СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ХЛАМИДИОЗА ПРИ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ МУЖСКОЙ РЕПРОДУКТИВНОЙ СИСТЕМЫ Российский патент 2004 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к области медицины, а именно биохимии, и может быть использовано, в частности, для диагностики хламидиоза при воспалительных заболеваниях органов мужской репродуктивной системы.

В практической медицине известны различные способы диагностики хламидиоза при воспалительных заболеваниях органов мужской репродуктивной системы, основанные на выявлении в сыворотке крови антител против антигенов возбудителей с использованием иммуноферментного анализа (Колкова Н.И., Мартынова В.Р. К вопросам диагностики хламидийных инфекций. Клиническая лабораторная диагностика, М.: 1998. №2. С.20, 21), на использовании метода ДНК-гибридизации с применением меченного биотином ДНК-зонда, включающий обнаружение в нанесенном на нитроцеллюлозный фильтр исследуемом образце ДНК возбудителя (Квасов А.В., Жданов А.В., Письменская И.В., Файзуллина Н.М., Файзуллин Л.З., Сухих Г.Т. Применение меченного биотином ДНК-зонда для выявления возбудителей хронических урогенитальных инфекций.//Клиническая лабораторная диагностика. - М.: 1998. - №11. С.12-15.).

Недостатками этих способов являются:

- не достаточно хорошая воспроизводимость;

- трудоемкость, применение дорогостоящей аппаратуры;

- сравнительно частая встречаемость ложноположительных и ложноотрицательных результатов.

Наиболее близким способом к предлагаемому является способ диагностики хламидиоза по исследованию нативного мазка, основанный на реакции антигена и антитела с детекцией образовавшихся комплексов с помощью иммунофлуоресцентного анализа (Микроскопическая техника: Руководство. / Под ред. Д.С.Саркисова и Ю.Л.Перова. - М.: 1996. - С.315, 316).

Недостатком этого способа являются:

- не достаточно хорошая воспроизводимость;

- сравнительно частая встречаемость ложноотрицательных результатов из-за часто недостаточного количества клеточных элементов в нативном мазке и, соответственно, сравнительно низкой чувствительности.

Целью представленного изобретения является повышение чувствительности и прогностического значения отрицательного результата способа диагностики хламидиоза при воспалительных заболеваниях органов мужской репродуктивной системы при одновременной простоте и доступности для широкого практического применения.

Поставленная цель в изобретении достигается тем, что мазок готовят из осадка, полученного после центрифугирования спермы в течение 15 мин, при 12000 об/мин с последующим исследованием полученного образца методом иммунофлуоресцентного анализа.

Центрифугированием достигается повышение концентрации клеточных элементов в осадке, из которого в последующем делается мазок, и, соответственно, чувствительность способа диагностики хламидиоза в целом.

Таким образом, преимущество предлагаемого способа в более высокой чувствительности при достаточно высокой специфичности, относительно низкой себестоимости и простоте выполнения (что делает предлагаемый способ доступным для широкого практического применения) обеспечивается предварительным центрифугированием спермы и получением мазка из образовавшегося осадка с последующим исследованием методом иммунофлуоресцентного анализа.

Положительный эффект предлагаемого способа достигается повышением концентрации клеточных элементов в мазке. Специфичность предлагаемого способа составляет 82,3%, чувствительность 95,0%, эффективность 88,6%, прогностическое значение положительного результата 84,1%, прогностическое значение отрицательного результата 94,3%, что превышает аналогичные показатели прототипа (таблица).

Предложенный способ был успешно апробирован в Астраханском областном кожно-венерологическом диспансере и в Астраханском городском центре планирования семьи и репродукции с медико-генетической консультацией с ноября 2001 года по сентябрь 2002 года на 202 пациентах с воспалительными заболеваниями уретры и предстательной железы.

Ниже приводятся результаты апробации.

Пример №1. Пациент А. 1970 года рождения /медицинская карта амбулаторного больного №215/2002/. Обратился с жалобами на зуд, жжение в уретре. Болеет 2 недели. Выделения скудные слизистые. Объективно: кожные покровы чистые, губки не изменены, выделения скудные слизистые. Мазок без особенностей, лейкоцитов мало. В секрете предстательной железы лейкоцитов - 20-30 в поле зрения, липоидных телец - умеренно, гонококки - отсутствуют, трихомонады - отсутствуют. Иммунофлуоресцентный анализ мазка из уретры выявил наличие единичных хламидий при наличии менее 10 клеточных элементов в поле зрения.

Для подтверждения наличия хламидий проведено исследование мазка из осадка эякулята. Для приготовления мазка коагулировавший эякулят после полного разжижения центрифугировали в течение 15 мин при 12000 об/мин. Затем надосадочную жидкость удаляли микродозатором, а из осадка готовили мазок, который исследовался методом иммунофлуоресцентного анализа. Результат положительный, обнаружены хламидии, диагноз подтвержден. Назначено соответствующее лечение.

Пример №2. Пациент И. 1979 года рождения /медицинская карта амбулаторного больного №304/2002/. Обратился с жалобами на рези при мочеиспускании, зуд, жжение в уретре. Болеет 3 недели. Выделения умеренные слизисто-гнойные. Кожные покровы чистые, губки уретры инфильтрированы, гиперемированы, выделения слизисто-гнойные. Мазок: лейкоциты - до закрытия полей зрения, слизи умеренно, трихомонады - отсутствуют, гонококки - отсутствуют. В секрете предстательной железы лейкоцитов - 30-45 в поле зрения, липоидных телец умеренно, гонококки отсутствуют, трихомонады отсутствуют. Иммунофлуоресцентный анализ мазка из уретры наличие хламидий, уроплазм, микоплазм, гарднерелл не выявил. Дополнительно проведено исследование мазка из осадка эякулята по описанной выше методике (см. пример №1). Выявлены многочисленные хламидии ассоциированные с хвостами сперматозидов. Диагноз - хламидиоз. Для подтверждения диагноза проведена ПЦР-диагностика - результат положительный. Назначено лечение.

Пример №3. Пациент М. 1976 года рождения /медицинская карта амбулаторного больного №884/2002/. Обратился с жалобами на жжение в уретре. Болеет 3 недели. Выделения умеренные слизистые. Кожные покровы чистые, губки уретры умеренно гиперемированы, выделения слизистые. Мазок: лейкоциты - до 10-15 в полей зрения, слизи умеренно, трихомонады - отсутствуют, гонококки отсутствуют. В секрете предстательной железы лейкоцитов - 20-30 в поле зрения, липоидных телец много, гонококки - отсутствуют, трихомонады - отсутствуют. Иммунофлуоресцентный анализ мазка из уретры наличие хламидий, уроплазм, микоплазм, гарднерелл не выявил, эпителиальные клетки единичные в поле зрения (недостаточно клеточного материала для окончательного заключения). Дополнительно проведено исследование мазка из осадка эякулята по описанной выше методике (см. пример №1). Выявлены хламидии. Диагноз хламидиоз. Для подтверждения диагноза проведена ПЦР - диагностика - результат положительный. Назначено адекватное лечение.

Пример №4. Пациент С. 1971 года рождения /медицинская карта амбулаторного больного №1102/2002/. Обратился для обследования, после контакта с малознакомой женщиной, имевшего место 3 недели назад. Жалобы не предъявляет. Кожные покровы чистые, губки уретры не изменены, выделения незначительные, слизистые. Мазок: лейкоциты единичные в полей зрения, слизи умеренно, трихомонады - отсутствуют, гонококки - отсутствуют. В секрете предстательной железы лейкоцитов - 4-6 в поле зрения, липоидных телец - много, гонококки - отсутствуют, трихомонады - отсутствуют. Реакция иммунофлуоресценции выявила уреаплазмы. Дополнительно проведено исследование мазка из осадка эякулята по описанной выше методике (см. пример №1). Выявлены хламидии, ассоциированные с хвостами сперматозидов. Диагноз - микст-инфекция (уреаплазмоз, хламидиоз). Для подтверждения диагноза проведена ПЦР-диагностика - наличие уреаплазм и хламидий подтверждено. Назначено лечение, соответствующее диагнозу.

Предлагаемым способом достигается положительный эффект: повышается точность диагностики хламидиоза за счет увеличения чувствительности, эффективности и значительного увеличения прогностического значения отрицательного результата. Это позволяет назначить адекватное лечение, повысить его эффективность, избежать у ряде случаев гипердиагностики. Специфичность предлагаемого способа составляет 82,3%, чувствительность 95,0%, эффективность 88,6%, прогностическое значение положительного результата 84,1%, прогностическое значение отрицательного результата 94,3%, что превышает аналогичные показатели прототипа.

Предлагаемый способ может быть использован в клинической практике для диагностики хламидиоза при урогенитальных заболеваниях у мужчин.

Изобретение относится к области медицины, а именно биохимии, и может быть использовано для диагностики хламидиоза при воспалительных заболеваниях органов мужской репродуктивной системы. Сущность способа состоит в том, что методом иммунофлуоресценции исследуют мазки, приготовленные из осадка, образовавшегося после центрифугирования спермы в течение 15 мин при 12000 об/мин. Техническим результатом является повышение чувствительности способа. 1 табл.

Способ диагностики хламидиоза при воспалительных заболеваниях органов мужской репродуктивной системы путем иммунофлуоресцентного исследования мазков, отличающийся тем, что мазки готовят из осадка, образовавшегося после центрифугирования спермы в течение 15 мин при 12000 об/мин.