензоксазол (280 мг) растворяют в диэтиловом эфире (20 мл), и к смеси добавляют литий тетрагидридборан (100 мг). Смесь перемешивают при 35^oС в течение 2 часов. К реакционной смеси добавляют метанол и 1 н. хлористоводородную кислоту и летучие компоненты выпаривают при пониженном давлении. Данную процедуру повторяют 3 раза. Полученный продукт очищают хроматографией на силикагеле (метанол:метиленхлорид = 1:20) с получением указанного в заголовке соединения (163 мг).

¹H ЯМР (ДМСО-d₆) δ: 4,64 (2Н, с), 5,53 (1Н, ушир.), 7,18 (1Н, с), 7,26 (1Н, с), 14,0 (1Н, ушир.).

МС (EI): m/z 215 (М⁺).

Ссылочный Пример 3
7-ацетамино-5-хлор-2-меркаптобензоксазол
(а) 2-ацетамино-4-хлорфенол
При охлаждении льдом к раствору 2-ацетамино-4-хлорфенола (2,0 г, 14 ммоль) в метиленхлориде (12 мл) добавляют при перемешивании триэтиламин (3,89 мл) и уксусный ангидрид (1,5 мл). После перемешивания смеси в течение 30 минут растворитель и триэтиламин выпаривают при пониженном давлении. Полученную реакционную смесь растворяют в диэтиловом эфире, и смесь последовательно промывают насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным солевым раствором. Органический слой сушат над безводным сульфатом магния, и растворитель выпаривают при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (2,6 г, 100%).

¹H ЯМР (СDС1₃) δ: 2,20 (3Н, с), 6,81 (1Н, д, J = 8,5 Гц), 6,95 (1Н, дд, J = 8,6, 2,6 Гц), 7,72 (1Н, д, J = 2,6 Гц).

(b) 2-ацетамино-4-хлор-6-нитрофенол
При охлаждении льдом к раствору 2-ацетамино-4-хлорфенола (1,0 г, 5,4 ммоль) в уксусном ангидриде (90 мл) добавляют при перемешивании 70% азотную кислоту (0,38 мл, d = 1,42). После перемешивания в течение 2 часов в смесь добавляют воду (100 мл) и смесь перемешивают еще в течение часа. Смесь экстрагируют добавлением диэтилового эфира и дважды промывают водой. Органический слой сушат над безводным сульфатом магния, и растворитель выпаривают при пониженном давлении. Полученную смесь очищают хроматографией на силикагеле (этилацетат: н-гексан = 5:1 об/об) с получением указанного в заголовке соединения (0,38 г, 31%).

¹H ЯМР (СDС1₃) δ: 2,28 (3Н, с), 7,80 (1Н, д, J = 2,5 Гц), 8,80 (1Н, д, J = 2,5 Гц), 10,98 (1Н, с).

МС (EI): m/z 230 (М⁺).

(c) 7-ацетамино-5-хлор-2-меркаптобензоксазол
Под током аргона платину на сульфиде углерода (0,1 г) суспендируют в растворе 2-ацетамино-4-хлор-6-нитрофенола (100 мг, 0,43 ммоль) в смеси этанола (5 мл) и этилацетата (5 мл). Внутреннюю часть реакционной системы заменяют газообразным водородом, и смесь интенсивно перемешивают в течение 24 часов. После удаления платины на сульфиде углерода фильтрованием с использованием целита растворитель выпаривают при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт растворяют в этаноле (5,4 мл), и к раствору добавляют дисульфид углерода (5,4 мл) и гидроксид калия (0,29 г), и затем смесь перемешивают при 60^oС в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, и летучие компоненты выпаривают при пониженном давлении. Полученную реакционную смесь растворяют в этилацетате (10 мл) и последовательно промывают насыщенным водным раствором хлорида аммония (10 мл) и насыщенным солевым раствором. Реакционную смесь сушат над безводным сульфатом магния, и растворитель выпаривают при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (104 мг, 99%).

¹H ЯМР (СD₃ОD) δ: 2,11 (3Н, с), 6,87 (1Н, д, J = 1,9 Гц), 7,77 (1Н, д, J = 1,9 Гц).

МС (EI): m/z 242 (М⁺).

Ссылочный Пример 4
5-хлор-7-метил-2-(1-пиперазинил)бензоксазол
К суспензии 5-хлор-2-меркапто-7-метилбензоксазола (5,0 г, 0,25 моль) в толуоле (100 мл) при перемешивании добавляют пиперазин (4,3 г, 0,05 моль). Реакционную смесь перемешивают при кипячении с обратным холодильником в течение 7 часов, затем охлаждают и к смеси добавляют этилацетат (45 мл) и воду (80 мл). Смесь доводят до рН 7,5 постепенным добавлением 5 н. хлористоводородной кислоты. Отделенный органический слой промывают водой (80 мл), снова добавляют воду (80 мл) и доводят рН до 1-1,5 1 н. хлористоводородной кислотой. Органический слой удаляют путем разделения фаз. К оставшемуся водному слою добавляют этилацетат, доводят рН до 8,0 5 н. водным раствором гидроксида натрия и затем экстрагируют. Органический слой промывают водой и насыщенным солевым раствором и сушат над безводным сульфатом магния, и растворитель выпаривают при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (4,3 г). Данное соединение можно превратить в гидрохлорид 5-хлор-7-метил-2-(1-пиперазинил)бензоксазола обработкой 4 н. хлористоводородной кислотой/этилацетатом в этилацетате.

¹Н ЯМР (СDС1₃) δ: 1,83 (1Н, ушир.), 2,37 (3Н, м), 2,99 (4Н, м), 3,68 (4Н, м), 3,00 (2Н, м), 6,81 (1Н, J = 1,2 Гц), 7,13 (1Н, д, J = 1,2 Гц).

МС (El): m/z 252 (M⁺+l).

Ссылочный Пример 5
7-(трет-бутилоксикарбониламино)-5-хлор-2-меркаптобензоксазол
(а) 4-хлор-2,6-динитрофенол
Раствор 4-хлор-2-нитрофенола (4 г, 23 ммоль) в ацетонитриле (100 мл) охлаждают до -25^oС и к нему постепенно добавляют порошок тетрафторбората нитрония (4,9 г). Реакционную смесь перемешивают в течение 2 часов, в течение которых температура поднимается до -10^oС, и реакцию останавливают добавлением 10 мл воды. Ацетонитрил выпаривают при пониженном давлении, и остаток разбавляют диэтиловым эфиром. Эфирный слой промывают водой, затем дважды промывают насыщенным солевым раствором и сушат над безводным сульфатом магния. Растворитель выпаривают концентрированием в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде пластинчатых кристаллов желтого цвета (5,1 г).

¹H ЯМР (CDCl₃) δ: 8,06 (2Н, ушир.с).

МС (EI): m/z 218 (М⁺).

(b) 2-амино-4-хлор-6-нитрофенол
Соединение Ссылочного Примера 5 (а) (4-хлор-2,6-динитрофенол, 5,1 г, 23,7 ммоль) растворяют в безводном этаноле (106 мл), и в раствор добавляют 5 н. хлористо-водородную кислоту (28,4 мл), и в смесь постепенно добавляют гидрат хлорида олова (16 г) при 25^oС. После перемешивания в течение 15 минут растворитель выпаривают при пониженном давлении и остаток разбавляют н-гексаном. Раствор дважды промывают водой и сушат над безводным сульфатом магния, и растворитель выпаривают при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения в виде красновато-коричневого порошка (2 г).

МС (EI): m/z 188 (М⁺).

(c) 2-(трет-бутилоксикарбониламино)-4-хлор-6-нитрофенол
Соединение Ссылочного примера 5 (b) (2-амино-4-хлор-6-нитрофенол, 0,376 г) растворяют в 1,2-дихлорэтане (12 мл), и затем к раствору добавляют триэтиламин (3 мл), ди-трет-бутилкарбонат (2 мл) и гидрохлорид гидроксиламина (0,07 г). После перемешивания в течение 3 часов при кипячении с обратным холодильником реакцию останавливают добавлением воды (10 мл). Реакционную смесь разбавляют н-гексаном (30 мл), и органический слой промывают 20 мл воды. Органический слой сушат над безводным сульфатом магния, и растворитель выпаривают при пониженном давлении с получением маслянистого неочищенного продукта (1/2 г). Продукт очищают колоночной хроматографией на силикагеле (этилацетат: н-гексан = 5:95) с получением указанного в заголовке соединения в виде желтых кристаллов (0,45 г).

¹H ЯМР (СD₃ОD) δ: 1,44 (9Н, с), 7,63 (1Н, м), 8,18 (1Н, ушир.).

МС (TPS): m/z 287 (M⁺-l).

(d) 7-(трет-бутилоксикарбониламино)-5-хлор-2-меркапто-бензоксазол
Соединение Ссылочного Примера 5 (с) (2-(трет-бутоксикарбониламино)-4-хлор-6-нитрофенол, 1,0 г) растворяют в безводном этаноле (20 мл), и платину на сульфиде углерода (0,1 г) суспендируют в данном растворе под током инертного газа. Атмосферу заменяют газообразным водородом при 20^oС, и смесь перемешивают примерно 2 часа. После завершения реакции катализатор быстро удаляют фильтрованием с использованием целита. К фильтрату добавляют дисульфид углерода (10 мл) и гидроксид калия (0,97 г) и перемешивают при 60^oС в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, и растворитель выпаривают при пониженном давлении. Остаток растворяют в воде (20 мл). К водному раствору порциями добавляют 1 н. хлористоводородную кислоту, и твердые вещества, осажденные при доведении рН до 7,0, собирают фильтрованием и сушат при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (1,5 г).

¹H ЯМР (CD₃OD) δ: 1,45 (9Н, с), 6,78 (1Н, д, J = 1,9 Гц), 7,03 (1Н, д, J = 1,9 Гц).

Ссылочный Пример 6
5,7-дихлор-2-меркапто-6-метилбензоксазол
(а) 2,4-дихлор-3-метил-6-нитрофенол
1,4-дихлор-3-метилфенол (5 г) растворяют в уксусной кислоте (12,5 мл), и к раствору добавляют концентрированную серную кислоту (d = 1,86, 50 мл). К смеси постепенно добавляют смешанную кислоту (2,5 мл 70% азотной кислоты + 10 мл концентрированной серной кислоты) в течение 30 минут или более при охлаждении льдом, затем нагревают до комнатной температуры и перемешивание продолжают в течение 2 часов. Реакционную смесь выливают в ледяную воду (50 мл), и осажденные твердые вещества собирают фильтрованием и сушат с получением указанного в заголовке соединения в виде красновато-желтого твердого вещества (5,22 г).

¹H ЯМР (CDCl₃) δ: 8,06 (2Н, ушир.с).

MC (El): m/z 218 (M⁺).

(b) 5,7-дихлор-2-меркапто-6-метилбензоксазол
Соединение Ссылочного Примера 6 (а) (2,4-дихлор-3-метил-6-нитрофенол, 2,1 г) растворяют в смеси этанола (40 мл) и этилацетата (40 мл), и платину на сульфиде углерода (0,2 г) суспендируют в растворе под током инертного газа. Атмосферу заменяют газообразным водородом при 25^oС, и реакционную систему поддерживают для протекания реакции в течение около 20 часов. Платиновый катализатор удаляют из реакционной смеси фильтрованием и к фильтрату добавляют безводный этанол (40 мл) и дисульфид углерода (20 мл). К смеси затем добавляют гидроксид калия (0,6 г), и смеси дают возможность реагировать при 60^oС в течение 8 часов. После охлаждения реакционной смеси до комнатной температуры растворитель выпаривают при пониженном давлении и остаток растворяют в воде (20 мл). Водный раствор подкисляют (рН 4) добавлением хлористо-водородной кислоты. Осажденные вещества собирают фильтрованием и сушат при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (0,73 г).

¹H ЯМР (CDCl₃) δ: 2,50 (3Н, с), 7,15 (1Н, с).

MC (El): m/z 233 (M⁺-l).

Ссылочный Пример 7
5-хлор-2-меркапто-6,7-диметилбензоксазол
(a) 4-хлор-2,3-диметил-6-нитрофенол
2,3-ксиленол (5 г, 40,9 ммоль) растворяют в толуоле (100 мл), и к раствору добавляют 2-аминопиридин (0,3 г, 3,2 ммоль). К смеси при комнатной температуре при перемешивании добавляют тионилхлорид (3,3 мл) и затем перемешивают при 70^oС в течение 15 часов. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и затем избыточные количества реагентов и растворителя выпаривают при пониженном давлении с получением маслянистого вещества. Вещество растворяют в уксусной кислоте (12,5 мл), и к полученному раствору добавляют концентрированную серную кислоту (50 мл), и затем по каплям добавляют смешанную кислоту (2,5 мл 70% азотной кислоты + 10 мл концентрированной серной кислоты) при комнатной температуре в течение 30 минут или более. Смесь дополнительно перемешивают в течение 2 часов и выливают в ледяную воду (500 мл). Остаток собирают фильтрованием и сушат с получением неочищенного продукта (3,8 г). Продукт очищают хроматографией на силикагеле (н-гексан: этилацетат = 2:1 об/об) с получением указанного в заголовке соединения (1,5 г).

¹H ЯМР (СDС1₃) δ: 2,18 (3Н, с), 2,24 (3Н, с), 6,72 (1Н, с).

МС (EI); m/z 201 (М⁺), 203 (M⁺+2).

(b) 5-хлор-2-меркапто-6,7-диметилбензоксазол
Соединение Ссылочного Примера 7 (а) (4-хлор-2,3-диметил-6-нитрофенол, 1,51 г, 7,51 ммоль) растворяют в смеси этанола (15 мл) и этилацетата (25 мл), и затем платину на сульфиде углерода (0,15 г) суспендируют в растворе под током инертного газа. Затем атмосферу заменяют газообразным водородом, и реакционную смесь перемешивают в течение 3 часов. Платиновый катализатор удаляют фильтрованием и к полученному раствору добавляют безводный этанол (40 мл) и дисульфид углерода (20 мл), затем добавляют гидроксид калия (1,24 г), и смесь перемешивают при 60^oС в течение 4 часов. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и затем выпаривают растворитель при пониженном давлении. Остаток разбавляют подходящим количеством этилацетата и 1 н. водным раствором гидроксида натрия. Водный слой раствора отделяют и слегка подкисляют (рН 4) концентрированной хлористоводородной кислотой. Осадок собирают фильтрованием и сушат при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (1,01 г).

¹H ЯМР (CD₃ОD) δ: 2,39 (3Н, с), 2,43 (3Н, с), 7,09 (1Н, с).

МС (EI): m/z 213 (М⁺), 215 (M⁺+2).

Ссылочный Пример 8
5,7-дихлор-2-меркаптобензоксазол
4,6-дихлор-2-нитрофенол (5 г) растворяют в смеси этанола (50 мл) и этилацетата (100 мл), и в растворе суспендируют платину на сульфиде углерода (0,5 г) под током инертного газа. Затем атмосферу заменяют газообразным водородом при 20^oС, и суспензию перемешивают еще 4 часа. Платиновый катализатор удаляют из реакционной смеси фильтрованием, и к полученному раствору последовательно добавляют безводный этанол (100 мл), дисульфид углерода (50 мл) и гидроксид калия (1,6 г) и затем смесь перемешивают примерно в течение 1 часа при 60^oС. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, и затем растворитель выпаривают при пониженном давлении. Полученный остаток разбавляют подходящими количествами этилацетата и воды. Водный слой раствора доводят до рН 5 концентрированной хлористоводородной кислотой. Осадок собирают фильтрованием и сушат при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (4,7 г).

¹H ЯМР (CDCl₃) δ: 7,09 (1H, м), 7,26 (1Н).

Пример 1
Получение 5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)-7-метилбензоксазола, его гидрохлорида, сульфата и метансульфоната
(а) 5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)-7-метилбезоксазол
В атмосфере азота к суспензии 5-хлор-2-меркапто-7-метилбензоксазола (70 г, 35 моль) в толуоле (1,4 л) при перемешивании добавляют гомопиперазин (70 г, 0,35 моль) и затем смесь нагревают при кипячении с обратным холодильником в течение 3 часов. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и выливают в смесь этилацетата (0,7 л) и воды (0,7 л). К смеси по каплям добавляют 6 н. хлористоводородную кислоту (55 мл) при перемешивании для доведения рН до 7,5. Отделенный органический слой промывают водой (1,2 л). К оставшемуся органическому слою добавляют воду (1,2 л) и затем при перемешивании по каплям добавляют 6 н. хлористоводородную кислоту для доведения рН до 1-1,5. К отделенному водному слою добавляют этилацетат (1,4 л) и затем при перемешивании добавляют 5 н. водный гидроксид натрия (180 мл) для доведения рН до 8,0. Отделенный органический слой промывают водой (1,4 л) и сушат над безводным сульфатом магния, и растворитель выпаривают при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения в виде неочищенного продукта (59 г). К раствору неочищенного продукта в этилацетате (1,2 л) добавляют активированный уголь (1,5 г), и смесь перемешивают в течение 30 минут при комнатной температуре. Затем активированный уголь удаляют фильтрованием, и растворитель выпаривают при пониженном давлении. К полученному твердому веществу добавляют ацетонитрил (177 мл) и растворяют путем нагревания смеси до 60^oС при перемешивании. Полученный однородный раствор оставляют для охлаждения до комнатной температуры в течение 1 часа и затем охлаждают далее до 5^oС. Осажденные кристаллы собирают фильтрованием и сушат при пониженном давлении при 40^oС в течение 4 часов с получением указанного в заголовке соединения (34 г).

Т.пл.: 93-94^oС
¹H ЯМР (CDCl₃) δ: 1,81 (1Н, с), 1,90 (2Н, м), 2,30 (3Н, с), 2,90 (2Н, т, J = 5,6 Гц), 3,00 (2Н, м), 3,71 (4Н, м), 6,70 (1H, д, J = 1,2 Гц), 7,00 (1H, д, J = 1,2 Гц).

Элементный анализ:
Найдено (%): С 58,5; Н 6,1; N 15,7.

Рассчитано для С₁₃Н₁₆NОСl (%): С 58,7; Н 6,1; N 15,8.

(b) 5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)-7-метилбензоксазол гидрохлорид
5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)-7-метилбензоксазол (12 г) растворяют в этилацетате (200 мл) и к раствору добавляют по каплям 4 н. хлористоводородную кислоту/этилацетат (16,9 мл, Kokusan Kagaku Co., Ltd.) при комнатной температуре при перемешивании. После добавления смесь перемешивают 30 минут при охлаждении льдом и полученный бесцветный осадок собирают фильтрованием. Осадок сушат при 35^oС при пониженном давлении в течение 4 часов с получением указанного в заголовке соединения (14,5 г).

¹H ЯМР (D₂O) δ: 2,11 (2Н, м), 2,16 (3Н, с), 3,27 (2Н, м), 3,35 (2Н, м), 3,68 (2Н, м), 3,88 (2Н, м), 6,78 (1H, с), 6,90 (1H, с).

(c) 5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)-7-метилбензоксазол сульфат
К раствору 5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)-7-метилбензоксазол (2,5 г) в этилацетате (75 мл) добавляют по каплям отдельно приготовленный раствор серной кислоты/метанола [приготовлен добавлением метанола к 95% серной кислоте (0,53 мл) до общего объема 12,5 мл] при комнатной температуре при перемешивании. Смесь перемешивают в течение 1 часа при охлаждении льдом, и полученный бесцветный осадок собирают фильтрованием. Осадок сушат при 35^oС при пониженном давлении в течение 5 часов с получением указанного в заголовке соединения (3,3 г).

[Пример 1 (с), Альтернативный способ 1]
Соединение Примера 1 (а) [5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)-7-метилбензоксазол, 2900 г] растворяют в 1 н. серной кислоте (5,8 л), и к водному раствору добавляют последовательно этанол (145 л) и этилацетат (99 л). Смесь перемешивают в течение ночи при 5^oС, и осажденный продукт собирают фильтрованием и сушат в вакууме при 40^oС в течение 6 часов с получением указанного в заголовке соединения в виде белых кристаллов (3200 г).

[Пример 1 (с). Альтернативный способ 2]
К раствору в этилацетате (13,4 л) неочищенного продукта, полученного способом Примера 1 (а), содержащего 5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)-7-метилбензоксазол (824 г), добавляют этанол (20 л), а затем добавляют 2 н. водный раствор серной кислоты (2,98 л). К полученному раствору добавляют этилацетат (6,6 л) и перемешивают при 5^oС в течение ночи. Осажденный осадок собирают фильтрованием и сушат в вакууме при 40^oС с получением указанного в заголовке соединения в виде белого порошка (1010 г).

¹H ЯМР (D₂O) δ: 2,19 (2Н, м), 2,19 (3Н, с), 3,30 (2Н, м), 3,41 (2Н, м), 3,76 (2Н, м), 3,98 (2Н, м), 6,89 (1Н, с), 6,99 (1Н, с).

Элементный анализ:
Найдено (%): С 40,5; Н 5,5; N 10,5.

Рассчитано для C₁₃H₁₈N₃O₅S₁Cl₁ (%): С 42,92; Н 4,99; N 11,55.

(d) 5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)-7-метилбензоксазол метансульфонат
К раствору 5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)-7-метилбензоксазол (2,5 г) в этилацетате (75 мл) добавляют по каплям отдельно приготовленный раствор метансульфокислоты/метанола [приготовлен добавлением метанола к метансульфокислоте (0,61 мл) до общего объема 12,5 мл] при комнатной температуре при перемешивании. После добавления смесь перемешивают в течение 1 часа при комнатной температуре и в течение 1 часа при охлаждении льдом и полученный бесцветный осадок собирают фильтрованием. Осадок сушат при 40^oС при пониженном давлении в течение 5 часов с получением указанного в заголовке соединения (3,0 г).

¹H ЯМР (D₂О) δ: 2,09 (2Н, м), 2,12 (3Н, с), 2,66 (3Н, м), 3,26 (2Н, м), 3,33 (2Н, м), 3,64 (2Н, м), 3,82 (1Н, с), 6,69 (1Н, с), 6,82 (1Н, с).

Пример 2
5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)-7-метоксибензоксазол
Указанное в заголовке соединение получают из 5-хлор-2-меркапто-7-метоксибензоксазола (250 мг, 1,16 ммоль) и гомопиперазина (232 мг) по способу, указанному в Примере 1 (а).

¹H ЯМР (СDС1₃) δ: 1,95 (2Н, м), 2,10 (1Н, ушир.), 2,92 (2Н, т, J = 5,8 Гц), 3,07 (2Н, м), 3,0 (2Н, м), 3,79 (4Н, м), 3,94 (3Н, с), 6,58 (1Н, д, J = 2,0 Гц), 6,96 (1Н, д, J = 2,0 Гц).

МС (TSP): m/z 282 (M⁺+1).

Пример 3
5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)-6-метилбензоксазол
Указанное в заголовке соединение (115 мг) получают из 5-хлор-2-меркапто-6-метилбензоксазола (200 мг, 1,16 ммоль) и гомопиперазина (200 мг) по способу, указанному в Примере 1 (а).

¹H ЯМР (CDCl₃) δ: 1,95 (4Н, м), 2,39 (3Н, с), 2,92 (2Н, т, J = 5,6 Гц), 3,07 (2Н, м), 3,0 (2Н, м), 3,78 (4Н, м), 7,10 (1Н, с), 7,30 (1Н, с).

МС (TSP): m/z 266 (M⁺+l).

Пример 4
5-хлор-7-этил-2-(1-гомопиперазинил)бензоксазол
Указанное в заголовке соединение (177 мг) получают из 5-хлор-7-этил-2-меркаптобензоксазола (200 мг, 1,16 ммоль) и гомопиперазина (188 мг) по способу Примера 1 (а).

¹H ЯМР (CDCl₃) δ: 1,29 (3Н, т, J = 7,6 Гц), 1,97 (2Н, м), 2,10 (1Н, ушир. ), 2,75 (2Н, кв, J = 8,4 Гц), 2,93 (2Н, д, J = 5,8 Гц), 3,08 (2Н, м), 3,80 (4Н, м), 6,81 (1Н, д, J = 2,0 Гц), 7,14 (1Н, д, J = 1,9 Гц).

Пример 5
5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)-7-гидроксиметилбензоксазол
Указанное в заголовке соединение (177 мг) получают из 5-хлор-7-гидроксиметил-6-метилбензоксазола (20 мг, 0,23 ммоль) и гомопиперазина (46 мг) таким же образом, как указано в Примере 1 (а).

¹H ЯМР (ДМСО-d₆) δ: 2,11 (2Н, ушир.), 3,22 (2Н, ушир.), 3,33 (1Н, ушир. ), 3,44 (2Н, м), 3,77 (2Н, м), 3,94 (2Н, м), 4,65 (2Н, с), 7,05 (1Н, с), 7,23 (1Н, с), 9,18 (ушир.).

Пример 6
7-ацетамино-5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)бензоксазол
Указанное в заголовке соединение (173 мг, 46%) получают из соединения Ссылочного Примера 3 (7-ацетамидо-5-хлор-2-меркаптобензоксазола, 292 мг, 1,20 ммоль) и гомопиперазина (482 мг) таким же образом, как указано в Примере 1 (а).

¹H ЯМР (CDCl₃) δ/ : 1,95 (2Н, м), 2,25 (3Н, с), 2,93 (2Н, т, J = 5,6 Гц), 3,07 (2Н, м), 3,78 (4Н, м), 7,08 (1Н, ушир.), 7,71 (1Н, ушир.).

MC (EI): m/z 308 (M⁺).

Пример 7
7-(трет-бутилоксикарбониламино)-5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)бензоксазол
Указанное в заголовке соединение (1,34 г) получают из соединения Ссылочного Примера 5 (7-(трет-бутилоксикарбонил-амино)-5-хлор-2-меркаптобензоксазола, 1,15 г, 3,82 ммоль) и гомопиперазина (1,91 мг) по способу Примера 1 (а).

¹H ЯМР (CDCl₃) δ: 1,56 (9Н, с), 1,96 (2Н, м), 2,93 (2Н, м), 3,09 (2Н, м), 3,78 (2Н, м), 3,81 (2Н, м), 6,58 (1Н, ушир.), 7,01 (1Н, д, J = 2,0 Гц), 7,65 (0,8Н, ушир.).

MC (TSP): m/z 367 (M⁺+1).

Пример 8
7-амино-5-хлор-2-(1-гомопиперазинил) бензоксазол гидрохлорид
К соединению Примера 7 (7-(трет-бутилоксикарбонил-амино)-5-хлор-2-(1-гомопиперазинил) бензоксазол, 0,68 г, 1,87 ммоль) добавляют 10 мл 5 н. хлористоводородной кислоты, и смеси дают реагировать в течение 1 часа при 5^oС. После выпаривания избытка хлористоводородной кислоты и воды концентрированием в вакууме остаток суспендируют в этаноле и осажденный продукт собирают фильтрованием и сушат с получением указанного в заголовке соединения в форме гидрохлорида (0,45 г).

¹H ЯМР (D₂O) δ: 2,14 (2Н, м), 3,29 (2Н, м), 3,41 (2Н, м), 3,75 (2Н, м), 3,94 (2Н, м), 6,67 (1Н, д, J = 2 Гц), 6,81 (1Н, д, J = 1,9 Гц).

МС (EI): m/z 266 (М⁺).

Пример 9
5,7-дихлор-2-(1-гомопиперазинил)бензоксазол
Указанное в заголовке соединение (0,18 г) получают из соединения Ссылочного Примера 8 (5,7-дихлор-2-меркапто-бензоксазола, 0,17 г, 0,59 ммоль) и гомопиперазина (0,89 г) таким же образом, как указано в Примере 1 (а).

¹H ЯМР (СDС1₃) δ: 1,98 (2Н, м), 2,95 (2Н, м), 3,10 (2Н, м), 3,82 (2Н, м), 3,83 (2Н, м), 6,98 (1Н, д, J = 1/7 Гц), 7,18 (1Н, д, J = 1,7 Гц).

Пример 10
5,7-дихлор-2-(1-гомопиперазинил)-6-метилбензоксазол
Указанное в заголовке соединение (77 мг) получают из соединения Ссылочного Примера 6 (5,7-дихлор-2-меркапто-6-метилбензоксазола, 90 мг, 0,384 ммоль) и гомопиперазина (115 мг) таким же образом, как указано в Примере 1 (а).

¹H ЯМР (CDCl₃) δ: 1,97 (2Н, м), 2,46 (3Н, с), 2,94 (2Н, м), 3,09 (2Н, м), 3,79 (2Н, м), 3,82 (2Н, м), 7,24 (1Н, с).

Пример 11
5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)-6,7-диметилбензоксазол
Указанное в заголовке соединение (103 мг) получают из соединения Ссылочного Примера 7 (5-хлор-2-меркапто-6,7-диметилбензоксазола, 100 мг, 0,468 ммоль) и гомопиперазина (141 мг) по способу Примера 1 (а).

¹H ЯМР (CDCl₃) δ: 1,95 (2Н, м), 2,33 (3Н, с), 2,36 (3Н, с), 2,92 (2Н, м), 3,08 (2Н, м), 3,77 (2Н, м), 3,80 (2Н, м), 7,19 (1Н, с).

Пример 12
7-(бензиламино)-5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)бензоксазол
(а) [7-амино-5-хлор-2-[1-(4-бензилоксикарбонил)гомопиперазинил] бензоксазол
Соединение Примера 7 [7-(трет-бутилоксикарбониламино)-5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)бензоксазол, 0,2 г, 0,545 ммоль] растворяют в метиленхлориде (4 мл), и к смеси добавляют триэтиламин (0,153 мл), а затем бензилхлорформиат (0,094 мл) при 5^oС. После перемешивания в течение 3 часов к реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия (3 мл) для прекращения реакции. Раствор разбавляют диэтиловым эфиром (10 мл) для разделения фаз. Водный слой экстрагируют диэтиловым эфиром (10 мл). К объединенному раствору полученного экстракта и указанного выше органического слоя добавляют воду (10 мл) и раствор сильно подкисляют добавлением 5 н. хлористоводородной кислоты. Водный слой отделяют и к нему добавляют диэтиловый эфир (10 мл), а затем подщелачивают 5 н. водным гидроксидом натрия. Органический слой промывают насыщенным солевым раствором (20 мл), сушат над безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (282 мг).

(b) 7-(бензиламино)-5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)бензоксазол
К раствору соединения Примера 12 (а) [7-амино-5-хлор-2-[1-(4-бензилоксикарбонил)гомопиперазинил] бензоксазол, 47 мг, 0,117 ммоль] в 1,2-дихлорэтане (2 мл) добавляют уксусную кислоту (0,067 мл), а затем к смеси при охлаждении льдом добавляют триацетоксиборгидрид натрия (50 мг). После перемешивания в течение 3 часов к реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия для остановки реакции и разбавляют этилацетатом. Органический слой промывают водой, а затем сушат над безводным сульфатом магния. Растворитель выпаривают при пониженном давлении с получением неочищенного продукта в виде масла (55 мг). Масло растворяют в метиленхлориде (2 мл) и к раствору добавляют промышленно доступный 1М раствор трихлорида бора в метиленхлориде (0,26 мл) при 0^oС, и смесь перемешивают в течение 3 часов. Затем реакцию останавливают насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Смесь разбавляют этилацетатом и органический слой промывают водой. Органический слой сушат над безводным сульфатом магния и затем растворитель выпаривают при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения в виде неочищенного продукта. Продукт очищают колоночной хроматографией на силикагеле (метиленхлорид:метанол = 5:1 об/об) с получением указанного в заголовке соединения (7 мг).

¹H ЯМР (СDС1₃) δ: 1,87 (2Н, м), 2,86 (2Н, м), 2,98 (2Н, м), 3,69 (2Н, м), 3,70 (2Н, м), 4,36 (2Н, с), 6,30 (1Н, д, J = 1,9 Гц), 6,69 (1Н, д, J = 1,7 Гц), 7,22-7,34 (5Н, м).

МС (TSP): m/z 357 (M⁺+1).

Пример 13
5-хлор-7-этиламино-2-(1-гомопиперазинил)бензоксазол
Соединение Примера 8 (7-ацетамино-5-хлор-2-(1-гомопиперазинил) бензоксазол, 23 мг) растворяют в ТГФ (2 мл) и к раствору добавляют литийалюминийгидрид (13 мг) при 0^oС, и раствор перемешивают в течение около 3 часов. Реакцию останавливают водой (1 мл) и раствор разбавляют этилацетатом. Органический слой промывают водой, сушат над безводным сульфатом магния и растворитель выпаривают при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (4 мг).

¹H ЯМР (D₂О) δ: 1,15 (3Н, т, J = 7,3 Гц), 2,14 (2Н, м), 3,29 (2Н, м), 3,31 (2Н, м), 3,40 (2Н, м), 3,75 (2Н, т, J = 5,8 Гц), 3,94 (2Н, т, J = 5, 1 Гц), 6,85 (1Н, д, J = 1,7 Гц), 7,02 (1Н, д, J = 1,4 Гц).

MC (FAB): m/z 295 (M⁺+1).

Пример 14
5-хлор-7-метансульфониламино-2-(1-гомопиперазинил)бензоксазол
(a) 7-амино-5-хлор-2-[1-(4-трет-бутилоксикарбонил)-гомопиперазинил]бензоксазол
Соединение Примера 8 (7-амино-5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)бензоксазол, 0,12 г) растворяют в метиленхлориде (12 мл) и к раствору добавляют триэтиламин (0,25 мл). Раствор охлаждают при помощи льда, добавляют ди-трет-бутилдикарбонат (0,170 мл) и затем смесь перемешивают в течение 3 часов. Реакцию останавливают добавлением насыщенного водного раствора гидрокарбоната натрия (5 мл) и реакционную смесь разбавляют этилацетатом (20 мл). Органический слой дважды промывают насыщенным солевым раствором (20 мл) и полученный органический слой сушат над безводным сульфатом магния. Растворитель выпаривают при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения в виде масла грязно-серого цвета (0,272 г).

(b) 5-хлор-7-метансульфониламино-2-(1-гомопиперазинил)-бензоксазол гидрохлорид
Соединение Примера 14 (а) (7-амино-5-хлор-2-[1-(4-трет-бутилоксикарбонил) гомопиперазинил] бензоксазол, 45 мг, 0,123 ммоль) растворяют в метиленхлориде (2 мл) и к раствору при 0^oС добавляют последовательно триэтиламин (0,052 мл) и метансульфонилхлорид (0,01 мл). После перемешивания реакционной смеси в течение 3 часов реакцию останавливают с использованием водного раствора гидрокарбоната натрия. Реакционную смесь разбавляют этилацетатом и органический слой промывают водой и сушат над безводным сульфатом магния. К раствору добавляют 4 н. хлористоводородную кислоту в этилацетате (1 мл) и осажденные твердые вещества собирают фильтрованием с получением указанного в заголовке соединения (20 мг).

¹H ЯМР (СD₃ОD) δ: 2,22 (2Н, м), 3,05 (3Н, с), 3,35 (2Н, м), 3,47 (2Н, м), 3,86 (2Н, т, J = 6,1 Гц), 4,04 (2Н, т, J = 5, 6 Гц), 7,10 (2Н, м).

МС (FAB): m/z 345 (M⁺+1).

Пример 15
7-бензоиламино-5-хлор-2-(1-гомопиперазинил)бензоксазол гидрохлорид
Соединение Примера 14 (а) (7-амино-5-хлор-2-[1-(4-трет-бутилоксикарбонил)гомопиперазинил] бензоксазол, 48 мг, 0,130 ммоль) растворяют в метиленхлориде (2 мл) и к раствору при 0^oС добавляют последовательно триэтиламин (0,056 мл) и бензоилхлорид (0,031 мл). После перемешивания реакционной смеси в течение 3 часов реакцию останавливают с использованием водного раствора гидрокарбоната натрия. Реакционную смесь разбавляют этилацетатом и органический слой промывают водой и сушат над безводным сульфатом магния. К раствору добавляют 4 н. хлористоводородную кислоту в этилацетате (1 мл) и осажденные твердые вещества собирают фильтрованием с получением указанного в заголовке соединения (20 мг).

¹H ЯМР (СD₃OD) δ: 2,28 (2Н, м), 3,42 (2Н, м), 3,53 (2Н, м), 3,92 (2Н, т, J = 6,1 Гц), 4,09 (2Н, м), 7,25 (1Н, д, J = 2,0 Гц), 7,37 (1Н, Д, J = 2,0 Гц), 7,55 (2Н, т, J = 7,3 Гц), 7,64 (1Н, т, J = 7,5 Гц), 7,98 (2Н, м).

МС (FAB): m/z 371 (M⁺+1).

Пример 16
5-хлор-7-изобутириламино-2-(1-гомопиперазинил)бензоксазол гидрохлорид
Соединение Примера 14 (а) (7-амино-5-хлор-2-[1-(4-трет-бутилоксикарбонил)гомопиперазинил] бензоксазол, 58 мг, 0,159 ммоль) растворяют в метиленхлориде (2 мл) и к раствору при 0^oС добавляют последовательно триэтиламин (0,067 мл) и изобутироилхлорид (0,013 мл). После перемешивания реакционной смеси в течение 3 часов реакцию останавливают с использованием водного раствора гидрокарбоната натрия. Реакционную смесь разбавляют этилацетатом и органический слой промывают водой и сушат над безводным сульфатом магния. К раствору добавляют 4 н. хлористоводородную кислоту в этилацетате (1 мл) и осажденные твердые вещества собирают фильтрованием с получением указанного в заголовке соединения (45 мг).

¹H ЯМР (CD₃OD) δ: 1,24 (6Н, д, J = 7,1 Гц), 2,32 (2Н, м), 2,79 (1H, м), 3,44 (2Н, м), 3,57 (2Н, м), 3,94 (2Н, м), 4,15 (2Н, м), 7,19 (1H, д, J = 1,9 Гц), 7,54 (1H, д, J = 1,9 Гц).

МС (FAB): m/z 337 (M⁺+1).

Препаративный Пример 1
Получение таблеток
Гидрохлорид соединения Примера 1 (3,0 г), лактозу (83,0 г), карбоксиметилкрахмал натрия (10,0 г) и гидроксипропилцеллюлозу (3,0 г) смешивают и к смеси добавляют дистиллированную воду (6,0 г) и все перемешивают. Смесь гранулируют, сушат и просеивают через сито для доведения до нужного размера частиц. Полученные гранулы смешивают со стеаратом магния (1,0 г), прессуют в 100-мг таблетки с получением таблеток, каждая из которых содержит 3,0 мг гидрохлорида соединения Примера 1.

Препаративный Пример 2
Получение гранул
Сульфат соединения Примера 1 (5,0 г), лактозу (759,5 г), эритрит (200,0 г) и гидроксипропилцеллюлозу (30,0 г) смешивают и к смеси добавляют дистиллированную воду (70,0 г) и все перемешивают. Смесь гранулируют, сушат и просеивают через сито для регулирования размера частиц. Полученные гранулы смешивают со стеаратом магния (5,0 г) и вкусовой добавкой (0,5 г) с получением гранул, содержащих 5,0 мг сульфата соединения Примера 1 на 1,0 г.

Препаративный Пример 3
Получение препарата для инъекции
Гидрохлорид соединения Примера 1 (60,0 мг) растворяют в дистиллированной воде для инъекций в соответствии с фармакопеей Японии (90 мл) и доводят до объема 100 мл дистиллированной водой для инъекций в соответствии с фармакопеей Японии. Полученный раствор фильтруют, заполняют им ампулы (5,0 мл для каждой ампулы) и лиофилизируют обычным способом, ампулы герметично запаивают с получением препарата для инъекций, содержащего 3,0 мг гидрохлорида соединения Примера 1 на 1 ампулу. Данный препарат растворяют в физиологическом растворе в соответствии с фармакопеей Японии (5,0 мл), растворе глюкозы для инъекций в соответствии с фармакопеей Японии (5%, 5,0 мл) или т.п. непосредственно при применении, и полученный раствор можно непосредственно вводить внутривенно, подкожно и т.п. Альтернативно, полученный раствор можно вводить, смешивая его с инъецируемым раствором для капельного вливания.

Препаративный Пример 4
Получение суппозиториев
Метансульфонат соединения Примера 1 (150,0 мг) смешивают с расплавленной жирной основой суппозиториев, находящейся в горячем состоянии (Witepsol Н15, 499,85 г), и смесью заполняют форму (1,0 г для каждого суппозитория) и затем охлаждают с получением суппозиториев, содержащих 3,0 мг метансульфоната соединения Примера 1 на каждый суппозиторий.

Пример Испытания 1
Испытание активирующего действия 5-НТ₃ рецептора
Антагонистическую активность в отношении 5-НТз рецептора и активирующее 5-НТ₃ рецептор действие указанных ниже типичных соединений, охватываемых объемом соединений бензоксазола настоящего изобретения:
2-(1-гомопиперазинил)бензоксазол (А) (соединение, раскрытое в Японской патентной публикации (KOKAI) 6-345744/1994),
5,7-диметил-2-(4-метил-1-пиперазинил)бензоксазол (В),
5,7-диметил-2-(1-пиперазинил)бензоксазол (С),
5-хлор-7-метил-2-(4-метил-1-пиперазинил)бензоксазол (D) и
5-хлор-7-метил-2-(4-метил-1-гомопиперазинил)бензоксазол (Е) (соединения, раскрытые в Японской патентной публикации (KOKAI) 10-29987/1998) и
5-хлор-7-метил-2-(1-пиперазинил)бензоксазол (F) (соединение Ссылочного Примера 3 настоящего изобретения), измеряли следующим образом. Результаты представлены в таблице 1.

Из подвздошной кишки самцов морских свинок Hartley (500 г до 800 г) получали продольные образцы мышц около 20 мм. Образцы подвешивали при натяжении около 0,5 г в пробирках Magnus и изометрически измеряли реакцию сокращения мышц. Образцы заранее обрабатывали дважды 0,3 мкМ 5-НТ в течение 1 часа для десенсибилизации 5-НТ₄ рецепторов, и затем добавляли 5-НТ в концентрации 0,1 до 30 мкМ для исследования дозозависимой реакции сокращения под действием 5-НТ₃ рецепторов. Максимальную реакцию наблюдали при концентрации 10 мкМ. Коэффициент активации 5-НТ₃ рецептора, i.a., представлен в виде отношения максимальной реакции, полученной для каждого соединения, к максимальной реакции сокращения, полученной с использованием 10 мкМ 5-НТ, которую принимали за 1. Показатель силы связывания с 5-НТ₃ рецептором, pD₂, представлен отрицательным логарифмическим значением (мольная концентрация), при котором получают 50% максимального сокращения для каждого соединения. Что касается антагонистической активности каждого соединения против 5-НТ₃ рецептора, подсчитывали коэффициент ингибирования, который представляет отношение сокращения, полученного при применении 10 мкМ 5-НТ к образцу, который был заранее обработан 10 мкМ каждого соединения, к сокращению, полученному при применении 10 мкМ 5-НТ к необработанному образцу.

Испытания активации 5-HT₃ рецептора (см. Таблицу 1).

Пример Испытания 2
Испытание на ингибиторное действие на диарею у крыс при ограничительной нагрузке
Действие по ингибированию диареи у крыс при ограничительной нагрузке соединения Примера 1 (b) настоящего изобретения. Гидрохлорида 5,7-диметил-2-(1-пиперазинил)-бензоксазола (С) и гидрохлорида 5-хлор-7-метил-2-(4-метил-1-гомопиперазинил)бензоксазола (Е) (соединения, раскрытые в Японской патентной публикации (KOKAI) 10-29987/1998) и Granisetron (G) в соответствии с методом C. L. Williams et al. [GASTROENTEROLOGY, 94, 611-621 (1988)] определяли, как указано ниже, и результаты анализировали нелинейным методом наименьших квадратов. Результаты представлены в Таблице 2.

Самцов крыс Wistar возрастом 8 недель подвергали голоданию с вечера дня перед испытанием. Крысам каждое испытываемое соединение вводили перорально. Через 30 минут крыс связывали путем связывания их передних лап и задних лап при помощи проволоки. Крыс оставляли в отдельных клетках на белых листах при люминесцентном освещении в течение 3 часов. Когда волосяной покров около ануса был загрязнен испражнениями или испражнения не имели твердой формы, определяли, что крысы страдают диареей. Испытание проводили с группами крыс, каждая из которых включала по 8 крыс.

Действие по ингибированию диареи у крыс при ограничительной нагрузке (см. таблицу 2).

Пример испытания 3
Действие на транспортирующую способность толстой кишки здоровых мышей
Действие на транспортирующую способность толстой кишки здоровых мышей соединения Примера 1 (b) настоящего изобретения, гидрохлорида 5,7-диметил-2-(1-пиперазинил)-бензоксазола (С) и гидрохлорида 5-хлор-7-метил-2-(4-метил-1-гомопиперазинил)бензоксазола (Е) (соединения, раскрытые в Японской патентной публикации (KOKAI) 10-29987/1998) и Granisetron (G) определяли в соответствии с методом Pendleton R.G. et al. [Drug Dev. Res., 9, 241-247 (1986)], как указано ниже. Результаты представлены в Таблице 3.

Каждое испытываемое соединение перорально вводили самцам взрослых мышей ddY возрастом 5-7 недель, которые голодали в течение 4 часов. Через 30 минут один стеклянный шарик диаметром 3 мм вводили через задний проход в прямую кишку каждой мыши на расстоянии 3 см от заднего прохода. После введения стеклянного шарика измеряли время (секунды) от введения до экскреции шарика из заднего прохода, и это время использовали как показатель транспортирующей способности толстой кишки. Испытание проводили с использованием групп мышей по 9-11 в каждой, и все процедуры осуществляли без анестезии.

Действие на транспортирующую способность толстой кишки здоровых мышей (см. таблицу 3)
Пример испытания 4
Испытание на метаболическую активность в печени человека с использованием in vitro системы
Метаболическую активность в печени человека соединения Примера 1 (b) настоящего изобретения, гидрохлорида 5,7-диметил-2-(1-пиперазинил)бензоксазола (С), гидрохлорида 5-хлор-7-метил-2-(4-метил-1-пиперазинил)бензоксазола (D) и гидрохлорида 5-хлор-7-метил-2-(4-метил-1-гомопиперазинил)-бензоксазола (Е) (соединения, раскрытые в Японской патентной публикации (КОКАI) 10-29987/1998) определяли при помощи системы испытания in vitro с использованием фракции S9 человека, как указано ниже. Результаты представлены в Таблице 4.

Испытание проводили в системе in vitro с использованием фракции печени S9 человека в присутствии системы NADPH, описанной ниже. Получали реакционную смесь с общим объемом 125 мкл, содержащую компоненты при заданной конечной концентрации (50 мкмоль/л испытываемого соединения, 6 ммоль/л MgCl₂•6H₂0, 1 ммоль/л β-NADP⁺ 10 ммоль/л глюкоза-6-фосфата (G-6-P), 0,7 ед. /мл G-6-P дегидрогеназы, 100 ммоль/л фосфата калия (рН 7,4), 0/1 ммоль/л EDTANa₂ и 1 мг/мл S9 печени человека) и инкубировали при 37^oС в течение 15 минут. Реакцию останавливали добавлением 125 мкл N,N-диметилформамида, содержащего вещество для внутреннего стандарта. Реакционную смесь центрифугировали (2000хg, 10 мин) и надосадочную жидкость подвергали ВЭЖХ анализу для определения концентрации незаряженного вещества. Поглощенное количество подсчитывали на основании концентрации незаряженного вещества, и уровень метаболизма представляли как активность на единицу количества белка. Для измерения соединений Примера 1, Соединения С и Е, в качестве внутреннего стандарта использовали Соединение D. Для измерения Соединения D в качестве внутреннего стандарта использовали соединение, раскрытое в Японской патентной публикации (KOKAI) 10-29987/1998, 5,7-дихлор-2-(4-метил-1-пиперазинил)бензоксазол.

Испытание на метаболическую активность в печени человека с использованием системы in vitro (см. таблицу 4).

Пример испытания 5
Испытание обратной мутации
Испытание обратной мутации проводили с использованием соединения Примера 1 (b) настоящего изобретения, гидрохлорида 5,7-диметил-2-(1-пиперазинил)бензоксазола (С), гидрохлорида 5-хлор-7-метил-2-(4-метил-1-пиперазинил)бензоксазола (D) и гидрохлорида 5-хлор-7-метил-2-(4-метил-1-гомопиперазинил)-бензоксазола (Е) (соединения, раскрытые в Японской патентной публикации (KOKAI) 10-29987/1998), и соединения, описанного в Ссылочном Примере 4 настоящего изобретения, т.е. гидрохлорида 5-хлор-7-метил-2-(1-пиперазинил)бензоксазола (F), в соответствии с методом Т, Matsushima et al. (Noropoth K. H. , Springer, Berlin-Heidelberg-New York, "Short-Term Test Systems For Detecting Carcinogens", pp. 273-285, 1980), на который дается ссылка в руководстве 471 ORGANIZATION FOR ECONOMIC COOPERATION AND DEVELOPMENT.

В результате испытания было определено, что соединение Примера 1 (b) настоящего изобретения, гидрохлорид Соединения С, гидрохлорид Соединения D и гидрохлорид Соединения Е оказались отрицательными в отношении обратной мутации, а гидрохлорид Соединения F оказался положительным для обратной мутации.

Пример 6
Испытание на токсичность
Соединение Примера 1 (b) настоящего изобретения суспендировали в дистиллированной воде для перорального введения взрослым самцам мышей в возрасте 7 недель (пять мышей). Соединение Примера 1 (b) не вызывало смертности у животных при дозе 300 мг/кг.

Промышленная применимость
Производные бензоксазола настоящего изобретения являются частичными активаторами 5-НТ₃ рецептора, обладая как сильной антагонистической активностью в отношении 5-НТ₃ рецептора, так и активирующим 5-НТ₃ рецептор действием (см. Пример испытания 1), и они продемонстрировали сильное действие по ингибированию диареи, вызванной ограничительными нагрузками (см. Пример испытания 2). Кроме того, соединения изобретения не оказывают действия на транспортирующую способность толстой кишки у здоровых мышей (см. Пример испытания 3). Более того, соединения изобретения плохо метаболизируются в печени человека (см. Пример испытания 4) и показывают низкую способность к обратной мутации (см. Пример испытания 5).

Из вышеуказанного можно сделать заключение, что частичные активаторы 5-НТ₃ рецептора, содержащие в качестве активного ингредиента соединения настоящего изобретения, являются полезными в качестве средств для профилактики или терапевтического лечения синдрома раздраженного кишечника, функционального расстройства пищеварительного тракта или диареи.

Изобретение относится к новому производному бензоксазола общей формулы (1) или его соли, R¹ представляет атом хлора, R² представляет водород, R³ представляет метильную группу. Лекарственное средство, обладающее антагонистическим действием в отношении серотонинового рецептора 5-НТ₃, содержащее соединение формулы (1) или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтическую добавку. Способ профилактического и/или терапевтического лечения состояния синдрома раздраженного кишечника, или функционального расстройства пищеварительного тракта, или состояния диареи, который включает введение млекопитающему профилактически и/или терапевтически эффективного количества соединения формулы (1) или его фармацевтически приемлемой соли. Соединение формулы (1) может использоваться в качестве антагониста серотонинового рецептора 5-НТ₃ или частичного активатора серотонинового рецептора 5-НТ₃. Технический результат - получение нового соединения, обладающего антагонистическим действием в отношении серотонинового рецептора 5-НТ₃. 5 c.п. ф-лы, 4 табл.

1. Соединение общей формулы (1) или его соль

в которой R¹ представляет атом хлора;
R² представляет атом водорода;
R³ представляет метильную группу. 2. Лекарственное средство, обладающее антагонистическим действием в отношении серотонинового рецептора 5-НТ₃, содержащее активный ингредиент и фармацевтическую добавку, отличающееся тем, что в качестве активного ингредиента содержит соединение по п. 1 или его фармацевтически приемлемую соль. 3. Способ профилактического и/или терапевтического лечения состояния синдрома раздраженного кишечника, или функционального расстройства пищеварительного тракта, или состояния диареи, который включает введение млекопитающему профилактически и/или терапевтически эффективного количества соединения по п. 1 или его фармацевтически приемлемой соли. 4. Антагонист серотонинового рецептора 5-НТ₃, включающий соединение по п. 1 или его фармацевтически приемлемую соль. 5. Частичный активатор серотонинового рецептора 5-НТ₃, включающий соединение по п. 1 или его фармацевтически приемлемую соль.