СПОСОБ НЕИНВАЗИВНОЙ ДИАГНОСТИКИ АКТИВНОГО ГАСТРИТА Российский патент 2003 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к клинической иммунологии и может быть использовано для неинвазивной диагностики активного гастрита.

В условиях современной медицины все большее значение приобретает морфологическая верификация заболеваний. Это в полной мере относится к гастроэнтерологическим заболеваниям и, в частности, к хроническому гастриту. Необходимость морфологической диагностики диктуется наличием дифференцированного патогенетического подхода к терапии данной патологии.

Морфологический метод широко используют в целях диагностики активности гастрита. Этот метод наиболее точен, но обладает рядом отрицательных свойств, к которым относятся инвазивность, достаточно высокая стоимость, трудоемкость и длительность исследования. Инвазивность метода определяется необходимостью проведения эндоскопического исследования с взятием биоптата слизистой оболочки желудка, что особенно затруднительно, например, в педиатрической практике в связи с малыми размерами желудка, тонкостью и обильным кровоснабжением его слизистой оболочки, нередко беспокойным поведением детей во время манипуляции. Высокая стоимость и трудоемкость морфологического метода обусловлены необходимостью обработки биоптатов (заливка, нарезка, фиксация, окраска) с привлечением лаборантов, использованием сложного оборудования, дорогостоящих реактивов. Естественно, что столь сложная технология подготовки препаратов с последующей консультацией врача-патологоанатома занимает определенное количество времени, обычно в пределах нескольких суток, что отсрочивает начало патогенетической терапии больных хроническим гастритом.

Задача изобретения - упрощение диагностики активного гастрита, сокращение сроков исследования, снижение его стоимости путем изучения сенсибилизации лимфоцитов. Заявляемое изобретение направлено на решение задач, заключающихся в обеспечении диагностики и патогенетической терапии хронического гастрита в наиболее ранние сроки.

Поставленная задача достигается тем, что при исследовании сенсибилизации лимфоцитов в реакции торможения миграции лейкоцитов крови с тканевым антигеном желудка у больных хроническим гастритом индекс торможения миграции прямо пропорционален выраженности гистологических критериев активности гастрита.

Способ выполняется следующим образом.

Берут 3 образца по 0,2 мл венозной гепаринизированной крови, смешивают: 1-й образец - с 0,05 мл физиологического раствора (контрольный), 2-й - с 0,05 мл ФГА (фитогемагглютинина), 3-й - с 0,05 мл желудочного антигена. Тканевый антиген готовят предварительно по общепринятой методике ("Иммунологические методы" под ред. Г. Фримеля, М., 1987). 3 капилляра для РТМЛ с одинаковыми диаметрами заполняют соответствующими образцами на 2/3 длины. Нижние концы капилляров запаивают, фиксируют в вертикальном положении в пластилин, центрифугируют при 1500 об./мин в течение 5 мин, помещают в инкубатор. После инкубации при 37^oС в течение 18-24 ч при помощи окуляра-микрометра измеряют зону миграции лейкоцитов, вычисляют индекс миграции в капиллярах с ФГА и желудочным антигеном (зона миграции (опыт)/ зона миграции (контроль)), процент миграции (индекс миграции* 100%). При проценте миграции менее 80% делают вывод о наличии фактора ингибиции лимфоцитов, т.е. о специфичности антигена в данной ситуации.

Вышеизложенный способ апробирован у 40 детей, больных хроническим гастритом. Всем этим детям также было выполнено эндоскопическое исследование с взятием биоптата слизистой оболочки антрального отдела желудка (этот отдел наиболее часто поражается при хроническом гастрите у детей) и последующим морфологическим исследованием. Выявлено, что величина торможения миграции лейкоцитов с тканевым антигеном желудка пропорциональна гистологическим критериям активности гастрита. Неактивный гастрит сопровождается отсутствием торможения миграции или минимальными ее величинами (процент миграции >80%). При поверхностном гастрите с минимальной активностью процент миграции колеблется в пределах 80-71%, при гастрите с поражением желез без атрофии с умеренной и выраженной активностью процент миграции лейкоцитов, как правило, 70% и менее. В контрольной группе (6 детей без клинико-инструментальных признаков поражения желудочно-кишечного тракта) торможения реакции миграции лимфоцитов с тканевыми антигенами желудка и двенадцатиперстной кишки не наблюдалось (таблица).

Пример 1. Девочка К., 9 лет. Длительность заболевания - полгода. С помощью клинико-инструментальных методов установлен диагноз: Гастрит хронический поверхностный, период обострения. Морфологический диагноз: Гастрит поверхностный, 0 степени активности. РТМЛ: процент миграции с ФГА - 92%, с антигеном желудка - 83,3%.

Пример 2. Мальчик Д., 10 лет. Длительность заболевания - 3 года. Клинико-инструментальный диагноз: Гастрит хронический поверхностный, период обострения. Морфологический диагноз: Гастрит поверхностный, 1 степени активности. РТМЛ: процент миграции с ФГА -105,3%, с антигеном желудка - 75%.

Пример 3. Девочка Н., 14 лет. Длительность заболевания - 7 лет. На основании клиники заболевания и эндоскопического исследования установлен диагноз: Гастродуоденит хронический: антральный поверхностный гастрит, поверхностный бульбит, период обострения. Морфологический диагноз: Гастрит с поражением желез без атрофии, 2 степени активности. РТМЛ: процент миграции с ФГА - 90%, с антигеном желудка - 60%.

Таким образом, определение выраженности торможения миграции лейкоцитов крови с тканевыми антигеном желудка дает возможность судить об активности хронического гастрита у детей. Разработанный способ не имеет аналогов, неинвазивен, прост и быстр в исполнении, позволяет в ряде случаев обойтись без морфологического исследования.

Изобретение относится к медицине, гастроэнтерологии, и может быть использовано для неинвазивной диагностики активного гастрита. Проводят иммунологическое исследование крови больных путем количественной оценки сенсибилизации лимфоцитов к тканевому антигену желудка в реакции торможения миграции лейкоцитов. При проценте миграции более 80% диагностируют неактивный гастрит, в пределах 70-80% - гастрит с минимальной активностью, менее 70% - гастрит с умеренной и выраженной активностью. Способ позволяет повысить эффективность неинвазивной диагностики активного гастрита. 1 табл.

Способ неинвазивной диагностики активного гастрита, включающий проведение иммунологического исследования крови больных, отличающийся тем, что иммунологическое исследование осуществляют путем количественной оценки сенсибилизации лимфоцитов к тканевому антигену желудка в реакции торможения миграции лейкоцитов и при проценте миграции более 80% диагностируют неактивный гастрит, в пределах 70-80% - гастрит с минимальной активностью, менее 70% - гастрит с умеренной и выраженной активностью.