СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ АУТОИММУННОГО АРТРИТА У ЖИВОТНЫХ Российский патент 2004 года по МПК A61D7/00 A61K33/38 

Изобретение относится к медицине и биологии и предназначено для консервативного лечения аутоиммунного артрита млекопитающих.

Известен способ лечения ревматоидного артрита пентоксифиллином, вводимым как перорально, так и внутривенно. Этот способ позволяет подавить активность воспаления за счет ингибиции продукции туморо-некротического фактора альфа; при этом он предусматривает дополнительный прием нестероидных противовоспалительных и базисных препаратов (патент РФ №2164137, А 61 К 31/52, А 61 Р 19/02, публ. 10.06.99).

Недостатком данного способа является как внутривенное введение лечебного препарата, оказывающего положительное воздействие на общий метаболический статус организма и не позволяющего купировать синовит-местное проявление аутоиммунного артрита, так и влияние только на один из многочисленных патогенетических механизмов аутоиммунного артрита.

Известно, что для ревматоидного артрита характерно развитие синовитов, связанных с воспалительно-деструктивными процессами, протекающими локально в области пораженного сустава и прилегающих к нему тканей, что требует введения лекарственных препаратов непосредственно в очаг поражения.

Имеется способ лечения аутоиммунного артрита путем сочетанного применения препаратов, влияющих одновременно на три звена патогенеза данного заболевания: тканевую гипоксию путем внутрисуставного введения антигипоксанта оксибутирата натрия, нарушение биосинтеза протеогликанов за счет перорального приема дозы и средства, иммунопатологический процесс путем перорального введения вобензима (патент РФ №2169560, А 61 К 31/045, А 61 Р 9/02, публ. 27.06.01).

Однако пероральный прием двух препаратов резко снижает эффективность лечения, так как доступ лекарственных агентов через желудочно-кишечный тракт к месту необходимого воздействия (пораженный сустав) значительно затруднен и замедлен.

Известен способ лечения адъювантного (аутоиммунного) артрита путем внутрисуставного введения 10 мг церулоплазмина - ферментативного неклеточного антиоксиданта, значительно уменьшающего активность воспалительно-деструктивных процессов в тканях пораженного сустава и снижающего общую активность воспаления (патент РФ №2156617, А 61 К 36/16, публ. 27.09.2000).

Однако использование церулоплазмина позволяет корректировать лишь один из многих патогенетических механизмов аутоиммунного артрита - неклеточное звено антиоксидантной системы, поэтому может быть эффективно лишь в комплексе с другими лекарственными препаратами (Карякина Е.В. Эндогенная интоксикация и нарушение метаболизма соединительной ткани у больных ревматоидным артритом. - Автореф. дис. д-ра мед. наук. - Москва, 1998. - 46 с.).

Принимая во внимание, что аутоиммунные артриты, к числу которых относится и ревматоидный артрит, имеет возможную инфекционно-вирусную природу (Кац Я.А., Митрофанов В.А. Ревматоидный артрит. Саратов, 1999. - 86 с.), общим недостатком вышеперечисленных способов лечения является то, что они способны влиять лишь на патогенетические механизмы развития патологического процесса и практически лишены возможности воздействия на микробиологические этиологические факторы данного заболевания.

Известен способ лечения ревматоидного артрита озоном, который вводится внутрисуставно в количестве 20 мл (300 мкг) (Меньшикова И.В., Бажанов Н.Н., Петухова Н.В. Использование озонотерапии для лечения больных артрологического профиля. /Тез. докл. III съезда ревматологов России, 2001 г., Рязань, с.71).

Известно, что растворенный в жидкостях озон используется как местно, так и внутривенно. Этот препарат оказывает бактерицидное и иммуномодулирующее действие, обеспечивает динамическое равновесие перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы (Конторщикова К.Н. Биохимические основы эффективности озонотерапии //Озон в биологии и медицине: Материалы II Всероссийской научно-практической конференции с международным участием. Нижний Новгород, 1995, с.8; Глухов А.А., Мошуров И.П., Глянцев В.П. Озоновая санация брюшной полости при лечении гнойного перитонита// Озон в биологии и медицине: Материалы II Всероссийской научно-практической конференции. Нижний Новгород, 1995, с.35; Качалина Т.С. и др. Иммуномодулирующее действие медицинского озона при воспалительных заболеваниях женских половых органов // Озон и методы эфферентной терапии в медицине: Материалы II Всероссийской научно-практической конференции, Нижний Новгород, 1998).

Недостатком известного способа является кратковременность активного воздействия вводимого препарата на патологический субстрат, что в значительной степени снижает эффективность лечения.

Известно, что в дистиллированной воде озон распадается с образованием активных свободных радикалов, продолжительность жизни которых составляет 2 ч 40 мин. Поэтому с лечебной целью озонированную воду рекомендуется использовать в течение 2 ч, а озонированный изотонический раствор - в течение 10-30 мин (Иванова И.П., Конторщикова К.Н. Физико-химические свойства озонированных растворов / Тез. докл. II Всероссийской научно-практической конференции с международным участием, 1995, Нижний Новгород, с.10-11; Бояринов Г.А. и др. Распад озона в физиологическом растворе. В кн.: Озон и методы эфферентной терапии в медицине / Тез. докл. III Всероссийской научно-практической конференции, Нижний Новгород, 1998, с.9-11).

Наиболее близким к заявляемому способу является способ лечения ревматоидного артрита ежедневным электрофорезом 2%-ным раствором повиаргола (курс лечения - 15-18 процедур), который сочетается с приемом родоновых ванн (Марюха Н.П., Паскаль Н.А. Эффективность повиаргол-электрофореза у больных ревматоидным артритом в условиях курорта Белокуриха - Препринт №4. - Новосибирск.-1995. - С.113-114).

Повиаргол - это препарат коллоидного серебра, содержащий два активных компонента - катионы серебра и синтетический полимер поливинилпирролидон, наиболее широко используемый в качестве заменителя плазмы и детоксикатора в виде 3-5% растворов (Лекарственные средства: Руководство для врачей /Под ред. М.Д.Машковского, М.: Медицина, 1996. - 438 с.). Известно, что интрализосомное накопление поливинилпирролидона в клетках печени способствует усилению их эндоцитарной активности, что обусловливает защитное и детоксикационное действие этого препарата при ряде заболеваний (Гаврилов Н.Г. с соавт. Лизосомотропные свойства поливинилпирролидона //Бюлл. экспер. биологии и мед.- 1982.- №7.-С.58-60).

Внутрисуставное введение 15-20% растворов поливинилпирролидона больным остеоартритом оказывает хондропротективный эффект, который обусловлен его лубрикационными свойствами, сходными с таковыми синовиальной жидкости (Матулис А.А. с соавт. Новый хондропротектор - поливинилпирролидон /Терапевтический архив. - 1990.- №5. -С.95-98). Установлено, что повиаргол обладает антибактериальным, противоотечным, репаративным и иммуномодулирующим действием (Вольский Н.Н., Селедцов В.И., Любимов Г.Ю. Иммуномодулирующие свойства препаратов коллоидного серебра // Препринт №1: Коллоидное серебро. Физико-химические свойства. Применение в медицине. Новосибирск, 1992. С.31-52; Нежинская Г.И., Копейкин В.В., Гмиро В.Е. Иммунотропные свойства высокодисперсного металлического серебра // Серебро в медицине, биологии и технике. Препринт №4. Новосибирск, 1995. С.151-153; Афиногенов А.Г. с соавт. Применение антисептика повиаргола в лечении острых и хронических заболеваний опорно-двигательной системы // Серебро в медицине, биологии и технике, выпуск 5. Новосибирск, 1996. С.72-75).

Недостатком известного способа является наличие "кожного барьера", который приводит к частичной потере вводимого лекарственного средства и ослаблению лечебного эффекта, а также необходимость дополнительного назначения других лечебных процедур - родоновых ванн.

Задача изобретения - повышение эффективности локальной терапии аутоиммунного артрита.

Сущность заявляемого изобретения заключается в том, что в способе лечения аутоиммунного артрита у животных, включающий применение фармакологического агента - повиаргола, 5 мг препарата из расчета разовой дозы 0,5 мг/кг массы растворяют в 1 мл 1% раствора никотиновой кислоты и полученную смесь двух препаратов вводят внутрисуставно.

Кроме того, препарат никотиновой кислоты применяют из расчета разовой дозы 1 мг/кг массы.

Кроме того, смесь растворов препаратов повиаргола и никотиновой кислоты вводят в количестве 0,02 мл 1 раз в 4 дня в течение 16 дней.

Никотиновая кислота является провитамином РР, в организме она превращается в никотинамид, который участвует в биосинтезе никотинамидных коферментов (НАД и НАДФ) в печени и эритроцитах. Никотинамин способствует сохранению функциональной активности тканей за счет расширения капилляров, улучшения микроциркуляции и коллатерального кровообращения, повышает оксигенацию, усиливает дезинтоксикационную способность печени, метилирует продукты обмена веществ (Лекарственные средства: Руководство для врачей / Под ред. М.Д.Машковского. - М.: Медицина, 1996.-438 с.).

Внутрисуставное введение двух препаратов: препарата повиаргола, обладающего бактерицидным, антисептическим, иммуномодулирующим и дезинтоксикационным свойствами, и препарата никотиновой кислоты, способствующего сохранению функциональной активности тканей, создает эффект оптимизации лечебного воздействия на патологический субстрат за счет торможения процесса воспалительной деструкции тканей пораженного сустава.

Способ осуществляется следующим образом. Непосредственно перед употреблением 5 мг порошка препарата повиаргола вносят в ампулу, содержащую 1 мл 1% раствора препарата никотиновой кислоты, и несколько раз встряхивают до растворения порошка. Полученную смесь в количестве 0,02 мл вводят инсулиновым шприцем в пораженный сустав, предварительно обработанный йодом и спиртом. Инъекции осуществляют один раз в 4 дня в течение 16 суток. Разовая доза препарата никотиновой кислоты равна 1,0 мг, а препарата повиаргола - 0,5 мг.

ПРИМЕР 1. Крыса №9/0.

Животное со сформированным аутоиммунным артритом. Опытный сустав - правый коленный. Длительность заболевания с момента введения полного адъюванта Фрейнда - 3 суток. Масса животного - 190 г.

При осмотре животное вялое, шерсть тусклая, местами взъерошена, движения неактивные. Визуально и при измерении объем опытного коленного сустава увеличен в 2 раза по сравнению со здоровым, кожа вокруг него гиперемирована, пальпация болезненная.

Общий анализ крови: СОЭ - 17,2 мм/ч, лейкоцитов - 20,6·10⁹/л, палочкоядерных - 8,5, сегментов - 27,9.

Животному проведен курс лечения по указанному способу, включавший внутрисуставное введение 0,02 мл раствора, содержащего смесь двух препаратов - никотиновой кислоты из расчета 1,0 мг/кг массы и повиаргола из расчета 0,5 мг/кг массы. Инъекции осуществляли 1 раз в 4 дня в течение 16 дней.

После лечения отмечено улучшение клинической картины, что проявлялось в повышении общей активности и подвижности животного. Шерсть стала гладкой и блестящей. Объем опытного коленного сустава стал в 1,8 раза меньше, чем до лечения, кожа вокруг него имела обычную окраску.

Масса животного увеличилась до 220 г.

Имелась положительная динамика лабораторных показателей: уровень СОЭ снизился до 10 мм/ч, количество лейкоцитов уменьшилось до 10,9 10⁹/л, из них количество палочкоядерных уменьшилось до 4,4, а сегментоядерных увеличилось до 39,5.

При макроскопическом исследовании опытных коленных суставов животных, леченных предложенным способом, патологические изменения были минимальны и касались лишь параартикулярных тканей, которые были незначительно утолщены по сравнению с таковыми здоровых суставов. Синовиальная оболочка на всем протяжении имела обычный вид, ворсины и выступы на ее поверхности отсутствовали. Мыщелки обеих костей, образующих сустав, также имели обычную форму. Суставной хрящ был мало изменен, поверхность его на значительном протяжении оставалась гладкой и блестящей, а небольшие шероховатые участки определялись лишь по краям мыщелков большеберцовой кости.

При гистоморфометрическом исследовании установлено, что микроструктура суставных тканей изменена незначительно. В синовиальной оболочке выявлялась лишь скудная диффузная лимфоидноклеточная инфильтрация и слабо выраженный очаговый фиброз стромы. Признаки воспалительной деструкции соединительной ткани отсутствовали. Суставной хрящ на значительном протяжении имел нормальную структуру и только в краевых отделах определялись мелкие очаги деструкции в виде разволокнения поверхностного слоя с потерей части хондроцитов. Микроструктура субхондральных отделов отклонений от нормы не имела.

Таким образом, проведенный курс лечения предлагаемым способом позволил значительно улучшить клинические и лабораторные показатели, а также уменьшить степень выраженности патологических изменений суставных тканей.

ПРИМЕР 2. Крыса №8/0.

Животное со сформированным аутоиммунным артритом. Опытный сустав - правый коленный. Длительность заболевания с момента введения полного адъюванта Фрейнда - 3 суток. Масса животного - 185 г.

При осмотре животное малоподвижно, шерсть тусклая, местами мокрая, движения неактивные. При внешнем осмотре суставы отечны. Объем опытного коленного сустава по сравнению со здоровым увеличен в 1,8 раза, кожа гиперемирована, пальпация болезненная.

Общий анализ крови: СОЭ - 18,3 мм/ч, лейкоцитов - 19,8·10⁹/л, палочкоядерных - 8,9, сегментов - 28,2.

Животному проведен курс лечения по предложенному способу, включающий внутрисуставное введение 0,02 мл раствора, содержащего смесь двух препаратов - никотиновой кислоты из расчета разовой дозы 1,0 мг/кг массы и повиаргола из расчета разовой дозы 0,5 мг/кг массы. Инъекции осуществляли 1 раз в 4 дня в течение 16 дней.

После лечения клиническая картина значительно улучшилась: животное стало активным и подвижным с гладкой и сухой шерстью. Объем опытного коленного сустава уменьшился в 2 раза, гиперемия кожи исчезла.

Масса животного увеличилась до 210 г.

Установлена положительная динамика показателей крови: уровень СОЭ снизился до 11 мм/ч, количество лейкоцитов уменьшилось до 10,1·10⁹/л; из них количество палочкоядерных уменьшилось до 4,6, а сегментоядерных увеличилось до 38,9.

Макроскопически ткани опытных коленных суставов практически не отличались от здоровых. Имелся лишь небольшой очаг шероховатости суставного хряща, расположенный по краю наружного мыщелка большеберцовой кости. Мыщелки обеих костей, образующих сустав, не были изменены.

Гистоморфометрическое исследование тканей опытного коленного сустава установило наличие лишь слабо выраженного воспаления в параартикулярных тканях и синовиальной оболочке. В них определялась только незначительная диффузная лимфоидно-плазмоцитарная инфильтрация и мелкие очаги фиброза. Признаки воспалительной деструкции отсутствовали. Микроскопическая картина суставного хряща на большем протяжении была нормальной. Лишь в краевых участках наружного мыщелка большеберцовой кости имелись небольшие зоны хряща с разволокненным поверхностным слоем и уменьшенным количеством хондроцитов. Патологические изменения в костной ткани опытного сустава отсутствовали.

Таким образом, лечение животного предлагаемым способом привело к значительному улучшению клинических и лабораторных показателей, а также сохранению микроструктуры тканей опытного сустава.

В экспериментальной лаборатории СарНИИТО проведена серийная апробация предложенного способа на 20 беспородных белых крысах с воспроизведенным аутоиммунным артритом правых коленных суставов (Сигидин Н.Г., Иванова М.М. Диффузные болезни соединительной ткани. -М.: Медицина, 1994. -541 с.). Животные распределялись по двум сериям (10 штук в каждой): 1-я серия - контрольная (без лечения), 2-я серия - опытная (лечение предложенным способом).

Лечение начинали через 3 дня после введения полного адъюванта Фрейнда. Животных выводили из опыта сразу же после окончания курса лечения - через 16 дней. Было произведено макро- и микроскопическое исследование стандартных участков тканей опытного коленного сустава, включая параартикулярные ткани, синовиальную оболочку, покровный хрящ и субхондральную кость.

Макроскопически установлено, что у всех животных 1-й серии в исследуемых тканях имелись значительные патологические изменения. Параартикулярные ткани были утолщены и разрыхлены с выраженным сосудистым рисунком. Синовиальная оболочка была также утолщена, с неровной поверхностью, имеющей небольшие выступы. Суставной хрящ на значительном протяжении имел тусклую поверхность, которая в краевых зонах была узурирована. У 4-х животных в краевых отделах мыщелков выявлялись участки замещения хряща рыхлой соединительной тканью. У 2-х животных по краям наружных мыщелков большеберцовой кости имелись костные разрастания в виде остеофитов.

У животных 2-й серии патологические изменения параартикулярных тканей в виде их незначительного утолщения были выявлены в 3-х случаях. Синовиальная оболочка в 100% случаев имела нормальный вид. Суставной хрящ у 4-х животных имел небольшие шероховатые участки в краевых зонах мыщелков, в остальных случаях он был гладкий и блестящий на всем протяжении. Патологические изменения костной ткани у всех животных этой серии отсутствовали.

Данные микроскопического исследования соответствовали выше описанным и укладывались в картину воспалительной деструкции. У животных 1-й серии в параартикулярных тканях имелась пролиферация сосудов, диффузная и периваскулярная лимфоидно-плазмоцитарная инфильтрация, а также зоны дезорганизации коллагеновых волокон в виде их гомогенизации, набухания и повышенной эозинофилии. Аналогичные признаки поражения выявлялись и в синовиальной оболочке, в которой определялась еще и очаговая пролиферация синовиоцитов.

Из признаков воспалительной деструкции суставного хряща имело место разволокнение поверхностной зоны с ее очаговой узурацией и уменьшением количества хондроцитов. У 4-х животных в краевых отделах хряща выявлялись разрастания паннуса. В этих же случаях определялось истончение субхондральной костной пластинки, а в 2-х случаях - незначительное костное утолщение края внутреннего мыщелка большеберцовой кости.

У животных 2-й серии в параартикулярных тканях и синовиальной оболочке выявлялся лишь слабо выраженный воспалительный процесс в виде диффузной круглоклеточной инфильтрации и мелкоочагового фиброза стромы. Признаки воспалительной деструкции выявлялись только в краевых отделах суставного хряща и были представлены небольшими участками разволокнения поверхностного слоя с потерей хондроцитов. Центральные отделы покровного хряща имели нормальную микроструктуру. Патологических изменений в костной ткани у животных этой серии не выявлено.

Сравнительный анализ результатов морфометрического исследования суставных тканей животных двух серий подтвердил вышеизложенное. У животных, не получавших лечения (1-я серия), показатели суммы баллов признаков поражения параартикулярных тканей (5,42±0,18 баллов), синовиальной оболочки (6,98±0,52 балла) и суставного хряща (8,41±0,35 баллов) были значительно выше аналогичных показателей животных 2-й серии, леченных предлагаемым способом (2,11±0,12 балла, Р<0,001; 3,45±0,18 балла, Р<0,001; 3,68±0,11 балла, Р<0,001 соответственно).

Таким образом, экспериментальное исследование показало, что использование предложенного способа для лечения аутоиммунного артрита предупреждает развитие воспалительной деструкции параартикулярных тканей, синовиальной оболочки и покровного хряща пораженных суставов.

Медико-клиническая эффективность предлагаемого способа заключается в торможении развития патологических изменений в соединительно-тканных структурах сустава в условиях аутоиммунного воспаления.

Изобретение относится к ветеринарии и может быть использовано для лечения аутоиммунного артрита у животных. Применяют повиаргол, 5 мг которого из расчета разовой дозы 0,5 мг/кг массы растворяют в 1 мл 1% раствора никотиновой кислоты, и полученную смесь двух препаратов вводят внутрисуставно в количестве 0,02 мл 1 раз в 4 дня в течение 16 дней. При этом препарат никотиновой кислоты вводят из расчета разовой дозы 1 мг/кг массы. Способ позволяет повысить эффективность лечения аутоиммунного артрита у животных. 2 з.п.ф-лы.

1. Способ лечения аутоиммунного артрита у животных, отличающийся тем, что применяют повиаргол, 5 мг которого из расчета разовой дозы 0,5 мг/кг массы растворяют в 1 мл 1%-ного раствора никотиновой кислоты и полученную смесь двух препаратов вводят внутрисуставно.2. Способ по п.1, отличающийся тем, что препарат никотиновой кислоты вводят из расчета разовой дозы 1 мг/кг массы.3. Способ по п.1, отличающийся тем, что смесь повиаргола и никотиновой кислоты вводят в количестве 0,02 мл 1 раз в 4 дня в течение 16 дней.